| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 引言 | 第8-11页 |
| 第一部分 pLenti6/V5-PTEN载体的构建 | 第11-23页 |
| 1 材料 | 第11-12页 |
| ·试剂及耗材 | 第11-12页 |
| ·仪器 | 第12页 |
| 2 方法 | 第12-18页 |
| ·PTEN基因与内参GAPDH引物的设计与合成 | 第12页 |
| ·扩增PTEN基因 | 第12-14页 |
| ·回收PCR产物 | 第14-15页 |
| ·pLenti6/V5-PTEN载体扩增并提取质粒 | 第15页 |
| ·构建载体 | 第15-18页 |
| 3 结果 | 第18-21页 |
| ·PTEN基因扩增及回收 | 第18-19页 |
| ·pLenti6/V5-PTEN载体构建 | 第19-20页 |
| ·转化鉴定 | 第20页 |
| ·测序结果 | 第20-21页 |
| 4 讨论 | 第21-23页 |
| 第二部分 pLenti6/V5-PTEN载体的表达和鉴定 | 第23-34页 |
| 1 材料 | 第23-24页 |
| ·试剂及耗材 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23页 |
| ·实验所用细胞系 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-28页 |
| ·LOVO结肠癌细胞株与HepG2肝癌细胞株的培养 | 第24页 |
| ·将pLenti6/V5-PTEN载体转染LOVO和HepG2细胞 | 第24-25页 |
| ·检测mRNA水平PTEN的表达 | 第25-26页 |
| ·检测蛋白水平PTEN的表达 | 第26-28页 |
| 3 结果 | 第28-32页 |
| ·培养生长和增殖稳定的细胞系 | 第28-30页 |
| ·两种细胞系转染pLenti6/V5-PTEN前后mRNA水平和蛋白水平的变化 | 第30-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 结语 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 综述 | 第38-43页 |
| 附录 | 第43-45页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46页 |