| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-14页 |
| ·研究意义 | 第9-10页 |
| ·内参基因研究进展 | 第10-13页 |
| ·理想内参基因的条件 | 第10页 |
| ·常用的内参基因 | 第10-11页 |
| ·内参基因在实时定量PCR 中的应用 | 第11页 |
| ·内参基因在Western Blotting 中的应用 | 第11-13页 |
| ·内参基因稳定性分析 | 第13页 |
| ·研究展望 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-24页 |
| ·试验材料 | 第14-15页 |
| ·质粒和菌株 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·仪器与设备 | 第14-15页 |
| ·水稻材料 | 第15-16页 |
| ·水稻种植 | 第15页 |
| ·水稻白叶枯病菌培养 | 第15页 |
| ·水稻叶片接种 | 第15-16页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第16-18页 |
| ·抗原决定簇预测及PCR 扩增 | 第16页 |
| ·P CR 产物纯化 | 第16-17页 |
| ·PCR 产物和载体酶切 | 第17页 |
| ·重组载体 | 第17页 |
| ·细菌感受态制备 | 第17页 |
| ·热激法转化 | 第17-18页 |
| ·提取质粒DNA 及酶切鉴定 | 第18页 |
| ·诱导表达及SDS-PAGE 检测 | 第18-19页 |
| ·融合蛋白质表达纯化及抗体制备 | 第19-20页 |
| ·融合蛋白质的表达 | 第19页 |
| ·融合蛋白质的纯化及抗体制备 | 第19-20页 |
| ·水稻组织全蛋白提取 | 第20页 |
| ·酶标仪Bradford 法检测水稻蛋白浓度 | 第20-21页 |
| ·Western blotting 检测 | 第21-22页 |
| ·Western blotting 的定量分析 | 第22页 |
| ·内参基因稳定性分析 | 第22页 |
| ·内参抗体标准曲线的绘制及其水稻中百分含量的确定 | 第22-23页 |
| ·水稻内参基因的转录谱分析 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-34页 |
| ·水稻内参蛋白质的选择 | 第24页 |
| ·目标DNA 片段的扩增 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的构建 | 第25页 |
| ·蛋白质表达和纯化 | 第25-26页 |
| ·抗体的特异性检测 | 第26页 |
| ·水稻内参蛋白质的表达谱分析 | 第26-28页 |
| ·内参蛋白质稳定性统计分析 | 第28-30页 |
| ·水稻不同组织中内参蛋白质稳定性的比较 | 第28-29页 |
| ·水稻叶片中内参蛋白质稳定性的比较 | 第29-30页 |
| ·水稻内参蛋白质HSP 和eEF-1α的稳定性验证 | 第30-31页 |
| ·白叶枯病抗病反应中的稳定性 | 第30页 |
| ·在昼夜生长不同时间点的稳定性检测 | 第30-31页 |
| ·HSP 和eEF-1α抗体标准曲线的绘制及其水稻中百分含量的确定 | 第31-33页 |
| ·HSP 和eEF-1α抗体标准曲线的绘制 | 第31-32页 |
| ·内参蛋白质在水稻中的百分含量测定 | 第32-33页 |
| ·内参基因的转录和表达比较分析 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-38页 |
| ·抗原制备方法的选择 | 第34页 |
| ·最适内参蛋白质的选择 | 第34-35页 |
| ·内参蛋白质HSP 和eEF-1α研究意义 | 第35-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第43-44页 |
| 作者简历 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
