| 第一章 文献综述 | 第1-24页 |
| ·蛋白内含子概述 | 第10-16页 |
| ·蛋白内含子的结构及蛋白质剪切的机制 | 第10-11页 |
| ·蛋白质内含子介导的蛋白质纯化 | 第11-13页 |
| ·在靶蛋白的C 末端融合intein,在intein 的N 末端剪切 | 第12-13页 |
| ·在靶蛋白的N 末端融合intein,在intein 的C 末端剪切 | 第13页 |
| ·intein 介导的蛋白质连接(IPL)和表达蛋白连接(EPL) | 第13-14页 |
| ·intein 介导的蛋白质环化 | 第14-16页 |
| ·蛋白质的体内环化 | 第14-15页 |
| ·蛋白质的体外环化 | 第15-16页 |
| ·蛋白内含子用于科学研究的意义 | 第16页 |
| ·肽基脯氨酸顺反异构酶引言 | 第16-24页 |
| ·蛋白质折叠的一般过程 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌分子伴侣和折叠酶 | 第18-20页 |
| ·肽基脯氨酸顺反异构酶 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌表达系统的研究进展 | 第21-24页 |
| 第二章 材料和方法 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·实验用菌株 | 第24页 |
| ·与本论文有关的质粒 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·DNA 及蛋白分子质量标准 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·常用抗生素 | 第25页 |
| ·常用溶液 | 第25-26页 |
| ·抗体 | 第26页 |
| ·试剂盒其它试剂及用品 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·质粒的提取 | 第27-29页 |
| ·PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·寡聚核苷酸链的退火及回收 | 第30页 |
| ·DNA 限制性内切酶消化及消化后DNA 的纯化回收 | 第30页 |
| ·连接反应 | 第30-31页 |
| ·重组DNA 的转化，阳性克隆的筛选及测序鉴定 | 第31页 |
| ·表达纯化的转化，外源蛋白的表达及SDS-PAGE 分析 | 第31页 |
| ·蛋白质表达情况的SDS 聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第31-33页 |
| ·电击法转化大肠杆菌 | 第33-34页 |
| ·Western Blot | 第34页 |
| ·亲和纯化及柱切割 | 第34-36页 |
| 第三章 结果和分析 | 第36-41页 |
| ·抗膀胱癌单链抗体与肽基脯氨酸顺反异构酶融合及共表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·TF、pTPG、pTFPG、pTPCPG 构建载体的PCR 鉴定 | 第38-39页 |
| ·抗膀胱癌单链抗体在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39页 |
| ·抗膀胱癌单链抗体的纯化 | 第39-40页 |
| ·抗膀胱癌单链抗体的Western Blot 鉴定 | 第40-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-43页 |
| ·intein 介导的抗膀胱癌单链抗体的纯化 | 第41页 |
| ·抗膀胱癌单链抗体在有无FkpA 条件下可溶性表达的差异 | 第41-43页 |
| 第五章 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
