| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 引言 | 第14-21页 |
| ·植物抗病基因的克隆 | 第14-15页 |
| ·抗病基因分子标记 | 第15-16页 |
| ·基于PCR 染色体步移技术 | 第16-17页 |
| ·蛋白质组学在植物病理学上的运用 | 第17-18页 |
| ·小麦叶锈病抗性基因的研究进展 | 第18-19页 |
| ·本研究意义及主要内容 | 第19-20页 |
| ·研究技术路线 | 第20-21页 |
| 第一章 小麦抗叶锈病基因 Lr38、Lr45 新标记的开发 | 第21-51页 |
| 1 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·主要仪器及供试试剂 | 第22页 |
| ·仪器 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·植物材料及菌种 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·TcLr38×Thatcher、TcLr45×Thatcher F_2代小麦抗叶锈性鉴定试验 | 第22-23页 |
| ·小麦基因组DNA 的提取 | 第23页 |
| ·DNA 的浓度测定 | 第23页 |
| ·抗、感基因池的准备 | 第23页 |
| ·Lr38 分子标记 | 第23-24页 |
| ·Lr45 SCAR 标记建立 | 第24-27页 |
| ·PCR 扩增产物检测 | 第27页 |
| ·特异片段的回收 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的构建 | 第28页 |
| ·重组质粒的转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第29页 |
| ·测序与序列分析 | 第29-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-45页 |
| ·TcLr38、TcLr45、Thatcher 及其 F_2 代群体抗病性鉴定及遗传分析 | 第31页 |
| ·Lr38 SCAR 分子标记 | 第31-34页 |
| ·Lr38 SCAR 的建立 | 第31-32页 |
| ·Lr38 SCAR 标记的连锁分析 | 第32-33页 |
| ·Lr38 SCAR 特异片段的克隆与测序分析 | 第33-34页 |
| ·Lr38 SCAR 标记品种检测 | 第34页 |
| ·Lr45 SCAR 分子标记 | 第34-45页 |
| ·RAPD 引物OPH20 转化SCAR 标记 | 第34-38页 |
| ·引物H11F/R SCAR 标记建立 | 第38-42页 |
| ·pSc20H.2 片段转化SCAR 标记 | 第42-45页 |
| 3 讨论 | 第45-51页 |
| ·DNA 分子标记在小麦抗叶锈病基因研究中的应用 | 第45页 |
| ·TcLr38 SCAR 标记建立 | 第45-48页 |
| ·TcLr45 SCAR 标记建立 | 第48-51页 |
| ·RAPD 标记在检测小麦外源染色体成分中的应用 | 第48页 |
| ·SCAR 标记在检测小麦外源染色体成分中的应用 | 第48-49页 |
| ·TcLr45 SCAR 标记染色体定位 | 第49页 |
| ·TcLr45 SCAR 标记的品种检测 | 第49-50页 |
| ·重复序列的变化 | 第50-51页 |
| 第二章 小麦抗叶锈基因 Lr38、Lr45 的 TRAP 分析 | 第51-66页 |
| 1 材料与方法 | 第52-56页 |
| ·主要仪器及供试试剂 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-56页 |
| ·DNA 提取、纯化及检测 | 第52页 |
| ·小麦抗叶锈基因Lr38 和Lr45 SRAP-SSR 分析 | 第52-54页 |
| ·小麦抗叶锈基因Lr38 和Lr45 SRAP-RGA 分析 | 第54-55页 |
| ·目的片段的回收 | 第55页 |
| ·重组质粒的构建 | 第55页 |
| ·重组质粒的转化 | 第55页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第55页 |
| ·测序与序列分析 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-63页 |
| ·SRAP-SSR（eSSR）分析 | 第56-59页 |
| ·SRAP-SSR（eSSR）引物的筛选 | 第56页 |
| ·近等基因系验证 | 第56-57页 |
| ·F_2 代群体及品种间的验证 | 第57-58页 |
| ·特带的回收、克隆、测序 | 第58-59页 |
| ·SRAP-RGA 分析 | 第59-63页 |
| ·SRAP-RGA 引物的筛选 | 第59页 |
| ·SRAP-RGA 特异引物 | 第59-60页 |
| ·特异条带的回收、克隆与酶切验证 | 第60页 |
| ·克隆测序与分析 | 第60-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| ·关于TRAP 技术原理的讨论 | 第63页 |
| ·关于 SRAP-SSR（eSSR）分析的讨论 | 第63-64页 |
