| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 第一节 研究背景 | 第10-13页 |
| 1.氧化还原与活性氧 | 第10-11页 |
| 2.巯基/二硫键转换反应 | 第11-12页 |
| 3.巯基氧化剂(萘醌类和硒类化合物) | 第12页 |
| 4.ROS和信号分子Ca~(2+)的关系 | 第12-13页 |
| 第二节 研究对象 | 第13-18页 |
| 1.肌质网(sarcoplasmic reticulum,SR) | 第13-15页 |
| 2.钙释放通道/ryanodine receptor(RyR) | 第15-18页 |
| 第三节 研究意义与内容 | 第18-20页 |
| 1.研究意义 | 第18-19页 |
| 2.研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-36页 |
| 第一节 试剂 | 第20页 |
| 第二节 实验仪器及原理介绍 | 第20-27页 |
| 第三节 实验方法 | 第27-36页 |
| 1.SR囊泡的制备和蛋白浓度测定 | 第27-28页 |
| 2.通道蛋白RyR1的提纯和蛋白浓度测定 | 第28-29页 |
| 3.伴生O_2~·-阴离子的测量 | 第29-30页 |
| 4.提纯RyR1的自由巯基量的定性测定 | 第30页 |
| 5.[~3H]-ryanodine结合实验和结合初速率的测定 | 第30-31页 |
| 6.被动钙负载后的SR囊泡钙释放速率的测量 | 第31-32页 |
| 7.反应液的氧化还原电势的确定和测定 | 第32页 |
| 8.人造脂质双分子层上重构RyR1单通道的开放率的测定(本实验数据由美国Portland State University叶雁萍提供) | 第32-33页 |
| 9.SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和电洗脱回收电泳实验 | 第33-34页 |
| 10.Western Blotting检测氧化剂处理后发生cross-linking的蛋白 | 第34-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-51页 |
| 第一节 超氧参与氧化剂对骨骼肌型钙释放通道的调控作用 | 第36-47页 |
| 1 氧化剂诱导O_2~·-产生 | 第36-38页 |
| 2 巯基氧化剂导致通道蛋白自由巯基数量减少 | 第38-40页 |
| 3 超氧参与氧化剂对RyR1钙释放机制的双相调控 | 第40-44页 |
| 4 超氧参与了氧化剂对ryanodine受体的氧化还原电势的影响 | 第44-47页 |
| 第二节 氧化剂导致SR囊泡内蛋白质发生交联 | 第47-51页 |
| 1 氧化剂导致SR上蛋白间的交联(cross-linking) | 第47-49页 |
| 2 蛋白的交联主要是RyR1、Myosin和钙泵等蛋白被氧化导致的 | 第49-50页 |
| 3 Western Blotting检测RyR1是否参与形成交联复合物 | 第50-51页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第51-55页 |
| 第一节 总结 | 第51-52页 |
| 第二节 讨论 | 第52-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 硕士期间发表论文 | 第60-61页 |
| 后记(致谢) | 第61页 |
