| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-24页 |
| ·研究的目的与意义 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-22页 |
| ·纤维素酶的研究进展 | 第12-19页 |
| ·内质网滞留信号序列(KDEL) | 第19-21页 |
| ·绿色木霉(Trichoderma viride)的应用进展 | 第21-22页 |
| ·研究内容及技术路线 | 第22-24页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-34页 |
| ·绿色木霉基因组的提取 | 第24-26页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-26页 |
| ·重组载体的构建 | 第26-30页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化及抗性植株的再生 | 第30-31页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-31页 |
| ·抗性植株的检测 | 第31-34页 |
| ·试验材料 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-50页 |
| ·纤维素酶系内切葡聚糖苷酶(EG)基因的克隆 | 第34-39页 |
| ·绿色木霉(Trichoderma viride)基因组的提取 | 第34-35页 |
| ·绿色木霉的内切葡聚糖苷酶基因(EGⅡ)的克隆 | 第35页 |
| ·内切葡聚糖苷酶基因(EGⅡ)单克隆测序 | 第35-38页 |
| ·绿色木霉(Trichoderma viride)总RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·绿色木霉(Trichoderma viride)总RNA的RT-PCR检测 | 第39页 |
| ·p3300-35S-EGⅡ-Tnos重组载体的构建 | 第39-45页 |
| ·表达载体p3300-35S-Tnos的酶切 | 第39-40页 |
| ·目的片段的获得 | 第40-41页 |
| ·植物表达载体p3300-35S-EGⅡ-Tnos的构建 | 第41-45页 |
| ·重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化及抗性植株再生 | 第46-48页 |
| ·抗性植株检测 | 第48-50页 |
| ·抗性植株总DNA的PCR检测 | 第48页 |
| ·抗性植株总RNA的PCR检测 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| ·内切葡聚糖苷酶的拷贝数 | 第50页 |
| ·构建载体过程中酶切位点的选择 | 第50页 |
| ·大肠杆菌连接转化过程 | 第50页 |
| ·DNA提取 | 第50页 |
| ·RNA提取 | 第50-51页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第51页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第51页 |
| ·基因改造后的功能分析 | 第51页 |
| ·工作展望 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| ·内切葡聚糖苷酶(EGⅡ)基因的克隆 | 第52页 |
| ·对EGⅡ基因进行改造 | 第52页 |
| ·构建植物表达载体p3300-35S-EGⅡ-Tnos | 第52页 |
| ·转基因植株的检测 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
