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酪蛋白纳米球的制备及其细胞摄取研究

目录第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-14页
第一章 绪论第14-55页
 1 药物载体第14-16页
   ·纳米药物载体的种类及其制备方法第14-16页
     ·纳米粒第14页
     ·纳米脂质体第14-15页
     ·固体脂质纳米粒第15页
     ·聚合物胶束第15页
     ·纳米磁性颗粒第15-16页
   ·药物载体具有显著优点第16页
 2 生物降解天然高分子材料第16-19页
   ·壳聚糖第17页
   ·藻酸盐第17-18页
   ·琼脂糖第18页
   ·胶原及其衍生物第18页
   ·明胶及其衍生物第18-19页
   ·纤维蛋白第19页
   ·丝素蛋白第19页
 3 酪蛋白第19-25页
   ·酪蛋白的一级结构第20-21页
   ·酪蛋白的嵌段共聚物模型第21-22页
   ·酪蛋白胶束结构模型第22-25页
     ·"套核"模型第22-23页
     ·内部结构模型第23页
     ·亚单元模型第23-24页
     ·Holt的酪蛋白结构新模型第24-25页
 4 多肽自组装第25-31页
   ·多肽自组装技术第25-26页
   ·多肽自组装机理第26页
   ·多肽自组装结构的多样性第26-30页
     ·膜结构第27页
     ·纳米管、纳米囊和纳米线第27-28页
     ·纳米纤维和水凝胶第28-29页
     ·多肽与其他分子的共组装第29-30页
   ·影响多肽自组装的因素第30-31页
   ·多肽自组装的应用和挑战第31页
 5 细胞对大分子以及纳米颗粒的跨膜吸收第31-38页
   ·细胞的跨膜运输第31-32页
   ·胞吞作用第32-34页
     ·吞噬作用第32-33页
     ·胞饮作用第33-34页
   ·纳米粒子的跨膜吸收第34-38页
     ·聚合物纳米粒子的细胞转运机理第34-35页
     ·聚合物纳米粒子在细胞转运过程中的驱动力第35页
     ·纳米粒子表面性质对跨膜吸收的影响第35-38页
   ·细胞功能和内吞途径的关系第38页
 6 细胞穿膜肽第38-44页
   ·细胞穿膜肽的发现第38-39页
   ·细胞穿膜肽结合细胞膜的机制第39-40页
   ·细胞穿膜肽的内化机制第40-43页
     ·CPP通过脂质层直接入胞模式第40页
     ·CPP通过形成某种跨膜结构发生的转导模式第40-42页
     ·内吞介导的内化模式第42-43页
   ·细胞穿膜肽的应用第43-44页
 7 本论文的研究目的、主要内容和创新之处第44-48页
   ·本论文的研究目的第44-45页
   ·本论文的主要内容第45-46页
   ·本论文的创新之处第46-48页
 8 参考文献第48-55页
第二章 酪蛋白纳米球的组装第55-88页
 1 研究背景第55-56页
 2 实验部分第56-61页
   ·主要试剂第56-57页
   ·细胞株第57页
   ·主要仪器第57-58页
   ·细胞的培养第58-59页
   ·酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备及其表征第59页
   ·单组分酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备及其表征第59页
   ·戊二醛交联纳米球及其表征第59页
   ·纳米球的pH稳定性第59-60页
   ·酪蛋白纳米球的制备与表征第60页
   ·酪蛋白纳米球负载顺铂及其释放第60页
   ·细胞毒性实验第60-61页
   ·罗丹明B异氰酸酯标记酪蛋白纳米球第61页
   ·激光共聚焦显微镜观察细胞第61页
 3 结果与讨论第61-85页
   ·酪蛋白的选择第61-62页
   ·酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备第62-68页
     ·丙烯酸与酪蛋白的摩尔比对纳米球的影响第62-63页
     ·聚合时间对纳米球的影响第63-65页
     ·引发剂用量对纳米球的影响第65-66页
     ·酪蛋白浓度对纳米球的影响第66-67页
     ·反应温度对纳米球的影响第67-68页
   ·酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的表征第68-71页
     ·纳米球的形貌表征第68-69页
     ·纳米球的热稳定性第69-70页
     ·Nanol的pH稳定性第70-71页
   ·单组分酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备第71-73页
   ·用戊二醛交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米球第73-76页
     ·交联温度第73-74页
     ·戊二醛用量第74-75页
     ·交联时间第75-76页
   ·纳米球经戊二醛交联后的表征第76-79页
   ·纳米球的红外表征第79-80页
   ·酪蛋白纳米球的形态表征第80-81页
   ·酪蛋白纳米球负载顺铂及其释放第81-82页
   ·体外细胞毒性实验第82-84页
   ·酪蛋白纳米球在细胞内的分布第84-85页
 4 本章小结第85-86页
 5 参考文献第86-88页
第三章 酪蛋白纳米空心球的制备与表征第88-121页
 1 研究背景第88-90页
 2 实验部分第90-94页
   ·主要试剂第90页
   ·细胞株第90页
   ·主要仪器第90-91页
   ·细胞的培养第91页
   ·酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备及其表征第91页
   ·单组分酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备及其表征第91页
   ·用戊二醛交联纳米球及其表征第91-92页
   ·纳米球的pH稳定性第92页
   ·酪蛋白纳米球的制备与表征第92页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第92-93页
   ·酪蛋白纳米球负载顺铂及其释放第93页
   ·细胞毒性实验第93页
   ·罗丹明B异氰酸酯标记酪蛋白纳米球第93页
