摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分 组织水平观察自体吞噬并检测相关蛋白表达 | 第16-48页 |
试剂和仪器 | 第16-20页 |
1. 主要化学药品和生物试剂 | 第16页 |
2. 主要溶液的配制(主要参照分子实验克隆指南,第二版) | 第16-18页 |
3. 主要仪器 | 第18-19页 |
4. 组织来源 | 第19-20页 |
实验方法 | 第20-24页 |
1. 肝癌电镜标本的制备方法 | 第20页 |
2. 组织总蛋白提取和浓度测定 | 第20页 |
3. Western blot 操作步骤 | 第20-21页 |
4. 免疫组织化学方法 | 第21-23页 |
5. 免疫组化结果判定方法 | 第23页 |
6. 数据统计 | 第23-24页 |
实验结果 | 第24-46页 |
1. 肝癌及癌旁肝组织中的自体吞噬表达情况 | 第24-43页 |
·电镜下肝癌及癌旁肝组织超微结构的照片及观察描述 | 第24-42页 |
·细胞内自体吞噬体超微结构观察的结论 | 第42-43页 |
2. western blot 检测肝癌及癌旁样本中Beclin-1 的表达情况 | 第43-45页 |
3. 组织细胞内自体吞噬情况与Beclin-1 表达的相关性分析 | 第45页 |
4. 组织细胞内LC3 蛋白达情况 | 第45-46页 |
结论 | 第46-48页 |
第二部分 细胞水平研究自体吞噬增高的原因 | 第48-55页 |
试剂和仪器 | 第48页 |
实验方法 | 第48-50页 |
实验结果 | 第50-54页 |
1. 细胞转染质粒pcDNA3-Flag-HBx后蛋白的表达情况 | 第50-51页 |
2. 细胞线粒体肿胀度测定 | 第51-52页 |
3. 线粒体膜流动性测定 | 第52-53页 |
4. 细胞转染后的超微结构观察 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
第三部分 肝癌组织超微结构的相关分析 | 第55-58页 |
1. 肝癌细胞及癌旁肝组织超微结构特征的统计分析 | 第55-57页 |
2. 结论 | 第57-58页 |
第四部分 结合自体吞噬相关蛋白表达结果分析患者临床资料 | 第58-91页 |
1. 肝癌组织中Beclin-1 的表达情况与患者临床资料的分析比较 | 第58-73页 |
·Western Blot 检测结果和临床资料统计分析的结论 | 第71-73页 |
2. 肝癌及癌旁样本中LC-3 表达的临床意义 | 第73-87页 |
·免疫组化法检测LC3 表达的结论 | 第87页 |
3. 临床特征对肿瘤内Beclin-1 和LC3 表达相关性分析 | 第87-89页 |
4. 结论 | 第89-91页 |
讨论 | 第91-94页 |
参考文献 | 第94-98页 |
附录一 文献综述 | 第98-106页 |
致谢 | 第106页 |