| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-20页 |
| ·嗜碱菌研究进展与前景 | 第9-11页 |
| ·嗜碱菌的嗜碱机制 | 第11-13页 |
| ·嗜碱菌的生物技术应用 | 第13-16页 |
| ·嗜碱菌碱性酶的工业应用 | 第13-14页 |
| ·嗜碱菌抗生素和酶抑制剂的应用 | 第14-15页 |
| ·嗜碱菌在环境保护中的应用 | 第15页 |
| ·嗜碱菌在基因工程中的应用 | 第15-16页 |
| ·Mrp操纵子的生物信息学分析 | 第16-18页 |
| ·Mrp操作子概述 | 第16-17页 |
| ·Mrp操纵子的基因排列组合 | 第17-18页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| ·课题研究方案 | 第19-20页 |
| 第2章 材料和方法 | 第20-35页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·实验菌株 | 第20页 |
| ·质粒 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·枯草芽孢杆菌基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·目的基因片段的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·目的基因的转化 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的测序分析 | 第30页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·细胞膜的提取 | 第31页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第31页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第31-34页 |
| ·等温滴定微量量热法(ITC) | 第34-35页 |
| 第3章 mrp系统基因的克隆与表达载体的构建 | 第35-49页 |
| ·mrp系统基因的克隆 | 第35-37页 |
| ·枯草芽孢杆菌基因组DNA的提取 | 第35页 |
| ·mrpDEFG基因片段的扩增 | 第35-36页 |
| ·mrp系统基因片段的扩增 | 第36-37页 |
| ·mrp系统基因表达载体的构建 | 第37-48页 |
| ·pHX100[mrpDEFG]的构建 | 第37-41页 |
| ·pMal-p4x[mrpE],pMal-p4x[mrpF]的构建 | 第41-44页 |
| ·pMal-p4x[mrpG],pMal-p4x[mrpEFG]的构建 | 第44-46页 |
| ·pMal-p4x[mrpEF],pMal-p4x[mrpFG]的构建 | 第46-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第4章 mrp系统基因的诱导表达 | 第49-55页 |
| ·His-GFP,His-YFP重组蛋白的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·MBP-重组蛋白的诱导表达 | 第50-52页 |
| ·重组蛋白的电泳检测分析 | 第52-53页 |
| ·MBP-MrpF重组蛋白与MBP蛋白的分析 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第5章 MBP-MrpF重组蛋白的纯化 | 第55-62页 |
| ·去垢剂的选择 | 第55-56页 |
| ·细胞膜溶解浓度的选择 | 第56-57页 |
| ·MBP-MrpF的纯化 | 第57-58页 |
| ·MBP的纯化 | 第58-59页 |
| ·纯化回收率的计算 | 第59-60页 |
| ·His-GFP与His-YFP的纯化 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第6章 MBP-MrpF结构和功能的初步分析 | 第62-69页 |
| ·MBP-MrpF的疏水性分析和拓扑学结构分析 | 第62-64页 |
| ·MrpF疏水性分析 | 第62-63页 |
| ·MrpF拓扑结构分析 | 第63-64页 |
| ·MBP-mrpF功能的初步研究 | 第64-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第7章 结论 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果目录 | 第76页 |
