蚯蚓非编码小RNA的克隆与鉴定
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| ·miRNA的简介 | 第9-14页 |
| ·miRNA的发现和特点 | 第9-11页 |
| ·miRNA生物合成过程及作用机制 | 第11-12页 |
| ·miRNA的生物学功能 | 第12-13页 |
| ·miRNA的研究方法 | 第13-14页 |
| ·再生生物、再生生物学与再生医学 | 第14-15页 |
| ·再生相关miRNA的研究现状 | 第15-16页 |
| ·研究目标和研究内容 | 第16-17页 |
| ·研究目标 | 第16-17页 |
| ·研究内容 | 第17页 |
| ·研究创新点 | 第17-18页 |
| 第二章 蚯蚓非编码小RNA的克隆与序列分析 | 第18-51页 |
| ·材料与仪器 | 第18-21页 |
| ·菌株与实验材料 | 第18页 |
| ·分子生物学试剂 | 第18-19页 |
| ·细菌培养用试剂 | 第19-20页 |
| ·其他试剂及试剂盒 | 第20页 |
| ·RNA接头及引物 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·耗材的准备与处理 | 第21页 |
| ·实验方法与步骤 | 第21-28页 |
| ·总RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·从总RNA中分离纯化小RNA | 第22-23页 |
| ·小RNA加接头与PAGE纯化 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR并电泳鉴定回收 | 第24-25页 |
| ·酶切、自连和两端加A | 第25-26页 |
| ·连接、感受态细胞制备与转化 | 第26-27页 |
| ·菌落PCR与电泳检测 | 第27-28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| ·生物信息学分析 | 第28页 |
| ·实验结果与分析 | 第28-47页 |
| ·提取的总RNA完整性分析与浓度测定 | 第28-29页 |
| ·含接头的小RNA RT-PCR电泳结果分析 | 第29-30页 |
| ·菌落PCR与电泳检测分析 | 第30-31页 |
| ·测序结果与序列分析 | 第31-47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| 第三章 荧光定量RT-PCR鉴定表达量 | 第51-60页 |
| ·材料与仪器 | 第51-52页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51页 |
| ·引物 | 第51-52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·实验方法与步骤 | 第52-55页 |
| ·总RNA的提取 | 第52页 |
| ·PAGE分离纯化小RNA | 第52-53页 |
| ·小RNA加poly(A)尾 | 第53页 |
| ·反转录 | 第53页 |
| ·RNase H除去多余的小RNA | 第53-54页 |
| ·荧光定量PCR | 第54-55页 |
| ·数据处理 | 第55页 |
| ·实验结果与分析 | 第55-59页 |
| ·提取的总RNA完整性分析 | 第55页 |
| ·荧光定量PCR结果 | 第55-57页 |
| ·数据处理与结果分析 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 第四章 结论和展望 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第60页 |
| ·展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 20条小RNA的测序图 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 硕士期间发表论文 | 第72页 |
