摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
Abbreviations | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-39页 |
第一节 植物耐盐性研究进展 | 第9-21页 |
第二节 小麦耐盐基因的原核表达模式研究 | 第21-22页 |
第三节 小麦遗传转化研究进展 | 第22-33页 |
一 农杆菌介导的遗传转化法 | 第23-26页 |
二 基因枪法 | 第26-29页 |
三 表达载体的构建 | 第29-30页 |
四 植物转基因系统的选择策略 | 第30-31页 |
五 植物遗传转化中出现的问题与对策 | 第31-33页 |
第四节 植物蛋白激酶的结构、进化与生物学功能的研究进展 | 第33-38页 |
第五节 研究目的及意义 | 第38-39页 |
第二章 小麦糖原合成酶激酶(TaGSK1)基因的克隆和蛋白质的结构分析 | 第39-52页 |
1 材料和方法 | 第39-43页 |
·试剂和材料 | 第39页 |
·方法 | 第39-43页 |
2 结果 | 第43-48页 |
·小麦TaGSK1的扩增和克隆 | 第43-44页 |
·小麦TaGSK1基因的序列分析 | 第44页 |
·TaGSK1基因及推断的蛋白结构比较分析 | 第44-48页 |
3 讨论 | 第48-52页 |
第三章 小麦糖原合成酶激酶(TaGSK1)表达载体pBV221-gsk1的构建及原核表达 | 第52-62页 |
1 材料与方法 | 第52-56页 |
·质粒和菌株 | 第52页 |
·试剂 | 第52页 |
·PBV221-gsk1表达载体的构建 | 第52-54页 |
·TaGSK1的转化及表达 | 第54-56页 |
·TaGSK1蛋白表达量的分析 | 第56页 |
·转化子耐盐性分析 | 第56页 |
2 结果 | 第56-58页 |
·pBV221-gsk1表达载体的鉴定 | 第56页 |
·TaGSK1蛋白的表达 | 第56-57页 |
·细菌的耐盐性分析 | 第57-58页 |
3 讨论 | 第58-62页 |
第四章 小麦糖原合成酶激酶基因(TaGSK1)的鉴定 | 第62-87页 |
第一节 小麦基因组DNA中TaGSK1的克隆和测序 | 第62-65页 |
1 材料和方法 | 第62-63页 |
·试剂和材料 | 第62页 |
·方法 | 第62-63页 |
2 结果与分析 | 第63-65页 |
·小麦TaGSK1的扩增和克隆 | 第63-64页 |
·小麦TaGSK1基因的序列分析 | 第64-65页 |
第二节 小麦糖原合成酶激酶基因(TaGSK1)的农杆菌转化 | 第65-77页 |
1 材料和试剂 | 第65-66页 |
·材料 | 第65-66页 |
·试剂 | 第66页 |
2 方法 | 第66-71页 |
·培养基 | 第66-67页 |
·pBI121-gsk1双元载体的构建 | 第67-68页 |
·小麦成熟胚愈伤组织的诱导及状态调整 | 第68-69页 |
·农杆菌的电激转化 | 第69页 |
·双元载体转化小麦愈伤 | 第69-70页 |
·转基因愈伤的筛选与分化 | 第70-71页 |
3 结果 | 第71-76页 |
·双元载体的构建及农杆菌转化 | 第71-73页 |
·转基因小麦愈伤的制备、筛选及鉴定 | 第73-76页 |
4 讨论 | 第76-77页 |
·载体构建及农杆菌转化 | 第76页 |
·小麦的农杆菌转化 | 第76-77页 |
第三节 基因枪法转化小麦糖原合成酶激酶基因(TaGSK1) | 第77-87页 |
1 材料与试剂 | 第77-78页 |
·材料 | 第77页 |
·试剂 | 第77-78页 |
2 实验方法 | 第78-80页 |
·质粒DNA的制备 | 第78页 |
·基因枪转化 | 第78-79页 |
·抗性愈伤组织的筛选及分化 | 第79-80页 |
3 结果与分析 | 第80-81页 |
·抗性愈伤的获得 | 第80页 |
·抗性愈伤的筛选 | 第80页 |
·抗性愈伤的分化 | 第80-81页 |
·转基因愈伤的分子生物学鉴定 | 第81页 |
4 讨论 | 第81-87页 |
·诱导愈伤组织材料的选择和愈伤组织状态的调控 | 第81-82页 |
·影响基因枪转化频率的物理因素 | 第82-83页 |
·轰击前后的处理 | 第83-84页 |
·合理的筛选压力 | 第84页 |
·小麦成熟胚愈伤的耐盐性 | 第84-85页 |
·存在的问题 | 第85页 |
·两种转基因方法的比较 | 第85-87页 |
结论 | 第87-88页 |
附录 | 第88-93页 |
参考文献 | 第93-102页 |
致谢 | 第102页 |
个人简历 | 第102页 |