| ·关于SRAP-RGA 分析所获得片段的讨论 | 第64页 |
| ·关于TRAP 分析所获得片段的讨论 | 第64页 |
| ·下一步工作计划 | 第64-66页 |
| 第三章 利用 NASS 法进行 TcLr38 基因组 PCR 步行 | 第66-79页 |
| 1 材料与方法 | 第67-72页 |
| ·主要仪器及供试试剂 | 第67页 |
| ·仪器 | 第67页 |
| ·试剂 | 第67页 |
| ·植物材料 | 第67页 |
| ·试验方法 | 第67-72页 |
| ·DNA 提取、纯化及检测 | 第67页 |
| ·引物的设计与合成 | 第67页 |
| ·NASS 法扩增未知序列 | 第67-68页 |
| ·DNA 延伸片段的回收及克隆 | 第68页 |
| ·克隆验证与测序分析 | 第68-69页 |
| ·延伸序列的拼接 | 第69页 |
| ·延伸序列的验证 | 第69-70页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第70-71页 |
| ·杂交大片段的回收 | 第71页 |
| ·回收大片段的PCR 鉴定 | 第71页 |
| ·回收大片段DNA 文库的构建 | 第71-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-77页 |
| ·NASS-PCR 法对 Y_（38）SCAR_（982） 延伸扩增结果 | 第72页 |
| ·阳性克隆片段的PCR 鉴定 | 第72页 |
| ·测序与序列重叠分析 | 第72-74页 |
| ·拼接序列比对分析 | 第74页 |
| ·拼接序列特异性验证 | 第74-75页 |
| ·Southern 杂交验证结果 | 第75页 |
| ·杂交大片段的回收 | 第75页 |
| ·回收大片段的PCR 验证 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| ·关于NASS-PCR 方法特点的讨论 | 第77页 |
| ·关于延伸片段分析的讨论 | 第77-78页 |
| ·NASS-PCR 在六倍体小麦中应用前景的讨论 | 第78页 |
| ·下一步研究工作 | 第78-79页 |
| 第四章 小麦抗叶锈近等基因系 TcLr38 蛋白质组差异表达分析 | 第79-99页 |
| 1 材料与方法 | 第80-87页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第80-81页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·供试仪器 | 第80-81页 |
| ·材料选择与处理 | 第81页 |
| ·蛋白质样品提取 | 第81页 |
| ·蛋白质样品浓度测定 | 第81-82页 |
| ·单向SDS-PAGE 检测蛋白提取质量 | 第82页 |
| ·凝胶的制备 | 第82页 |
| ·点样及电泳 | 第82页 |
| ·凝胶的显色（考马斯亮蓝染色法） | 第82页 |
| ·蛋白质样品的双向电泳 | 第82-84页 |
| ·第一向IEF 电泳 | 第82-83页 |
| ·胶条的平衡 | 第83页 |
| ·第二向SDS-PAGE 电泳 | 第83-84页 |
| ·凝胶的显色（考马斯亮蓝染色法） | 第84页 |
| ·双向电泳图谱分析 | 第84页 |
| ·蛋白质点的回收及质谱分析 | 第84页 |
| ·蛋白质数据库检索 | 第84页 |
| ·差异表达蛋白点引物设计及RT-PCR 扩增 | 第84-87页 |
| ·引物的设计 | 第84-85页 |
| ·RNA 提取、纯化及检测 | 第85页 |
| ·cDNA 合成及检测 | 第85-86页 |
| ·设计引物的PCR 扩增及检测 | 第86页 |
| ·扩增产物回收、克隆与序列分析 | 第86-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-95页 |
| ·小麦叶片蛋白质组双向电泳体系 | 第87页 |
| ·单向SDS-PAGE 结果分析 | 第87页 |
| ·样品材料等电点（pI）范围的确定 | 第87-90页 |
| ·TcLr38 与 Thatcher 的蛋白质组差异比较 | 第90-91页 |
| ·差异蛋白点的MALDI-TOF-MS 质谱鉴定 | 第91-92页 |
| ·差异蛋白点RT-PCR 扩增及序列分析 | 第92-95页 |
| ·小麦叶片RNA 样品提取与纯化 | 第92页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第92-93页 |
| ·YBFF/R 扩增结果 | 第93页 |
| ·特异片段的测序与分析 | 第93-95页 |
| 3 讨论 | 第95-99页 |
| ·关于小麦蛋白样品制备的讨论 | 第95页 |
| ·关于小麦蛋白质组样品双向电泳的讨论 | 第95-96页 |
| ·关于蛋白质点分离鉴定的讨论 | 第96-97页 |
| ·差异蛋白与小麦抗病的可能关系 | 第97页 |
| ·蛋白质点与 mRNA 表达关系的讨论 | 第97-99页 |
| 全文结论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-113页 |
| 研究生期间发表的学术论文 | 第113-114页 |
| 作者简历 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
