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脱水素基因逆境表达模式与白桦遗传转化研究

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
1 绪论第13-28页
   ·水分胁迫对植物的伤害第13-14页
   ·植物抗水分胁迫的应答机制第14-17页
     ·水分胁迫下植物组织形态应答第14页
     ·水分胁迫下植物生理代谢应答第14-15页
     ·植物抗脱水胁迫的分子机制第15-17页
   ·脱水素与脱水素基因第17-21页
     ·脱水素的结构及性质特点第17页
     ·脱水素基因抗逆境胁迫研究第17-18页
     ·脱水素的功能与作用机理研究第18-20页
     ·脱水素诱导合成研究第20-21页
     ·脱水素转基因研究第21页
   ·我国林木遗传转化研究第21-23页
   ·白桦组织培养与遗传转化研究第23-25页
     ·白桦作为基因工程受体材料的重要性第23页
     ·白桦植株再生研究第23-24页
     ·白桦转基因研究第24-25页
   ·本研究的背景和意义第25页
   ·主要研究内容和技术路线第25-28页
2 脱水素基因在多种逆境胁迫条件下的表达模式研究第28-43页
   ·材料与方法第28-31页
     ·材料第28-29页
     ·ThDHN基因的克隆和生物信息学分析第29页
     ·柽柳总RNA提取第29-30页
     ·RNA样品定量与反转录第30页
     ·实时定量PCR(Real time-PCR)检测脱水素基因表达第30页
     ·相对定量法分析基因表达量第30-31页
   ·结果与分析第31-39页
     ·ThDHN基因的序列分析第31-35页
     ·柽柳RNA提取与反转录检测第35-36页
     ·0.4mol·L~(-1) NaCl胁迫处理下ThDHN基因在柽柳中的表达第36页
     ·20%PEG干旱胁迫处理下ThDHN基因在柽柳中的表达第36-37页
     ·4℃冷胁迫处理下ThDHN基因在柽柳中的表达第37-38页
     ·重金属镉(Cd)胁迫处理下ThDHN基因在柽柳中的表达第38页
     ·ABA诱导处理下ThDHN基因在柽柳中的表达情况第38-39页
   ·讨论第39-43页
3 白桦遗传转化中高效诱导不定芽再生体系的建立第43-52页
   ·材料和方法第43-45页
     ·植物材料第43页
     ·种子的消毒处理方法第43页
     ·基本培养基筛选第43-44页
     ·不同生长调节物质对白桦成熟合子胚不定芽诱导的影响第44-45页
     ·不定芽伸长培养第45页
     ·不定芽生根培养第45页
   ·结果与分析第45-49页
     ·基本培养基的筛选第45-46页
     ·6-BA与NAA组合对白桦合子胚不定芽诱导的影响第46-47页
     ·TDZ与NAA组合对白桦合子胚不定芽诱导的影响第47-48页
     ·不定芽的伸长第48页
     ·不定芽的生根培养第48-49页
   ·讨论第49-52页
4 白桦转基因体系的建立与遗传转化研究第52-67页
   ·材料与方法第52-56页
     ·实验试剂第52-53页
     ·ThDHN植物表达载体构建第53页
     ·农杆菌感受态的制备及电击转化第53-54页
     ·白桦遗传转化体系中抑菌类抗生素的筛选第54页
     ·白桦遗传转化体系中选择类抗生素的筛选第54-55页
     ·工程菌液的制备第55页
     ·农杆菌介导的白桦成熟合子胚遗传转化研究第55-56页
     ·农杆菌介导的白桦叶盘遗传转化研究第56页
   ·结果与分析第56-64页
     ·植物表达载体构建第56-57页
     ·不同除菌抗生素对工程菌液活性的影响第57-58页
     ·不同抑菌抗生素对白桦叶片愈伤组织诱导的影响第58-59页
     ·选择类抗生素对白桦叶片愈伤组织诱导的影响第59-61页
     ·农杆菌介导的白桦成熟合子胚遗传转化研究第61-62页
     ·农杆菌介导的白桦叶盘遗传转化研究第62-64页
   ·讨论第64-67页
5 转基因白桦的分子鉴定与抗旱耐盐性研究第67-76页
   ·材料与方法第67-70页
     ·白桦总DNA的提取第67页
     ·转基因白桦的PCR鉴定第67-68页
     ·转基因白桦的PCR-Southern杂交第68-69页
     ·转基因白桦的Northern blotting鉴定第69页
     ·转基因白桦植株的耐盐性分析第69页
     ·转基因白桦植株的抗旱能力鉴定第69-70页
   ·结果与分析第70-74页
     ·转基因白桦的PCR鉴定第70页
     ·转基因白桦的PCR-Southern杂交鉴定第70-71页
     ·转基因白桦的Northern杂交鉴定第71页
     ·转基因白桦耐盐性的盐试浓度测定第71-72页
     ·转基因白桦组培苗的耐盐性提高第72-73页
     ·转基因白桦的耐干旱能力提高第73-74页
   ·讨论第74-76页
结论第76-78页
参考文献第78-91页
攻读学位期间发表的学术论文第91-92页
致谢第92-93页

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