| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-28页 |
| ·环境中细菌遗传物质的交换 | 第10-11页 |
| ·基因转移途径 | 第11-16页 |
| ·转化 | 第11-12页 |
| ·转导 | 第12-13页 |
| ·接合 | 第13-16页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒的转移 | 第16-19页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的质粒 | 第16-17页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒的转移 | 第17-19页 |
| ·环境中基因转移的检测 | 第19-24页 |
| ·影响基因转移检测的因素 | 第19页 |
| ·标记基因 | 第19-20页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第20-24页 |
| ·绿色荧光蛋白的性质 | 第20-21页 |
| ·绿色荧光蛋白的改造 | 第21-22页 |
| ·绿色荧光蛋白基因构建融合基因的应用 | 第22-23页 |
| ·融合基因的构建方式 | 第23页 |
| ·绿色荧光蛋白的检测 | 第23-24页 |
| ·解离载体的应用 | 第24-25页 |
| ·微量热学在微生物学中的应用 | 第25-28页 |
| ·细菌分类鉴定 | 第26页 |
| ·微生物生长动力学性质 | 第26页 |
| ·微生物生长代谢规律 | 第26页 |
| ·微生物学其它方面的研究 | 第26-28页 |
| 2 研究目的和意义 | 第28-29页 |
| 3 材料和方法 | 第29-38页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·试剂与器材 | 第29页 |
| ·分子生物学试剂 | 第29页 |
| ·生化试剂 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-38页 |
| ·质粒DNA的制备及其它质粒DNA基本操作 | 第29-30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒DNA的制备 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第30页 |
| ·质粒DNA的操作 | 第30页 |
| ·琼脂糖电泳分离的DNA的回收 | 第30页 |
| ·转化及转化子的筛选鉴定 | 第30-34页 |
| ·大肠杆菌常规转化 | 第30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的电转化 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌转化子的快检 | 第31-34页 |
| ·杀虫晶体蛋白的SDS-PAGE | 第34-35页 |
| ·杀虫晶体蛋白SDS-PAGE样品的制备 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE凝胶的制备 | 第34页 |
| ·电泳、染色及脱色 | 第34页 |
| ·凝胶图象的处理与蛋白定量 | 第34-35页 |
| ·质粒稳定性的检测 | 第35页 |
| ·PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·引物序列 | 第35-36页 |
| ·质粒DNA的PCR扩增 | 第36页 |
| ·菌体DNA的PCR扩增 | 第36页 |
| ·菌体生长的热动力学检测 | 第36-37页 |
| ·荧光显微镜检 | 第37页 |
| ·生物分析软件及网址 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-58页 |
| ·高效表达GFP标记基因载体的构建 | 第38-47页 |
| ·含小质粒复制起始区解离载体的构建 | 第38-39页 |
| ·携带GFP的小质粒复制起始区解离载体pBMB0471的构建 | 第39-40页 |
| ·解离载体pBMB0471稳定性检测 | 第40-41页 |
| ·用不同启动子、复制起始区携带GFP构建解离载体 | 第41-47页 |
| ·用质粒载体pHT315构建携带GFP的载体 | 第41页 |
| ·用蜡状芽胞杆菌启动子构建不同质粒复制起始区的GFP解离载体 | 第41-43页 |
| ·用启动子BtⅠ-BtⅡ构建不同质粒复制起始区的GFP解离载体 | 第43-45页 |
| ·用启动子pro3A构建不同质粒复制起始区的GFP解离载体 | 第45-47页 |
| ·重组质粒和帮助质粒电转化无晶体突变株BMB171 | 第47页 |
| ·gfp基因与杀虫晶体蛋白基因的融合基因的构建 | 第47-50页 |
| ·荧光显微镜观察结果 | 第50-52页 |
| ·微量热动力学变化 | 第52-56页 |
| ·蛋白表达量不同菌株的热动力学变化 | 第52-53页 |
| ·含不同拷贝数基因菌株的热动力学变化 | 第53-55页 |
| ·含不同启动子菌株的热动力学变化 | 第55-56页 |
| ·含融合基因重组菌的微量热动力学变化 | 第56页 |
| ·电转化野生菌株 | 第56-58页 |
| 5 讨论 | 第58-60页 |
| 6 小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 缩略语 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
