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黑曲霉木聚糖酶基因的克隆、表达与热稳定性改造研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·木聚糖的结构及其功能第11-12页
     ·木聚糖及其结构第11-12页
     ·木聚糖的功能第12页
   ·木聚糖酶的理化性质及其分类第12-14页
     ·木聚糖酶的理化性质第12-14页
     ·木聚糖酶的分类第14页
   ·木聚糖酶的研究进展第14-16页
   ·木聚糖酶的应用第16-20页
     ·木聚糖酶在造纸工业方面的应用第16-17页
     ·木聚糖酶在饲料工业方面的应用第17-18页
     ·木聚糖酶在食品工业方面的应用第18-19页
     ·木聚糖酶在纺织工业方面的应用第19-20页
     ·木聚糖酶在能源方面的应用第20页
   ·本文的研究目的、意义、内容及技术线路第20-23页
第二章 木聚糖酶基因xynA与xynB的克隆与表达第23-46页
   ·引言第23页
   ·材料和方法第23-33页
     ·材料第23-26页
     ·方法第26-33页
   ·结果与讨论第33-45页
     ·木聚糖酶基因(xynA与xynB)克隆、序列分析和同源性比较第33-39页
     ·重组木聚糖酶表达载体的构建第39-40页
     ·重组木聚糖酶在大肠杆菌中的诱导表达和SDS-PAGE检测第40-45页
   ·小结第45-46页
第三章 木聚糖酶的纯化及其酶学性质第46-58页
   ·引言第46页
   ·材料与方法第46-52页
     ·主要试剂第46-47页
     ·主要仪器第47页
     ·实验方法第47-52页
   ·结果与讨论第52-57页
     ·SDS-PAGE法鉴定酶的纯度、分子量及纯酶比活力测定第52-53页
     ·最适反应pH与pH稳定性第53-54页
     ·最适反应温度与热稳定性第54-55页
     ·不同金属离子对酶活的影响第55-56页
     ·重组木聚糖酶的动力学常数测定第56-57页
   ·小结第57-58页
第四章 木聚糖酶XynB的热稳定性改造第58-70页
   ·引言第58页
   ·材料和方法第58-62页
     ·菌株与载体第58页
     ·酶与试剂第58-59页
     ·培养基第59页
     ·木聚糖酶XynB的空间结构模拟第59页
     ·突变位点的确定第59页
     ·定点突变方法—重叠延伸PCR法第59-61页
     ·突变引物第61-62页
     ·突变体重组表达载体的构建第62页
     ·突变木聚糖酶的诱导表达和SDS-PAGE分析第62页
   ·结果与讨论第62-69页
     ·三维结构模拟以及突变位点的确定第62-67页
     ·定点突变以及突变体重组表达质粒构建第67页
     ·突变体木聚糖酶XynB的诱导表达及其酶活检测第67-69页
   ·小结第69-70页
第五章 结论与展望第70-72页
   ·结论第70-71页
   ·展望第71-72页
参考文献第72-79页
致谢第79-80页
文章发表情况第80页

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