| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| ·环境激素 | 第12-13页 |
| ·五氯酚 | 第13-17页 |
| ·来源及应用 | 第13-14页 |
| ·对生物体和人体的危害 | 第14-16页 |
| ·五氯酚的内分泌干扰作用机制 | 第16-17页 |
| ·检测方法 | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术概述 | 第18-25页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术的发展 | 第18页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术的基本原理 | 第18-20页 |
| ·实时荧光定量 PCR 实验中的关键问题 | 第20-22页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的优缺点 | 第22-23页 |
| ·PCR 技术的应用 | 第23-25页 |
| ·本课题内容构成 | 第25-27页 |
| ·本课题研究意义 | 第25-26页 |
| ·本课题内容构成 | 第26-27页 |
| 第二章 实验材料与设计方案 | 第27-34页 |
| ·实验材料 | 第27-32页 |
| ·实验仪器设备 | 第27页 |
| ·实验器材 | 第27-28页 |
| ·实验药品 | 第28-29页 |
| ·常用试剂的配制 | 第29-32页 |
| ·实验流程 | 第32-34页 |
| 第三章 受体的提取及结合 DNA 的制备 | 第34-44页 |
| ·受体的提取 | 第34-37页 |
| ·试验动物及驯养 | 第34页 |
| ·实验装置 | 第34页 |
| ·含受体的细胞溶质的提取 | 第34页 |
| ·蛋白量的测定 | 第34-37页 |
| ·结合 DNA 的制备 | 第37-42页 |
| ·引物的合成 | 第37-38页 |
| ·引物的处理 | 第38页 |
| ·PCR 体系的优化 | 第38-41页 |
| ·DNA 的回收 | 第41-42页 |
| ·定量结合 DNA | 第42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 第四章 PCP 的定性 PCR 分析 | 第44-56页 |
| ·实验条件的优化 | 第44-47页 |
| ·PCR 反应体系中退火温度的优化 | 第44-45页 |
| ·酶切条件的确定 | 第45-47页 |
| ·受体-配体结合 | 第47页 |
| ·受体、配体、结合 DNA 复合物的制备 | 第47页 |
| ·常规 PCR 反应 | 第47-51页 |
| ·PCP 的定性 PCR 分析 | 第48-49页 |
| ·对照组结果 | 第49-50页 |
| ·有 PCP 暴露与无 PCP 暴露的受体量的比较 | 第50-51页 |
| ·SDS-PAGE 法分析 HAP 对受体与配体的纯化情况 | 第51-54页 |
| ·原理 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE 分析结果 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-56页 |
| 第五章 PCP 的荧光定量 PCR 分析 | 第56-67页 |
| ·荧光定量 PCR 反应条件的优化 | 第56-59页 |
| ·引物浓度的确定 | 第56-57页 |
| ·退火温度的确定 | 第57-58页 |
| ·循环数的确定 | 第58-59页 |
| ·SYBR GREEN I定量标准曲线的建立 | 第59-60页 |
| ·熔解曲线分析 | 第60-61页 |
| ·SYBR GREEN I荧光定量 PCR 检测五氯酚 | 第61-64页 |
| ·荧光定量 PCR 检测结果的重复性试验 | 第64-65页 |
| ·荧光检测的最低检测限 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| 第六章 高效液相色谱法分析五氯酚 | 第67-72页 |
| ·HPLC 的测定 | 第67-69页 |
| ·高效液相色谱法简介 | 第67-68页 |
| ·操作步骤 | 第68-69页 |
| ·HPLC 测定五氯酚 | 第69-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第七章 荧光定量 PCR 对环境样品中五氯酚的监测研究 | 第72-76页 |
| ·样品的处理方法 | 第72-73页 |
| ·饮水中五氯酚的提取 | 第72页 |
| ·白蛤中五氯酚的提取 | 第72-73页 |
| ·荧光定量 PCR | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第八章 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 附录I 缩略语 | 第82-83页 |
| 附录II PUC19 序列 | 第83-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及申请专利 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
