| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-15页 |
| 前言 | 第15-24页 |
| 第一部分 小鼠RelB基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对髓源树突状细胞成熟活化的影响 | 第24-59页 |
| 1 实验材料 | 第24-26页 |
| ·试验动物 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器与设备 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-40页 |
| ·RelB RNAi慢病毒载体的构建 | 第26-31页 |
| ·RNAi慢病毒载体病毒包装 | 第31-33页 |
| ·慢病毒质粒转染NIH3T3细胞筛选有效干扰靶点 | 第33-36页 |
| ·慢病毒质粒转染小鼠髓源树突状细胞 | 第36-37页 |
| ·Real-time PCR检测DC RelB mRNA表达 | 第37页 |
| ·Western blot检测DC RelB蛋白表达 | 第37-39页 |
| ·流式细胞仪检测DC共刺激分子、MHC Ⅱ分子表达 | 第39-40页 |
| ·ELISA检测DC IL-6,IL-12,IL-23分泌水平 | 第40页 |
| ·分析及统计方法 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-48页 |
| ·RelB慢病毒shRNA载体的构建和鉴定 | 第40-42页 |
| ·重组慢病毒载体的包装与滴度测定 | 第42-43页 |
| ·RelB RNA干扰有效靶点的筛选 | 第43-45页 |
| ·慢病毒感染对小鼠髓源DC成熟活化的影响 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 第二部分 RelB基因沉默DC对实验性重症肌无力的治疗作用 | 第59-100页 |
| 1 实验材料 | 第59-61页 |
| ·试验动物 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| ·主要仪器与设备 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61-65页 |
| ·CD4+T细胞的制备 | 第61页 |
| ·RelB-Silenced DC和Control DC制备 | 第61页 |
| ·CD4+ T细胞和RelB-Silenced DC/Control DC共培养 | 第61-62页 |
| ·EAMG模型制备 | 第62页 |
| ·RelB-Silenced DC、Control DC体外负载Tα 146-162肽段 | 第62页 |
| ·动物分组 | 第62-63页 |
| ·抗AChR抗体测定 | 第63-64页 |
| ·AChR特异性淋巴细胞增殖反应和细胞因子反应检测 | 第64页 |
| ·Western-blot检测Th17,Th1,Th2,Treg细胞亚群特异性转录因子 | 第64-65页 |
| ·分析及统计方法 | 第65页 |
| 3 结果 | 第65-72页 |
| ·免疫磁珠法分选CD4+T细胞的纯度鉴定 | 第65-66页 |
| ·DC对AChR反应性CD4~+T细胞增殖的影响 | 第66-67页 |
| ·DC:T共培养上清细胞因子测定 | 第67-68页 |
| ·实验小鼠的临床评分变化 | 第68-69页 |
| ·实验小鼠血清中抗AChR抗体的变化 | 第69-70页 |
| ·RelB-Silenced DC对EAMG小鼠抗原特异性增殖反应的影响 | 第70-71页 |
| ·RelB-Silenced DC对EAMG小鼠T细胞亚群的影响 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-84页 |
| 5 结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 综述一 | 第100-108页 |
| 综述二 | 第108-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 攻读学位期间的主要学术成果 | 第120页 |
