| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-25页 |
| ·畜禽遗传资源的保护现状 | 第16-18页 |
| ·畜禽遗传资源多样性保护的重要性 | 第16页 |
| ·畜禽遗传资源多样性保护的紧迫性 | 第16-17页 |
| ·国内外畜禽遗传资源保护现状 | 第17-18页 |
| ·BAC 文库在保护遗传学中的研究现状 | 第18-20页 |
| ·BAC 克隆载体的研究进展 | 第18页 |
| ·BAC 文库在畜禽遗传资源保护学中的应用 | 第18-19页 |
| ·BAC 文库筛选系统 | 第19-20页 |
| ·世界上已构建的羊基因组 BAC 文库 | 第20页 |
| ·转基因靶细胞培养技术的研究现状 | 第20-22页 |
| ·细胞培养技术的发展概况 | 第20-21页 |
| ·转基因靶细胞系的制备方法 | 第21-22页 |
| ·干扰素诱导蛋白10 基因的研究现状 | 第22-24页 |
| ·趋化因子家族 | 第22-23页 |
| ·干扰素诱导蛋白10 的受体 | 第23页 |
| ·干扰素诱导蛋白10 的功能 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 乌珠穆沁羊细菌人工染色体文库的构建、鉴定及筛选系统的建立 | 第25-48页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·主要试剂和酶 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·溶液及试剂配制 | 第26-27页 |
| ·菌株与克隆载体 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·高分子量DNA 的制备 | 第27-28页 |
| ·最适HindⅢ酶切量的确定 | 第28页 |
| ·大片段DNA 的大小片段选择 | 第28页 |
| ·大片段DNA 的回收 | 第28页 |
| ·大片段DNA 与载体的连接 | 第28-29页 |
| ·转化、铺板与蓝白斑的筛选 | 第29页 |
| ·BAC 文库空载率的计算 | 第29页 |
| ·BAC 文库中假阳性克隆比例的估计 | 第29页 |
| ·BAC 克隆插入片段大小的估计 | 第29-30页 |
| ·BAC 克隆的稳定性检测 | 第30页 |
| ·转化产物的保种 | 第30页 |
| ·文库的保存 | 第30-31页 |
| ·文库PCR 筛选系统的建立 | 第31-32页 |
| ·微卫星标记物筛选文库 | 第32-35页 |
| ·实验结果 | 第35-44页 |
| ·琼脂糖包埋法提取高分子量基因组DNA | 第35-36页 |
| ·最适HindⅢ酶切量的确定 | 第36-38页 |
| ·大片段DNA 的大小片段选择 | 第38页 |
| ·大片段DNA 的回收 | 第38-39页 |
| ·连接与转化 | 第39-40页 |
| ·文库的空载率、平均插入片段大小及覆盖率的鉴定 | 第40-42页 |
| ·克隆的稳定性检测 | 第42页 |
| ·文库PCR 筛选系统的建立 | 第42-43页 |
| ·文库中筛选微卫星标记物 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| ·乌珠穆沁羊基因组BAC 文库 | 第44-45页 |
| ·高分子量基因组 DNA 的制备 | 第45页 |
| ·大片段 DNA 的获得 | 第45-46页 |
| ·载体与大片段 DNA 的连接与转化 | 第46页 |
| ·BAC 文库的保存 | 第46-47页 |
| ·BAC 文库的鉴定 | 第47页 |
| ·BAC 文库的筛选管理 | 第47-48页 |
| 第三章 乌珠穆沁羊转基因靶细胞系的构建与鉴定 | 第48-61页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要溶液配制 | 第48-49页 |
| ·菌株与克隆载体 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·原代细胞培养 | 第49页 |
| ·传代细胞培养 | 第49页 |
| ·低温冷冻保存 | 第49-50页 |
| ·细胞的复苏 | 第50页 |
| ·细胞活率检测 | 第50页 |
| ·生长曲线的绘制 | 第50页 |
| ·微生物污染检测 | 第50-51页 |
| ·染色体和核型分析 | 第51页 |
| ·同工酶分析 | 第51页 |
| ·脂质体介导荧光蛋白转染靶细胞 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-59页 |
| ·乌珠穆沁羊转基因靶细胞系的制备 | 第51-52页 |
| ·乌珠穆沁羊转基因靶细胞系的的鉴定 | 第52-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·乌珠穆沁羊成纤维细胞系的构建 | 第59页 |
| ·细胞培养中的微生物污染 | 第59页 |
| ·细胞遗传学检测 | 第59-60页 |
| ·同工酶检测 | 第60页 |
| ·外源基因在细胞中的表达 | 第60-61页 |
| 第四章 乌珠穆沁羊 IP-10 基因的筛选与表达 | 第61-76页 |
| ·实验材料 | 第61-62页 |
| ·主要试剂和酶 | 第61页 |
| ·主要仪器设备 | 第61页 |
| ·菌株与克隆载体 | 第61-62页 |
| ·实验方法 | 第62-67页 |
| ·IP-10 基因筛选BAC 文库 | 第62-65页 |
| ·IP-10 基因的克隆与测序 | 第65页 |
| ·乌珠穆沁羊 IP-10 基因真核表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·脂质体介导外源基因转染靶细胞 | 第66页 |
| ·IP-10 基因的真核表达的鉴定 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-74页 |
| ·耳缘组织总 RNA 的提取 | 第67页 |
| ·IP-10 基因筛选BAC 文库 | 第67-69页 |
| ·IP-10 基因序列分析 | 第69-70页 |
| ·IP-10 基因真核表达载体的构建 | 第70-71页 |
| ·IP-10 基因在靶细胞中的表达 | 第71-73页 |
| ·IP-10 基因的真核表达鉴定 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| ·干扰素诱导蛋白10 的筛选 | 第74-75页 |
| ·干扰素诱导蛋白10 的真核表达载体的构建 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 附录 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简介 | 第91页 |