| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-18页 |
| 第一章 Mtsarg1-β的分子克隆和特征分析 | 第18-81页 |
| 前言 | 第18-22页 |
| 一 材料和方法 | 第22-42页 |
| 1 实验材料 | 第22-27页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·细胞系 | 第22页 |
| ·细菌和质粒 | 第22-24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·引物及原位杂交探针 | 第26-27页 |
| 2 研究方法 | 第27-42页 |
| ·总RNA的纯化和逆转录-聚合酶链反应 | 第27-28页 |
| ·克隆Mtsarg1和Mtsarg1-β的完整编码区 | 第28-30页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA的中量抽提 | 第31页 |
| ·克隆Mtsarg1和Mtsarg1-β的全长cDNAs | 第31-32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32页 |
| ·Mtsarg1和Mtsarg1-β在小鼠多组织和GC-1精原细胞中的表达 | 第32-33页 |
| ·Northern Blot | 第33-34页 |
| ·Mtsarg1和Mtsarg1-β的亚细胞定位及对细胞生长周期的影响 | 第34-38页 |
| ·原位杂交 | 第38-39页 |
| ·pET21/Mtsarg1融合质粒的原核表达研究 | 第39-42页 |
| 二 结果 | 第42-76页 |
| 1 分子克隆Mtsarg1和Mtsarg1-β的完整编码区 | 第42-43页 |
| 2 分子克隆Mtsarg1和Mtsarg1-β全长cDNA | 第43-44页 |
| 3 Mtsarg1和Mtsarg1-β基因序列分析 | 第44-48页 |
| 4 Mtsarg1-β和Mtsarg1的生物信息学分析 | 第48-67页 |
| 5 Mtsarg1和Mtsarg1-β在小鼠多组织和精原细胞中的表达 | 第67-68页 |
| 6 Northern blot分析 | 第68页 |
| 7 Mtsarg1和Mtsarg1-β蛋白的亚细胞定位及对细胞周期的影响 | 第68-74页 |
| 8 原位杂交 | 第74-75页 |
| 9 pET21/Mtsarg1融合质粒的原核表达研究 | 第75-76页 |
| ·pET21/Mtsarg1融合质粒的构建与鉴定 | 第75页 |
| ·pET21/Mtsarg1融合蛋白的表达 | 第75-76页 |
| 三 讨论 | 第76-80页 |
| 小结 | 第80-81页 |
| 第二章 多囊肾患者PKD1基因的突变检测 | 第81-97页 |
| 前言 | 第81-85页 |
| 一 材料和方法 | 第85-91页 |
| 1 对象与材料 | 第85-86页 |
| ·对象 | 第85页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| 2 方法 | 第86-91页 |
| ·提取基因组DNA | 第86-87页 |
| ·引物合成 | 第87-89页 |
| ·PCR扩增 | 第89页 |
| ·PCR产物检测 | 第89页 |
| ·单链构象多态性分析(SSCP) | 第89-90页 |
| ·变性高效液相色谱分析(DHPLC) | 第90页 |
| ·测序 | 第90页 |
| ·测序结果分析 | 第90-91页 |
| 二 结果 | 第91-94页 |
| 1 PCR扩增 | 第91页 |
| 2 SSCP | 第91页 |
| 3 DHPLC分析和测序分析 | 第91-94页 |
| ·无义突变 | 第92页 |
| ·错义突变 | 第92页 |
| ·同义突变 | 第92-94页 |
| 三 讨论 | 第94-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 综述 | 第105-115页 |
| 参考文献 | 第111-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 研究成果 | 第116页 |
