| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·慢性粒细胞白血病简介 | 第9-10页 |
| ·RNA干扰技术简介 | 第10-12页 |
| ·应用RNAi技术治疗CML的研究现状 | 第12-13页 |
| ·存在的问题及前景展望 | 第13-15页 |
| ·转染方法和转染效率问题 | 第13-14页 |
| ·安全性问题 | 第14-15页 |
| ·RNAi应用于临床的前景展望 | 第15页 |
| ·研究思路 | 第15-17页 |
| 2 siRNA转染方法的建立及细胞增殖实验 | 第17-26页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·实验材料与仪器 | 第17-20页 |
| ·主要试剂来源及配制 | 第17-19页 |
| ·主要仪器和设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-22页 |
| ·细胞培养 | 第20页 |
| ·细胞计数 | 第20-21页 |
| ·siRNA脂质体转染 | 第21页 |
| ·细胞增殖能力检测 | 第21-22页 |
| ·结果 | 第22-25页 |
| ·细胞培养 | 第22页 |
| ·不同转染试剂效果的比较 | 第22页 |
| ·细胞增殖能力检测 | 第22-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 3 细胞凋亡检测及克隆形成实验 | 第26-33页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料与仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂来源及配制 | 第26页 |
| ·主要仪器和设备 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-27页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第26-27页 |
| ·细胞克隆形成 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-32页 |
| ·K562转染后的凋亡 | 第27-28页 |
| ·K562转染后克隆形成 | 第28-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 4 bcr/abl融合蛋白p210bcr/abl表达水平的检测 | 第33-40页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验材料与仪器 | 第33-35页 |
| ·主要试剂来源及配制 | 第33-35页 |
| ·主要仪器和设备 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·蛋白质提取 | 第35页 |
| ·BCA法测定蛋白质浓度 | 第35-36页 |
| ·Western blot步骤 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-39页 |
| ·绘制蛋白浓度标准曲线 | 第37页 |
| ·p210~(bcr/abl)蛋白表达抑制 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 5 构建慢病毒载体 | 第40-47页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·实验材料与仪器 | 第40-43页 |
| ·主要试剂来源及配制 | 第40-41页 |
| ·主要仪器和设备 | 第41-43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| ·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第43页 |
| ·热激法转化感受态 | 第43页 |
| ·抽提质粒 | 第43页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第43-44页 |
| ·包装慢病毒 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-46页 |
| ·质粒制备 | 第44页 |
| ·病毒包装 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 6 结论与展望 | 第47-49页 |
| ·全文总结 | 第47页 |
| ·工作展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第55页 |