| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词索引表 | 第7-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| ·猪细小病毒 | 第11-13页 |
| ·PPV 概述 | 第11页 |
| ·PPV 分子生物学特征 | 第11-12页 |
| ·PPV 分子结构 | 第12-13页 |
| ·VP2 基因及其编码蛋白 | 第13页 |
| ·PPV 疫苗研究进展 | 第13页 |
| ·猪圆环病毒2 型 | 第13-15页 |
| ·PCV-2 概述 | 第13页 |
| ·PCV-2 分子生物学特征 | 第13-14页 |
| ·PCV-2 抗原表位研究 | 第14页 |
| ·PCV-2 引起的疾病 | 第14页 |
| ·PCV-2 防治 | 第14-15页 |
| ·核酸疫苗的研究 | 第15-16页 |
| ·核酸疫苗的概念 | 第15页 |
| ·DNA 疫苗的优点 | 第15页 |
| ·DNA 疫苗存在的问题 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 pcDNA-P21-VP2 重组质粒的构建及真核表达 | 第17-37页 |
| ·实验材料 | 第17-21页 |
| ·菌株、载体和细胞 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第17-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-31页 |
| ·病毒总DNA 的提取 | 第21页 |
| ·VP2 和 P21 基因扩增引物设计与扩增 | 第21-23页 |
| ·VP2 基因与pMD–18T 载体连接 | 第23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23-25页 |
| ·重组质粒 pcDNA -VP2 及 pcDNA–P21–VP2 的构建 | 第25-29页 |
| ·pcDNA-P21-VP2 在HEK293FT 细胞中表达 | 第29-30页 |
| ·表达产物检测和鉴定 | 第30-31页 |
| ·实验结果 | 第31-34页 |
| ·VP2 和 P21 基因的 PCR 扩增结果 | 第31-32页 |
| ·VP2 和 P21 基因真核表达载体的构建 | 第32页 |
| ·pcDNA-P21-VP2 在293FT 细胞中表达 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·目的基因的选择 | 第34页 |
| ·P21 基因的合成与鉴定 | 第34-35页 |
| ·表达载体的选择 | 第35页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第35-37页 |
| 3 重组质粒在小鼠体内诱导的免疫反应 | 第37-45页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·pcDNA-VP2-P21 质粒的大量制备 | 第38-40页 |
| ·重组质粒免疫小鼠方案 | 第40页 |
| ·抗体滴度的检测 | 第40页 |
| ·脾淋巴细胞增殖 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·免疫小鼠血清PPV 的IgG 抗体检测结果 | 第41-42页 |
| ·免疫小鼠血清PCV-2 的IgG 抗体检测结果 | 第42-43页 |
| ·免疫小鼠脾淋巴细胞增殖检测结果 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附图及说明 | 第51-52页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
