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pLenti6/V5-PTEN载体的构建及鉴定

中文摘要第1-4页
Abstract第4-8页
引言第8-11页
第一部分 pLenti6/V5-PTEN载体的构建第11-23页
 1 材料第11-12页
   ·试剂及耗材第11-12页
   ·仪器第12页
 2 方法第12-18页
   ·PTEN基因与内参GAPDH引物的设计与合成第12页
   ·扩增PTEN基因第12-14页
   ·回收PCR产物第14-15页
   ·pLenti6/V5-PTEN载体扩增并提取质粒第15页
   ·构建载体第15-18页
 3 结果第18-21页
   ·PTEN基因扩增及回收第18-19页
   ·pLenti6/V5-PTEN载体构建第19-20页
   ·转化鉴定第20页
   ·测序结果第20-21页
 4 讨论第21-23页
第二部分 pLenti6/V5-PTEN载体的表达和鉴定第23-34页
 1 材料第23-24页
   ·试剂及耗材第23页
   ·仪器第23页
   ·实验所用细胞系第23-24页
 2 方法第24-28页
   ·LOVO结肠癌细胞株与HepG2肝癌细胞株的培养第24页
   ·将pLenti6/V5-PTEN载体转染LOVO和HepG2细胞第24-25页
   ·检测mRNA水平PTEN的表达第25-26页
   ·检测蛋白水平PTEN的表达第26-28页
 3 结果第28-32页
   ·培养生长和增殖稳定的细胞系第28-30页
   ·两种细胞系转染pLenti6/V5-PTEN前后mRNA水平和蛋白水平的变化第30-32页
 4 讨论第32-34页
结语第34-35页
参考文献第35-38页
综述第38-43页
附录第43-45页
在校期间发表论文情况第45-46页
致谢第46页

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