| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-37页 |
| 第一节 驱动蛋白和有丝分裂 | 第14-19页 |
| ·驱动蛋白简介 | 第14-16页 |
| ·有丝分裂 | 第16-17页 |
| ·驱动蛋白在有丝分裂中的作用 | 第17-19页 |
| 第二节 Eg5的结构和功能 | 第19-23页 |
| ·Eg5的基因定位和结构 | 第19-22页 |
| ·Eg5在有丝分裂中的作用 | 第22-23页 |
| ·Eg5与肿瘤发生发展 | 第23页 |
| 第三节 泛素连接酶Parkin | 第23-27页 |
| ·泛素-蛋白酶体降解途径 | 第23-25页 |
| ·Parkin的结构与功能 | 第25-27页 |
| 第四节 纺锤体检验点 | 第27-30页 |
| ·细胞周期的检验点 | 第27-28页 |
| ·纺锤体检验点 | 第28-29页 |
| ·纺锤体检验点与肿瘤化疗 | 第29-30页 |
| 第五节 Eg5抑制剂 | 第30-33页 |
| ·代表性Eg5抑制剂 | 第30-33页 |
| ·Eg5抑制剂的优点 | 第33页 |
| 第六节 胰腺癌及其治疗 | 第33-35页 |
| 第七节 本研究的目的和意义 | 第35-37页 |
| 第二章 材料与方法 | 第37-48页 |
| 第一节 实验材料 | 第37-40页 |
| ·细胞系 | 第37页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·质粒 | 第37-38页 |
| ·分子克隆所用的酶 | 第38-39页 |
| ·小分子RNA | 第39页 |
| ·抗体 | 第39页 |
| ·化合物 | 第39-40页 |
| 第二节 实验方法 | 第40-48页 |
| ·分子克隆 | 第40页 |
| ·PCR反应 | 第40页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·质粒转染 | 第40页 |
| ·siRNA转染 | 第40-41页 |
| ·病毒扩增 | 第41页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第41-42页 |
| ·Western blotting | 第42页 |
| ·免疫沉淀 | 第42-43页 |
| ·免疫荧光染色 | 第43-44页 |
| ·蛋白质翻转实验 | 第44页 |
| ·流式细胞术分析细胞周期 | 第44页 |
| ·MPM2染色实验 | 第44页 |
| ·Annexin V染色实验 | 第44-45页 |
| ·Caspase-3活性检测 | 第45页 |
| ·实时定量PCR | 第45页 |
| ·蛋白质-寡核苷酸结合实验 | 第45页 |
| ·JNK免疫复合物激酶活性检测 | 第45页 |
| ·体外细胞增殖实验 | 第45-46页 |
| ·裸鼠实验 | 第46页 |
| ·肿瘤切片的TUNEL染色 | 第46-48页 |
| 第三章 Parkin对Eg5基因表达的调控及其分子机制 | 第48-68页 |
| 第一节 Parkin下调Eg5的表达 | 第48-51页 |
| 第二节 Parkin对Eg5表达的下调不依赖于泛素-蛋白酶体途径 | 第51-54页 |
| 第三节 Eg5在转录水平上受到Parkin的下调 | 第54-60页 |
| 第四节 Parkin通过抑制JNK-c-Jun信号途径降低Eg5基因的表达 | 第60-64页 |
| 第五节 Parkin泛素化Hsp70对Parkin灭活JNK及降低Eg5表达很重要 | 第64-68页 |
| 第四章 Eg5抑制剂的抗胰腺癌作用及其分子机制 | 第68-88页 |
| 第一节 Eg5抑制剂阻止胰腺癌细胞的增殖 | 第69-70页 |
| 第二节 Eg5抑制剂阻止胰腺癌细胞在有丝分裂期并影响双极纺锤体形成 | 第70-73页 |
| 第三节 Eg5抑制剂在胰腺癌细胞中激活纺锤体检验点 | 第73-76页 |
| 第四节 Eg5抑制剂诱导胰腺癌细胞凋亡 | 第76-79页 |
| 第五节 纺锤体检验点完整性影响胰腺癌细胞对Eg5抑制剂的敏感性 | 第79-85页 |
| 第六节 Eg5抑制剂在裸鼠体内阻止胰腺癌生长 | 第85-88页 |
| 第五章 讨论 | 第88-92页 |
| 第一节 Eg5基因表达调控机制 | 第88-89页 |
| 第二节 Eg5抑制剂的抗胰腺癌作用 | 第89-92页 |
| 第六章 结论 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-105页 |
| 附录1:个人履历 | 第105-106页 |
| 附录2:在学期间发表的论文 | 第106-107页 |
| 附录3:英文缩写 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
