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小麦耐盐突变体TaGSK1基因的分离和鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
Abbreviations第8-9页
第一章 文献综述第9-39页
 第一节 植物耐盐性研究进展第9-21页
 第二节 小麦耐盐基因的原核表达模式研究第21-22页
 第三节 小麦遗传转化研究进展第22-33页
  一 农杆菌介导的遗传转化法第23-26页
  二 基因枪法第26-29页
  三 表达载体的构建第29-30页
  四 植物转基因系统的选择策略第30-31页
  五 植物遗传转化中出现的问题与对策第31-33页
 第四节 植物蛋白激酶的结构、进化与生物学功能的研究进展第33-38页
 第五节 研究目的及意义第38-39页
第二章 小麦糖原合成酶激酶(TaGSK1)基因的克隆和蛋白质的结构分析第39-52页
 1 材料和方法第39-43页
   ·试剂和材料第39页
   ·方法第39-43页
 2 结果第43-48页
   ·小麦TaGSK1的扩增和克隆第43-44页
   ·小麦TaGSK1基因的序列分析第44页
   ·TaGSK1基因及推断的蛋白结构比较分析第44-48页
 3 讨论第48-52页
第三章 小麦糖原合成酶激酶(TaGSK1)表达载体pBV221-gsk1的构建及原核表达第52-62页
 1 材料与方法第52-56页
   ·质粒和菌株第52页
   ·试剂第52页
   ·PBV221-gsk1表达载体的构建第52-54页
   ·TaGSK1的转化及表达第54-56页
   ·TaGSK1蛋白表达量的分析第56页
   ·转化子耐盐性分析第56页
 2 结果第56-58页
   ·pBV221-gsk1表达载体的鉴定第56页
   ·TaGSK1蛋白的表达第56-57页
   ·细菌的耐盐性分析第57-58页
 3 讨论第58-62页
第四章 小麦糖原合成酶激酶基因(TaGSK1)的鉴定第62-87页
 第一节 小麦基因组DNA中TaGSK1的克隆和测序第62-65页
  1 材料和方法第62-63页
   ·试剂和材料第62页
   ·方法第62-63页
  2 结果与分析第63-65页
   ·小麦TaGSK1的扩增和克隆第63-64页
   ·小麦TaGSK1基因的序列分析第64-65页
 第二节 小麦糖原合成酶激酶基因(TaGSK1)的农杆菌转化第65-77页
  1 材料和试剂第65-66页
   ·材料第65-66页
   ·试剂第66页
  2 方法第66-71页
   ·培养基第66-67页
   ·pBI121-gsk1双元载体的构建第67-68页
   ·小麦成熟胚愈伤组织的诱导及状态调整第68-69页
   ·农杆菌的电激转化第69页
   ·双元载体转化小麦愈伤第69-70页
   ·转基因愈伤的筛选与分化第70-71页
  3 结果第71-76页
   ·双元载体的构建及农杆菌转化第71-73页
   ·转基因小麦愈伤的制备、筛选及鉴定第73-76页
  4 讨论第76-77页
   ·载体构建及农杆菌转化第76页
   ·小麦的农杆菌转化第76-77页
 第三节 基因枪法转化小麦糖原合成酶激酶基因(TaGSK1)第77-87页
  1 材料与试剂第77-78页
   ·材料第77页
   ·试剂第77-78页
  2 实验方法第78-80页
   ·质粒DNA的制备第78页
   ·基因枪转化第78-79页
   ·抗性愈伤组织的筛选及分化第79-80页
  3 结果与分析第80-81页
   ·抗性愈伤的获得第80页
   ·抗性愈伤的筛选第80页
   ·抗性愈伤的分化第80-81页
   ·转基因愈伤的分子生物学鉴定第81页
  4 讨论第81-87页
   ·诱导愈伤组织材料的选择和愈伤组织状态的调控第81-82页
   ·影响基因枪转化频率的物理因素第82-83页
   ·轰击前后的处理第83-84页
   ·合理的筛选压力第84页
   ·小麦成熟胚愈伤的耐盐性第84-85页
   ·存在的问题第85页
   ·两种转基因方法的比较第85-87页
结论第87-88页
附录第88-93页
参考文献第93-102页
致谢第102页
个人简历第102页

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