   ·激光共聚焦显微镜观察细胞第93-94页
 3 结果与讨论第94-117页
   ·丙酸的选择第94页
   ·丙酸参与的酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备第94-102页
     ·丙烯酸和丙酸与酪蛋白的摩尔比对纳米球的影响第94-97页
     ·酪蛋白浓度对纳米球的影响第97-99页
     ·引发剂用量对纳米球的影响第99-102页
   ·单组分酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的制备第102-104页
   ·纳米球经戊二醛交联后的表征第104-105页
   ·纳米球的pH稳定性第105-108页
   ·纳米球的红外表征第108-110页
   ·酪蛋白纳米球的纯化及稳定性研究第110-112页
   ·酪蛋白-聚丙烯酸纳米球的空心机理研究第112-114页
   ·酪蛋白纳米球负载顺铂及其释放第114-115页
   ·体外细胞毒性实验第115-116页
   ·酪蛋白纳米球在细胞内的分布第116-117页
 4 本章小结第117-119页
 5 参考文献第119-121页
第四章 酪蛋白纳米球进入细胞的机制研究第121-156页
 1 研究背景第121-122页
 2 实验部分第122-128页
   ·主要试剂第122-123页
   ·细胞株第123页
   ·主要仪器第123页
   ·细胞的培养第123页
   ·酪蛋白纳米空心球的制备第123-124页
   ·单组分酪蛋白纳米球的制备第124页
   ·罗丹明B异氰酸酯或荧光胺共价标记第124页
   ·激光共聚焦显微镜观察贴壁细胞第124-125页
   ·激光共聚焦显微镜观察悬浮细胞第125-126页
   ·流式细胞仪第126-127页
   ·细胞毒性实验第127页
   ·内涵体荧光染色第127-128页
   ·溶酶体荧光染色第128页
   ·细胞电镜切片的制备与表征第128页
 3 结果与讨论第128-152页
   ·酪蛋白纳米球的跨膜吸收第129-131页
   ·酪蛋白分子的跨膜吸收第131-133页
   ·圆二色谱表征酪蛋白的结构第133-135页
   ·低温及各种阻断试剂对细胞摄取酪蛋白纳米球的影响第135-145页
     ·低温对细胞摄取酪蛋白纳米球的影响第135-138页
     ·叠氮钠对细胞摄取酪蛋白纳米球的影响第138-140页
     ·制霉菌素对细胞摄取酪蛋白纳米球的影响第140-141页
     ·非律平对细胞摄取酪蛋白纳米球的影响第141-142页
     ·细胞松弛素D对细胞摄取酪蛋白纳米球的影响第142-144页
     ·诺考达唑对细胞摄取酪蛋白纳米球的影响第144-145页
   ·低温或各种阻断试剂处理后对细胞活性的影响第145-146页
   ·酪蛋白纳米空心球在细胞内的定位第146-149页
     ·用FM4-64定位第146-147页
     ·用Lyso-Tracker Red定位第147-148页
     ·透射电镜观察酪蛋白纳米空心球在细胞内的分布第148-149页
   ·不同温度下细胞内化酪蛋白纳米空心球第149-151页
   ·细胞对酪蛋白纳米球内化机制的探讨第151-152页
 4 本章小结第152-154页
 5 参考文献第154-156页
第五章 酪蛋白纳米球的交联及金纳米粒子负载的酪蛋白复合纳米球的制备第156-190页
 1 研究背景第156-158页
 2 实验部分第158-161页
   ·主要试剂第158页
   ·细胞株第158页
   ·主要仪器第158页
   ·细胞的培养第158-159页
   ·酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球的制备第159页
   ·戊二醛交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球第159页
   ·硫酸钙交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球第159页
   ·京尼平交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球第159页
   ·转谷氨酰胺酶交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球第159页
   ·酪蛋白纳米空心球的制备第159-160页
   ·酪蛋白纳米球负载顺铂及其释放第160页
   ·细胞毒性实验第160页
   ·罗丹明B异氰酸酯标记酪蛋白纳米球第160页
   ·激光共聚焦显微镜观察细胞第160页
   ·戊二醛交联的酪蛋白-聚丙烯酸纳米实心球的制备第160页
   ·负载金的酪蛋白-聚丙烯酸复合纳米球的制备及其表征第160-161页
 3 结果与讨论第161-186页
   ·硫酸钙交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球第161-169页
     ·钙盐的选择第161页
     ·交联条件的选择第161-162页
     ·硫酸钙交联后纳米球的pH稳定性第162-164页
     ·硫酸钙交联后纳米球的红外表征第164-165页
     ·经硫酸钙交联得到的酪蛋白纳米球负载顺铂及其释放第165-167页
     ·体外细胞毒性实验第167-168页
     ·酪蛋白纳米球在细胞内的分布第168-169页
   ·京尼平交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球第169-172页
   ·转谷氨酰胺酶交联酪蛋白-聚丙烯酸纳米空心球第172-180页
     ·交联条件的选择第172-177页
     ·转谷氨酰胺酶交联后纳米球的红外表征第177-178页
     ·体外细胞毒性实验第178-179页
     ·酪蛋白纳米球在细胞内的分布第179-180页
   ·负载金的酪蛋白-聚丙烯酸复合纳米球第180-186页
     ·酪蛋白还原氯金酸第181-182页
     ·还原温度和时间对制备复合纳米球的影响第182-184页
     ·氯金酸和酪蛋白的质量比对制备复合纳米球的影响第184-186页
 4 本章小结第186-188页
 5 参考文献第188-190页
已发表和待发表的论文第190-191页
致谢第191-193页

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