| 英文缩写索引 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 实验材料 | 第19-23页 |
| 一. 主要化学药品、生物试剂和同位素 | 第19页 |
| 二. 载体和菌株 | 第19页 |
| 三. 细胞株 | 第19页 |
| 四. 动物 | 第19页 |
| 五. 主要溶液的配制 | 第19-22页 |
| 六. 主要实验仪器 | 第22-23页 |
| 实验方法 | 第23-43页 |
| 一. 人类IL-24 cDNA克隆 | 第23-27页 |
| (一) 引物设计 | 第23页 |
| (二) 人脾脏组织总RNA抽提 | 第23页 |
| (三) 逆转录合成cDNA第一链 | 第23-24页 |
| (四) PCR扩增IL-24 cDNA | 第24-25页 |
| (五) IL-24 cDNA克隆入pUCm-T载体 | 第25-27页 |
| (六) pUCm-T-IL-24鉴定 | 第27页 |
| 二. 重组融合基因Igk7m | 第27-29页 |
| (一) 引物设计 | 第27-28页 |
| (二) PCR扩增融合基因Igk7m | 第28页 |
| (三) Igk7m克隆入pUCm-T载体 | 第28-29页 |
| 三. pcDNA3.1-Igk7m的构建 | 第29-33页 |
| (一) 回收Igk7m酶切片段 | 第29-30页 |
| (二) Igk7m克隆入质粒pcDNA3.1(+) | 第30-33页 |
| 四. pcDNA3.1-Igk7m稳定转染293细胞 | 第33-34页 |
| (一) 293细胞的准备 | 第33页 |
| (二) 脂质体法转染293细胞 | 第33-34页 |
| (三) 转染细胞的克隆筛选 | 第34页 |
| 五. 稳定表达rhIL-24的293细胞克隆的鉴定 | 第34-39页 |
| (一) Northern Blot鉴定 | 第34-37页 |
| (二) Western Blot鉴定 | 第37-39页 |
| 六. 转基因细胞培养液收集和rhIL-24蛋白富集 | 第39-40页 |
| (一) 转基因细胞培养液收集 | 第39页 |
| (二) 从转基因细胞培养液中富集rbIL-24蛋白 | 第39页 |
| (三) 分泌性rhIL-24蛋白检测 | 第39-40页 |
| 七. 分泌性rhIL-24蛋白影响肝癌细胞生长的体外试验 | 第40-42页 |
| (一) 细胞培养 | 第40页 |
| (二) 细胞生存率试验 | 第40页 |
| (三) 凋亡诱导检测试验(TUNEL法) | 第40-42页 |
| 八. 分泌性rhIL-24蛋白影响肝癌细胞生长的体内试验 | 第42-43页 |
| (一) 分泌性rhIL-24体外处理肝癌细胞SMMC-7721 | 第42页 |
| (二) SMMC-7721细胞皮下接种裸小鼠 | 第42-43页 |
| 实验结果 | 第43-57页 |
| 一. IL-24 cDNA克隆鉴定 | 第43页 |
| 1 RT-PCR产物的电泳分析 | 第43页 |
| 2 pUCm-T-IL-24的酶切分析 | 第43页 |
| 3 pUCm-T-IL-24的测序结果 | 第43页 |
| 二. 重组基因Igk7m鉴定 | 第43页 |
| 1 PCR扩增Igk7m的电泳分析 | 第43页 |
| 2 pUCm-T-Igk7m的酶切分析 | 第43页 |
| 3 pUCm-T-Igk7m的测序结果 | 第43页 |
| 三. pcDNA3.1-Igk7m的酶切鉴定 | 第43-46页 |
| 四. rhIL-24的表达鉴定 | 第46-48页 |
| 1 稳定表达rhIL-24的293细胞克隆鉴定 | 第46页 |
| 2 分泌性rhIL-24蛋白检测 | 第46-48页 |
| 五. 分泌性rhIL-24蛋白影响肝癌细胞生长的体外试验结果 | 第48-55页 |
| 1 细胞生存率试验结果 | 第48-53页 |
| 2 细胞凋亡诱导检测结果 | 第53-55页 |
| 六. 分泌性rhIL-24蛋白影响肝癌细胞生长的体内试验结果 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-62页 |
| 一. IL-24的分泌表达与修饰 | 第57-58页 |
| 二. IL-24特异性抗肿瘤作用 | 第58-59页 |
| 三. IL-24抑制肿瘤细胞生长和诱导癌细胞凋亡的作用机制 | 第59页 |
| 四. IL-24受体和特异性抗肿瘤作用间的关系 | 第59-60页 |
| 五. IL-24抗肿瘤作用与细胞因子特性间的关联 | 第60页 |
| 六. IL-24用于肿瘤治疗的几个优点 | 第60-61页 |
| 七. 实验存在的问题 | 第61-62页 |
| 全文小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 综述 Mda-7-一个新的抗肿瘤分子 | 第67-73页 |
| 研究生在读期间发表论文目录 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
