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甜菜谷氨酰胺合成酶基因启动子的克隆

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第1章 绪论第8-32页
   ·课题背景第8-9页
   ·启动子的概念、结构特征及一般特点第9-11页
     ·启动子的概念第9页
     ·启动字的结构特征第9页
     ·启动子的一般特点第9-11页
   ·启动子的分类第11-19页
     ·启动子的分类第11页
     ·组成型、组织特异型和诱导型启动子第11-19页
   ·启动子的克隆方法第19-30页
     ·利用基因组文库筛选启动子第19页
     ·利用启动子探针载体筛选启动子第19-20页
     ·利用启动子捕获方法分离和鉴别启动子第20页
     ·利用常规PCR 技术克隆启动子第20-21页
     ·以PCR 技术为基础的技术克隆启动子第21-30页
   ·本课题的目的和意义第30-32页
第2章 实验材料和实验设计思路第32-39页
   ·实验材料第32-37页
     ·甜菜材料,菌株第32页
     ·主要实验用仪器第32-33页
     ·各种酶制剂及试剂盒第33页
     ·各种溶液配制第33-36页
     ·实验用引物第36-37页
   ·实验设计思路第37-39页
第3章 实验中引物的设计第39-42页
   ·引物设计的原则和技巧第39-40页
   ·本实验的引物设计标准第40-42页
第4章 甜菜GS 基因启动子的克隆第42-57页
   ·甜菜基因组DNA 的提取及检测第42-45页
     ·基因组DNA 的提取流程第42-43页
     ·基因组DNA 的电泳检测第43-44页
     ·基因组DNA 的浓度测定及调整第44-45页
   ·DNA 的限制酶酶切第45-48页
     ·DNA 酶切反应体系第45-47页
     ·连接反应第47-48页
   ·目的DNA 片段的获得第48-52页
     ·500bp 目的 DNA 片段的获得第48-50页
     ·400bp 目的 DNA 片段的获得第50-52页
   ·PCR 产物的回收第52-53页
   ·DNA 片段的连接反应第53页
   ·DNA 片段的转化第53-55页
     ·感受态细胞的制备(Cacl_2 法制备新鲜大肠杆菌感受态细胞DH5a)第53-54页
     ·转化反应第54-55页
   ·阳性重组子的筛选及鉴定第55-57页
     ·阳性重组子的蓝白筛选第55页
     ·阳性重组子的PCR 验证第55页
     ·测序第55-57页
第5章 测序结果与启动子分析第57-60页
   ·甜菜谷氨酰胺合成酶基因启动子的测序结果第57-58页
   ·甜菜谷氨酰胺合成酶基因启动子的序列分析第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-68页
附录第68-69页
致谢第69页

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