| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 第一章 分离并测定甘草酸制剂中甘草酸18位差向异构体 | 第22-33页 |
| 1 仪器与试剂 | 第23页 |
| 2 方法与结果 | 第23-29页 |
| ·色谱条件和系统适用性 | 第23-24页 |
| ·溶液的制备 | 第24页 |
| ·样品测定 | 第24-27页 |
| ·线性关系 | 第27-28页 |
| ·精密度实验 | 第28页 |
| ·稳定性试验 | 第28页 |
| ·加样回收率 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-33页 |
| 第二章 细胞培养及细胞单层模型建立 | 第33-42页 |
| 1 仪器与试剂 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-38页 |
| ·Caco-2及ECV304细胞的培养 | 第34-36页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的建立 | 第36-38页 |
| 3 结果 | 第38-41页 |
| ·细胞形态学检查 | 第38页 |
| ·免疫荧光法验证 | 第38-39页 |
| ·细胞单层模型 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 细胞毒性试验 | 第42-46页 |
| 1 仪器与试剂 | 第42-43页 |
| 2 实验方法 | 第43页 |
| ·溶液配制 | 第43页 |
| ·MTT实验 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 第四章 甘草酸18位差向异构体对P-糖蛋白功能和表达的影响 | 第46-66页 |
| 第一节 18α-、18β-甘草酸对P-糖蛋白功能的影响 | 第47-53页 |
| ·仪器与试剂 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·溶液配制 | 第47页 |
| ·荧光淬灭实验 | 第47-48页 |
| ·不同浓度药物对P-糖蛋白功能的影响 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-53页 |
| ·荧光淬灭实验 | 第49-50页 |
| ·不同浓度药物对P-糖蛋白功能的影响 | 第50-53页 |
| 第二节 18α-、18β-甘草酸对MDR1 mRNA表达的影响 | 第53-60页 |
| ·仪器与试剂 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-57页 |
| ·实验分组 | 第53-54页 |
| ·溶液配制 | 第54页 |
| ·实时荧光定量PCR检测MDR1 mRNA | 第54-57页 |
| ·结果 | 第57-60页 |
| ·RNA的提取 | 第57-58页 |
| ·Real-time PCR退火温度 | 第58-59页 |
| ·Real-time PCR引物设计 | 第59页 |
| ·Real-time PCR检测mRNA表达 | 第59-60页 |
| 第三节 18α-、18β-甘草酸对P-糖蛋白表达的影响 | 第60-63页 |
| ·仪器与试剂 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-62页 |
| ·溶液配制 | 第61页 |
| ·实验分组 | 第61页 |
| ·实验操作 | 第61-62页 |
| ·流式细胞仪测荧光 | 第62页 |
| ·数据处理 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-63页 |
| 讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 甘草酸18位差向异构体水解产物对P-糖蛋白功能和表达的影响 | 第66-78页 |
| 第一节 18α-、18β-甘草次酸对P-糖蛋白功能的影响 | 第66-69页 |
| ·仪器与试剂 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-67页 |
| ·溶液配制 | 第66-67页 |
| ·荧光淬灭实验 | 第67页 |
| ·不同浓度药物对P-糖蛋白功能的影响 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-69页 |
| ·荧光淬灭实验 | 第67-68页 |
| ·不同浓度药物对P-糖蛋白功能的影响 | 第68-69页 |
| 第二节 18α-、18β-甘草次酸对MDR1 mRNA表达的影响 | 第69-71页 |
| ·仪器与试剂 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-70页 |
| ·实验分组 | 第69-70页 |
| ·溶液配制 | 第70页 |
| ·实时荧光定量PCR检测MDR1 mRNA | 第70页 |
| ·结果 | 第70-71页 |
| 第三节 18α-、18β-甘草次酸对P-糖蛋白表达的影响 | 第71-76页 |
| ·仪器与试剂 | 第71页 |
| ·Western blot检测P-糖蛋白的表达 | 第71-74页 |
| ·实验分组 | 第71页 |
| ·溶液配制 | 第71-72页 |
| ·蛋白提取 | 第72页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第72-73页 |
| ·Western blot | 第73-74页 |
| ·数据处理 | 第74页 |
| ·结果 | 第74-76页 |
| 讨论 | 第76-77页 |
| 小结 | 第77-78页 |
| 第六章 甘草酸18位差向异构体水解产物对P-糖蛋白底物跨膜转运的影响 | 第78-97页 |
| 第一节 18α-、18β-甘草次酸对罗丹明123双向转运的影响 | 第78-87页 |
| ·仪器与试剂 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-82页 |
| ·溶液配制 | 第78-80页 |
| ·Caco-2细胞单层模型建立及稳定性考察 | 第80页 |
| ·药物瞬时作用下的双向跨膜转运 | 第80-81页 |
| ·药物干预72h后的双向跨膜转运 | 第81-82页 |
| ·样品中Rho-123的测定 | 第82页 |
| ·数据处理 | 第82页 |
| ·结果 | 第82-87页 |
| ·单层细胞模型稳定性考察 | 第82-84页 |
| ·药物瞬时作用下的双向跨膜转运 | 第84-86页 |
| ·药物干预72h后的双向跨膜转运 | 第86-87页 |
| 第二节 细胞转运液中他林洛尔浓度的测定 | 第87-90页 |
| ·仪器与试剂 | 第87-88页 |
| ·方法与结果 | 第88-90页 |
| ·溶液配制 | 第88页 |
| ·色谱条件 | 第88页 |
| ·样品处理 | 第88页 |
| ·方法学考察 | 第88-90页 |
| 第三节 18α-、18β-甘草次酸对他林洛尔外向转运的影响 | 第90-94页 |
| ·仪器与试剂 | 第90页 |
| ·实验方法 | 第90-93页 |
| ·溶液配制 | 第91页 |
| ·Caco-2细胞单层模型建立及验证 | 第91页 |
| ·药物干预72h后外向跨膜转运 | 第91-92页 |
| ·样品中他林洛尔浓度的测定 | 第92页 |
| ·数据处理 | 第92-93页 |
| ·结果 | 第93-94页 |
| 讨论 | 第94-96页 |
| 小结 | 第96-97页 |
| 第七章 甘草酸制剂对他林洛尔药物代谢动力学的影响 | 第97-112页 |
| 第一节 人血浆中他林洛尔浓度的测定 | 第98-103页 |
| ·仪器与试剂 | 第98页 |
| ·实验方法 | 第98-99页 |
| ·色谱条件和系统适用性 | 第98-99页 |
| ·溶液配制 | 第99页 |
| ·血浆样品的处理 | 第99页 |
| ·结果 | 第99-103页 |
| 第二节 复方甘草酸苷对他林洛尔药代动力学的影响 | 第103-109页 |
| ·仪器与试剂 | 第103页 |
| ·实验对象 | 第103-104页 |
| ·受试者来源 | 第103页 |
| ·受试者入组情况 | 第103-104页 |
| ·实验方法 | 第104-105页 |
| ·随机分组 | 第104页 |
| ·给药方案 | 第104页 |
| ·血样采集 | 第104-105页 |
| ·不良反应监测 | 第105页 |
| ·血浆样本的测定 | 第105页 |
| ·数据处理 | 第105页 |
| ·结果 | 第105-109页 |
| 讨论 | 第109-112页 |
| 全文总结 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-126页 |
| 综述 | 第126-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
| 攻读博士学位期间主要研究成果 | 第141-142页 |
