| 缩写表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-27页 |
| 一、热激研究进展 | 第10-21页 |
| 1、 热激蛋白(HSPs) | 第10-14页 |
| ·历史及现状: | 第10-11页 |
| ·植物中HSPs | 第11-14页 |
| ·小分子量HSPs(smHSPs) | 第11-12页 |
| ·HSP60 | 第12页 |
| ·HSP70 | 第12-13页 |
| ·HSP90 | 第13页 |
| ·HSP110 | 第13-14页 |
| 2 、 热激因子(HSF) | 第14-20页 |
| ·研究进展 | 第14-20页 |
| ·概述 | 第14-15页 |
| ·真核生物热激因子的种类 | 第15-16页 |
| ·热激因子的结构 | 第16-17页 |
| ·热激因子的调节作用 | 第17-20页 |
| 3 、 热激信号转导的其它调节 | 第20-21页 |
| ·pH与热激信号转导 | 第20页 |
| ·cAMP与热激信号转导 | 第20-21页 |
| ·IP_3与热激信号转导 | 第21页 |
| 二、 钙-钙调素与热激信号转导的关系 | 第21-25页 |
| 1 、 钙调素 | 第21页 |
| 2 、 钙-钙调素与热激信号转导 | 第21-25页 |
| ·钙与热激反应 | 第21-22页 |
| ·钙-钙调素与热激反应 | 第22-25页 |
| 三、 研究意义 | 第25-26页 |
| 四、 展望 | 第26-27页 |
| 引言 | 第27-28页 |
| 材料和方法 | 第28-54页 |
| 1 材料 | 第28页 |
| ·材料和试剂 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-54页 |
| ·植物材料的培养 | 第28页 |
| ·总RNA的提取 | 第28-31页 |
| ·番茄总RNA的提取 | 第28-30页 |
| ·玉米总RNA提取 | 第30-31页 |
| ·总DNA微量提取 | 第31-33页 |
| ·总RNA电泳 | 第33-34页 |
| ·变性电泳 | 第33-34页 |
| ·快速电泳 | 第34页 |
| ·RT-PCR反应 | 第34-40页 |
| ·番茄RT-PCR | 第34-36页 |
| ·玉米RT-PCR | 第36-40页 |
| ·HSF1探针的获得 | 第36-38页 |
| ·玉米HSF1(zmhsfa)DNA结合域片段的扩增 | 第38-40页 |
| ·番茄PCR反应 | 第40-41页 |
| ·抗原表位预测 | 第41页 |
| ·番茄lehsf8抗原表位预测 | 第41页 |
| ·玉米抗原表位预测 | 第41页 |
| ·PCR产物的检测 | 第41页 |
| ·PCR产物的回收 | 第41-42页 |
| ·低融点琼脂糖法回收PCR产物 | 第41-42页 |
| ·柱式回收试剂盒 | 第42页 |
| ·产物与载体的连接 | 第42-44页 |
| ·PET32质粒和PCR产物的连接 | 第42-43页 |
| ·T载体和PCR产物的连接 | 第43页 |
| ·PET28质粒和PCR产物的连接 | 第43-44页 |
| ·制备感受态 | 第44页 |
| ·转化 | 第44-45页 |
| ·重组子鉴定 | 第45页 |
| ·玉米cDNA文库的快速构建 | 第45-48页 |
| ·文库筛选的前期工作 | 第48-49页 |
| ·探针的制备 | 第49-50页 |
| ·杂交 | 第50页 |
| ·阳性克隆的第二轮筛选 | 第50-51页 |
| ·阳性克隆的后期处理 | 第51页 |
| ·阳性克隆测序、比对及分析 | 第51页 |
| ·蛋白诱导及检测流程 | 第51-54页 |
| 结果及分析 | 第54-65页 |
| 1 、 番茄LEHSF8基因的获得 | 第54-57页 |
| ·番茄总RNA提取 | 第54页 |
| ·总RNA电泳 | 第54页 |
| ·RT-PCR反应 | 第54页 |
| ·lehsf8抗原表位预测 | 第54-56页 |
| ·植物总DNA微量提取 | 第56页 |
| ·PET32质粒和PCR产物的酶切 | 第56-57页 |
| 2 、 玉米HSF1(zmhsfa)基因的获得 | 第57-65页 |
| ·玉米HSF1(zmhsfa)cDNA探针的获得 | 第57-58页 |
| ·总RNA提取 | 第57页 |
| ·总RNA快速电泳 | 第57页 |
| ·RT-PCR反应 | 第57-58页 |
| ·筛选结果 | 第58-59页 |
| ·第一轮筛选 | 第58-59页 |
| ·第二轮筛选 | 第59页 |
| ·测序结果及比对 | 第59页 |
| ·用RT-PCR方法得到了HSF1片段cDNA克隆 | 第59-63页 |
| ·根据得到的片段信息进行抗原表位分析 | 第59-60页 |
| ·总RNA的提取及电泳检测 | 第60-61页 |
| ·RT-PCR | 第61页 |
| ·PET-28B质粒的鉴定 | 第61-62页 |
| ·重组子的鉴定 | 第62-63页 |
| ·zmhsfa片段cDNA克隆的表达 | 第63-65页 |
| 讨论 | 第65-69页 |
| 1 、 蕃茄热激因子HSF1抗体的制备 | 第65-66页 |
| ·蕃茄热激因子HSF1cDNA的克隆 | 第65页 |
| ·蕃茄热激因子HSF1抗原表位分析 | 第65-66页 |
| 2 、 玉米热激因子HSF1(zmhsfa)基因的克隆 | 第66-69页 |
| ·通过cDNA文库筛选获得目的基因 | 第66-67页 |
| ·通过RT-PCR方法扩增HSF1(zmhsfa)cDNA片段 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
