| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 第一部分 α—(2,3)/(2,6)唾液酸对肿瘤细胞Cx43间隙连接功能的影响 | 第20-70页 |
| 第一章 构建Hela-Cx43、Hela-Cx43-EGFP稳定细胞株 | 第21-41页 |
| ·、前言 | 第21-23页 |
| ·、实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验试剂与材料 | 第23页 |
| ·常用缓冲液及其他溶液 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验菌种 | 第24页 |
| ·逆转录病毒表达载体 | 第24页 |
| ·、实验方法 | 第24-33页 |
| ·Cx43和Cx43-EGFP目的基因片段的获得 | 第24-28页 |
| ·pBABE-puro逆转录病毒表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·质粒对靶细胞的感染 | 第30-33页 |
| ·、实验结果 | 第33-39页 |
| ·小量抽提pEGFP-N1-hCx43以及测序质粒鉴定结果 | 第33页 |
| ·PCR扩增 | 第33-35页 |
| ·pBABE-puro载体的抽提 | 第35页 |
| ·pBABE-puro载体及PCR产物的双酶切以及胶回收 | 第35-36页 |
| ·pBABE-Cx43&pBABE-Cx43-EGFP重组表达载体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·pBABE-Cx43和pBABE-Cx43-EGFP细胞株的鉴定 | 第37-39页 |
| ·、讨论 | 第39-40页 |
| ·、小结 | 第40-41页 |
| 第二章 α—(2,3)/(2,6)唾液酸对肿瘤细胞Cx43间隙连接功能的影响 | 第41-70页 |
| ·、前言 | 第41-43页 |
| ·、实验材料和方法 | 第43-50页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43-44页 |
| ·常用缓冲液及其他溶液 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·、实验结果 | 第50-66页 |
| ·TM作用对Hela细胞间隙连接功能的影响 | 第50-54页 |
| ·iRNA-GnTV瞬时干扰对Hela细胞Cx43间隙连接功能的影响 | 第54-58页 |
| ·唾液酸酶作用对Hela细胞Cx43间隙连接功能的影响 | 第58-66页 |
| ·、讨论 | 第66-69页 |
| ·、小结 | 第69-70页 |
| 第二部分 α—(2,3)/(2,6)唾液酸对肿瘤细胞Cx43间隙连接功能影响的机制研究 | 第70-97页 |
| ·、摘要 | 第70-71页 |
| ·、前言 | 第71-74页 |
| ·、实验材料和方法 | 第74-81页 |
| ·实验材料 | 第74-77页 |
| ·实验方法 | 第77-81页 |
| ·、实验结果 | 第81-92页 |
| ·唾液酸酶对Hela细胞内Cx43表达水平及磷酸化水平的影响 | 第81页 |
| ·唾液酸酶作用对HeLa细胞Cx43于Triton X-100溶解性的影响 | 第81-82页 |
| ·唾液酸酶作用对Hela细胞ZO-1表达及其与Cx43的结合的影响 | 第82-85页 |
| ·唾液酸酶作用对HeLa细胞内N-Cadherin表达及与相关蛋白结合的影响 | 第85-88页 |
| ·唾液酸酶作用对HeLa细胞间同质粘附的影响 | 第88-89页 |
| ·唾液酸酶作用对同质粘附中信号分子ERK磷酸化水平的影响 | 第89页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测唾液酸酶作用后对Cx43连接斑形成的 影响 | 第89-91页 |
| ·唾液酸酶作用对N-Cadherin分子上唾液酸修饰的影响 | 第91-92页 |
| ·、讨论 | 第92-96页 |
| ·、小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-104页 |
| 结论与创新 | 第104-105页 |
| 发表的学术论文 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
