| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| ·发生和流行概况 | 第11-12页 |
| ·IBV 病原学特征 | 第12-13页 |
| ·IBV 基因组 | 第13页 |
| ·IBV 的主要结构蛋白及功能 | 第13-16页 |
| ·纤突蛋白（S） | 第13-14页 |
| ·核衣壳蛋白（N） | 第14-15页 |
| ·膜蛋白（M） | 第15-16页 |
| ·小膜蛋白（E） | 第16页 |
| ·IB 疫苗的研究进展 | 第16-18页 |
| ·弱毒疫苗 | 第16页 |
| ·灭活疫苗 | 第16-17页 |
| ·基因工程疫苗 | 第17-18页 |
| ·IB 检测诊断方法的研究进展 | 第18-22页 |
| ·IBV 的分离培养鉴定 | 第18-19页 |
| ·血清学检测技术 | 第19-20页 |
| ·分子生物学检测技术 | 第20-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-40页 |
| ·N 基因和M 基因原核表达的实验材料与方法 | 第23-34页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·重组N 蛋白纯化及间接ELISA 方法的初步建立的材料与方法 | 第34-40页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·实验方法 | 第36-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-53页 |
| ·IBV N 基因和M 基因RT-PCR 结果 | 第40页 |
| ·目的片段的克隆及鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第41-42页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析和Western Blot 鉴定 | 第42-44页 |
| ·表达产物的存在形式检测 | 第44-45页 |
| ·间接ELISA 方法的初步建立 | 第45-53页 |
| ·棋盘滴定法选择抗原和血清的工作浓度 | 第46-47页 |
| ·最佳封闭液的确定 | 第47页 |
| ·最佳封闭时间的确定 | 第47-48页 |
| ·酶标二抗最佳稀释度的确定 | 第48页 |
| ·抗原抗体最佳作用时间试验 | 第48-49页 |
| ·底物最佳作用时间的确定 | 第49页 |
| ·阴阳性临界值的确定 | 第49-50页 |
| ·特异性试验 | 第50页 |
| ·重复性试验 | 第50-51页 |
| ·符合性试验 | 第51页 |
| ·临床样品的检测 | 第51-52页 |
| ·保存期试验 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-58页 |
| ·对表达基因的选择 | 第53页 |
| ·N 基因和M 基因的克隆 | 第53页 |
| ·表达菌株的选择 | 第53-54页 |
| ·感受态的制备方法 | 第54页 |
| ·N 基因和M 基因的表达 | 第54-55页 |
| ·表达产物存在形式的检测 | 第55页 |
| ·重组N 蛋白的纯化 | 第55页 |
| ·检测方法的选择及其重要性 | 第55-56页 |
| ·间接ELISA 各项试验条件的优化 | 第56页 |
| ·ELISA 反应的特异性、重复性、符合性的检测 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |