| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-18页 |
| 1 热激蛋白概述 | 第10-13页 |
| ·热激蛋白及其序列保守性 | 第10页 |
| ·热激蛋白分类 | 第10-11页 |
| ·热激蛋白在植物抗热中的作用 | 第11-13页 |
| ·热激蛋白HSP100/ClpB及其研究现状 | 第13页 |
| 2 植物逆境胁迫生理指标 | 第13-14页 |
| 3 SDS-PAGE凝胶电泳及分离蛋白的局限性 | 第14-15页 |
| 4 异源表达系统的选择 | 第15-16页 |
| ·原核表达系统 | 第15-16页 |
| ·亲和层析的原理 | 第16页 |
| 5 Athspr突变体研究现状 | 第16-17页 |
| 6 实验研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 Athspr突变体的耐热功能分析 | 第18-29页 |
| 1 材料及培养条件 | 第18-19页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·培养条件 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-21页 |
| ·基础耐热性检测 | 第19页 |
| ·获得耐热性检测 | 第19页 |
| ·不同培养条件下耐热性的检测 | 第19页 |
| ·恢复时间梯度处理后耐热性的检测 | 第19-20页 |
| ·种子耐热性检测 | 第20页 |
| ·拟南芥植株热激存活率检测 | 第20页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第20-21页 |
| ·下胚轴长度测定 | 第21页 |
| 3 实验结果 | 第21-27页 |
| ·基础耐热性比较 | 第21-22页 |
| ·获得耐热性比较 | 第22-23页 |
| ·长期热激胁迫突变体耐热性比较 | 第23-25页 |
| ·恢复时间梯度耐热性比较 | 第25页 |
| ·种子的耐热性比较 | 第25-26页 |
| ·种子耐热性表型比较 | 第25-26页 |
| ·种子萌发率比较 | 第26页 |
| ·热激前后脯氨酸含量测定 | 第26-27页 |
| ·脯氨酸标准曲线 | 第26-27页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第27页 |
| 4 实验讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 ATHSPR蛋白的分离 | 第29-36页 |
| 1 实验材料 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-32页 |
| ·蛋白质的提取 | 第29-30页 |
| ·蛋白质定量 | 第30-31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳分离ATHSPR蛋白 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-35页 |
| 4 实验讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 Athspr基因的原核表达与蛋白纯化 | 第36-48页 |
| 1 实验材料 | 第36页 |
| ·菌株及载体 | 第36页 |
| ·酶及试剂 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-43页 |
| ·原核表达步骤 | 第37-39页 |
| ·拟南芥RNA提取 | 第37-38页 |
| ·反转录 | 第38-39页 |
| ·拟南芥Athspr基因特异性片段的克隆 | 第39页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·外源基因在Rosetta(DE3)中的诱导表达及SDS-PAGE电泳检测 | 第40-41页 |
| ·原核表达蛋白的纯化 | 第41-43页 |
| ·目的蛋白浓缩 | 第43页 |
| 3 实验结果 | 第43-47页 |
| ·序列分析及原核表达载体选择 | 第43-44页 |
| ·目的片段克隆 | 第44页 |
| ·原核表达载体构建 | 第44-45页 |
| ·外源基因诱导表达及SDS-PAGE电泳检测 | 第45-46页 |
| ·原核表达蛋白的纯化 | 第46-47页 |
| 4 实验讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 结论与展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 读研期间的已发表及待发表文章 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |