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胃癌细胞CDNA文库中三叶因子2相互作用蛋白基因筛选

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
英文缩略词表第7-8页
主要仪器、材料、配方第8-15页
 1 主要材料第8页
 2 主要仪器第8-9页
 3 主要试剂及配方第9-15页
前言第15-17页
第一部分 TFF2mRNA在胃癌细胞中表达第17-19页
 1 材料第17页
 2 方法第17-18页
   ·总RNA提取第17页
   ·RNA质量电泳验证第17页
   ·RNA逆转录合成cDNA(RT反应)第17页
   ·PCR反应(以cDNA为模板扩增目的基因)第17-18页
 3 结果第18页
   ·RT-PCR第18页
 4 讨论第18-19页
第二部分 诱饵蛋白表达质粒的构建及验证第19-32页
 1 材料第19页
 2 方法第19-26页
   ·目的基因hTFF2的获取第19-20页
   ·pENTR11-TFF2重组质粒的构建及鉴定第20-23页
   ·LR反应构建pDEST32-TFF2诱饵质粒及鉴定第23-24页
   ·pDEST32-hTFF2诱饵质粒在酵母细胞的表达验证第24-26页
   ·抑制自激活的3AT的浓度第26页
 3 结果第26-28页
   ·目的基因hTFF2的获取第26-27页
   ·pENTR11-TFF2重组质粒的构建及鉴定第27页
   ·LR反应构建pDEST32-TFF2诱饵质粒及鉴定第27-28页
   ·pDEST32-hTFF2诱饵质粒在酵母细胞的表达验证第28页
   ·抑制自激活的3AT浓度第28页
 4 讨论第28-32页
第三部分 酵母双杂交技术筛选三叶因子2在胃癌细胞cDNA文库中相互作用蛋白候选基因第32-40页
 1 材料第32页
 2 方法第32-35页
   ·His3筛选第32-33页
   ·Ura筛选第33页
   ·X-gal筛选第33页
   ·酵母细胞中质粒DNA的提取第33-34页
   ·菌式PCR验证第34-35页
   ·阳性克隆的生物信息学分析第35页
 3 结果第35-37页
   ·阳性克隆的筛选第35页
   ·PCR鉴定阳性克隆凝胶电泳结果第35-36页
   ·阳性克隆测序、生物信息学分析第36-37页
 4 讨论第37-40页
结论第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
综述第46-54页
在读期间工作小结第54页

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