| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-30页 |
| ·引言 | 第16页 |
| ·黄萎病菌的致病机理 | 第16-17页 |
| ·植物抗病基因 | 第17页 |
| ·LRR-TM 类植物抗病基因——跨膜受体蛋白 | 第17-21页 |
| ·番茄抗叶霉菌基因Cf | 第18-19页 |
| ·苹果抗黑星病基因HcrVf | 第19-20页 |
| ·番茄抗轮枝菌属生理小种1 基因Ve | 第20页 |
| ·番茄抗绿色木霉菌木聚糖酶基因LeEix | 第20-21页 |
| ·拟南芥抗霜霉菌基因RPP27 | 第21页 |
| ·LRR-TM 的进化 | 第21-22页 |
| ·LRR-TM 的结构与功能的关系 | 第22-24页 |
| ·LRR 重复单元 | 第22-23页 |
| ·胞内短肽 | 第23-24页 |
| ·其它功能位点 | 第24页 |
| ·LRR-TM 介导的信号传导及抗病防卫反应 | 第24-29页 |
| ·抗病信号传导因子 | 第24-25页 |
| ·乙烯信号途径及抗病防卫反应 | 第25-27页 |
| ·茉莉酸信号途径及抗病防卫反应 | 第27-28页 |
| ·乙烯信号途径与茉莉酸信号途径的协同作用 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 海岛棉LRR-TM 类基因GbaVd1 和GbaVd2 的克隆与分析 | 第30-57页 |
| 引言 | 第30页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·棉花材料和菌株 | 第30页 |
| ·试剂仪器 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-41页 |
| ·棉花幼苗的培养与处理 | 第31页 |
| ·棉花幼苗总RNA 的提取 | 第31页 |
| ·去除RNA 中的基因组DNA | 第31-32页 |
| ·棉花基因组DNA 的提取 | 第32页 |
| ·TAIL-PCR 扩增GbaVd1 和GbaVd2 序列 | 第32-34页 |
| ·cDNA 末端快速克隆—3'RACE | 第34-36页 |
| ·cDNA 末端快速克隆—5'RACE | 第36-38页 |
| ·PCR 扩增全长基因及内含子检测 | 第38-39页 |
| ·TAIL-PCR 扩增GbaVd1 和GbaVd2 的侧翼序列 | 第39页 |
| ·PCR 产物回收 | 第39-40页 |
| ·PCR 产物连接、转化、筛选及测序 | 第40-41页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因的生物信息学分析 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-53页 |
| ·TAIL-PCR 克隆GbaVd1 和GbaVd2 基因 | 第41-42页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因全长cDNA 的克隆 | 第42-43页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因5'侧翼序列的扩增 | 第43-44页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因简要生物信息学分析 | 第44-50页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 LRR-TM 结构分析 | 第50页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 侧翼序列分析 | 第50-53页 |
| ·讨论 | 第53-57页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 属于LRR-TM 类同源基因 | 第53-54页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 的进化 | 第54-56页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 可能参与应答抗病反应 | 第56-57页 |
| 第三章 GbaVd1 与GbaVd2 在不同野生棉种的克隆与分析 | 第57-71页 |
| 引言 | 第57-58页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·植物材料 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58-59页 |
| ·主要仪器 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-61页 |
| ·棉花材料的培养与处理 | 第59页 |
| ·棉花基因组DNA 的提取 | 第59页 |
| ·PCR 扩增 | 第59-60页 |
| ·PCR 产物回收 | 第60页 |
| ·PCR 产物连接、转化、筛选及测序 | 第60页 |
| ·野生棉抗病性鉴定 | 第60页 |
| ·生物信息学分析 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-69页 |
| ·不同野生棉种对大丽轮枝菌的抗病性鉴定 | 第61页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 在不同野生棉种中的克隆 | 第61-62页 |
| ·不同野生棉种基因差异分析 | 第62-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因在不同野生棉种中的克隆 | 第69页 |
| ·不同野生棉种Vd1 和Vd2 基因差异与抗病性的关系 | 第69-71页 |
| 第四章 GbaVd1 与GbaVd2 的遗传转化与抗病性鉴定 | 第71-89页 |
| 引言 | 第71页 |
| ·材料 | 第71-72页 |
| ·植物材料 | 第71页 |
| ·菌株及致病真菌 | 第71-72页 |
| ·仪器及试剂 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-80页 |
| ·棉花材料的培养与处理 | 第72页 |
| ·棉花组织总RNA 的提取 | 第72页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第72-73页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 的克隆与表达载体构建 | 第73-75页 |
| ·拟南芥与大丽轮枝菌互作鉴定 | 第75-77页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 拟南芥遗传转化与鉴定 | 第77-79页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 转基因拟南芥抗病性鉴定 | 第79-80页 |
| ·拟南芥组织染色 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-86页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 植物表达载体的构建 | 第80-81页 |
| ·转基因拟南芥抗性筛选和分子验证 | 第81-82页 |
| ·拟南芥与大丽轮枝菌互作鉴定 | 第82-84页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 转基因拟南芥对大丽轮枝菌抗性鉴定 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| ·拟南芥可以用于大丽轮枝菌致病性研究 | 第86-87页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因具有抗黄萎病的功能 | 第87页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因可能参与Avr 蛋白的识别 | 第87-89页 |
| 第五章 GbaVd1 与GbaVd2 调控大丽轮枝菌抗性机理研究 | 第89-119页 |
| 引言 | 第89页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·植物材料 | 第89页 |
| ·试剂 | 第89-90页 |
| ·主要仪器 | 第90页 |
| ·方法 | 第90-92页 |
| ·拟南芥幼苗培养 | 第90页 |
| ·拟南芥幼苗RNA 的提取 | 第90页 |
| ·基因芯片表达谱分析 | 第90页 |
| ·定量PCR | 第90-92页 |
| ·木质部染色 | 第92页 |
| ·β-1,3-glucanase 活性测定 | 第92页 |
| ·β-D-xylosidase 活性测定 | 第92页 |
| ·结果 | 第92-112页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 转基因拟南芥差异表达基因分析及GO 分类 | 第92-100页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 转基因拟南芥差异表达基因代谢途径分析 | 第100-104页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 转基因拟南芥定量PCR 分析 | 第104-106页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 转基因株系细胞壁相关基因分析 | 第106-111页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 抗病机理模式假设 | 第111-112页 |
| ·讨论 | 第112-119页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因的抗性依赖于抗病信号因子传导 | 第112-113页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因与乙烯和茉莉酸信号转导途径的关系 | 第113-114页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因诱导的抗病防卫反应 | 第114-118页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因抗病模式 | 第118-119页 |
| 第六章 全文结论 | 第119-123页 |
| ·结论 | 第119-122页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因编码LRR-TM 类跨膜受体蛋白 | 第119页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因在不同野生棉种的差异分析 | 第119-120页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 基因具有抗黄萎病功能 | 第120页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 调控了抗病信号因子的表达 | 第120-121页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 激活了乙烯和茉莉酸信号转导途径 | 第121页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 诱导的抗病防卫反应 | 第121-122页 |
| ·GbaVd1 和GbaVd2 抗病机理模式假设 | 第122页 |
| ·后续工作 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-137页 |
| 附录 | 第137-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 作者简历 | 第140页 |
