扁桃酸消旋酶和扁桃酸脱氢酶基因的克隆及表达
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 绪论 | 第10-17页 |
| ·生物催化技术研究概况 | 第10-12页 |
| ·生物催化技术 | 第10页 |
| ·生物催化在有机合成中的应用 | 第10页 |
| ·生物催化的主要方式 | 第10-12页 |
| ·苯乙酮酸研究概况 | 第12-15页 |
| ·苯乙酮酸的理化性质 | 第12页 |
| ·苯乙酮酸的用途 | 第12-13页 |
| ·苯乙酮酸的制备 | 第13-15页 |
| ·本课题的主要研究内容与研究意义 | 第15-17页 |
| ·主要研究内容 | 第15-16页 |
| ·研究意义 | 第16-17页 |
| 2 扁桃酸代谢菌株的筛选及鉴定 | 第17-27页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·材料与试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·培养基配方 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-21页 |
| ·菌株筛选方法 | 第18-19页 |
| ·高转化活力菌株的保藏 | 第19页 |
| ·菌株的生理生化实验 | 第19-20页 |
| ·菌株的16S rDNA鉴定 | 第20页 |
| ·分析方法 | 第20-21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-26页 |
| ·筛选结果 | 第21-22页 |
| ·62号菌株鉴定结果 | 第22-24页 |
| ·菌株对底物扁桃酸的利用 | 第24-26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 3 扁桃酸消旋酶及扁桃酸脱氢酶基因的克隆与表达 | 第27-48页 |
| ·前言 | 第27-28页 |
| ·材料与试剂 | 第28-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·培养基和常用溶液的配制 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-40页 |
| ·扁桃酸消旋酶及扁桃酸脱氢酶基因的PCR扩增 | 第31-33页 |
| ·PCR产物的TA克隆 | 第33-36页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·目的蛋白的表达检测 | 第37-39页 |
| ·重组菌全细胞转化扁桃酸生成苯乙酮酸 | 第39页 |
| ·分析方法 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-47页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第40页 |
| ·mdlA+mdlB基因TA克隆鉴定 | 第40-41页 |
| ·表达重组质粒的构建 | 第41-42页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组菌全细胞转化实验的研究 | 第43-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 4 结论与展望 | 第48-50页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| ·展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
