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“IGT肾病”分子标志物诊断及microRNA-7977/SIRT3/SOD2/ROS信号通路研究

中文摘要第4-8页
Abstract第8-12页
缩略语/符号说明第16-18页
技术路线 1第18-19页
技术路线 2第19-20页
技术路线 3第20-21页
前言第21-24页
    研究现状、成果第21-22页
    研究目的、方法第22-24页
一、“IGT 肾病”的临床验证第24-44页
    1.1 对象和材料第24-25页
        1.1.1 研究对象第24-25页
        1.1.2 主要试剂第25页
        1.1.3 主要仪器第25页
    1.2 实验方法第25-27页
        1.2.1 实验分组第25-26页
        1.2.2 标本留取第26页
        1.2.3 生化指标检测第26页
        1.2.4 ELISA法测定血清生物学标志物第26-27页
        1.2.5 统计学分析第27页
    1.3 结果第27-38页
        1.3.1 一般资料比较第27-28页
        1.3.2 血糖和胰岛素第28-29页
        1.3.3 肾小球损伤指标比较第29-30页
        1.3.4 肾小管结构和重吸收功能损伤指标比较第30-31页
        1.3.5 血清分子生物学标志物比较第31-37页
        1.3.6 血清生物标志物与胰岛素的相关性第37-38页
    1.4 讨论第38-43页
        1.4.1 “IGT肾病”与胰岛素抵抗及高胰岛素血症第39页
        1.4.2 “IGT肾病”与分子标志物第39-43页
    1.5 小结第43-44页
二、尿液microRNA在“IGT肾病”中的变化第44-55页
    2.1 对象和材料第44-45页
        2.1.1 研究对象第44页
        2.1.2 主要试剂第44-45页
        2.1.3 主要仪器第45页
    2.2 实验方法第45-46页
        2.2.1 尿液RNA提取第45-46页
        2.2.2 芯片检测第46页
        2.2.3 差异microRNA验证第46页
    2.3 实验结果第46-50页
        2.3.1 差异microRNA第46-48页
        2.3.2 差异microRNA相关信号通路第48-49页
        2.3.3 mir-7977、mir-5100的验证第49-50页
    2.4 讨论第50-53页
        2.4.1 差异microRNA的可能作用机制第50-51页
        2.4.2 差异microRNA可能参与的信号通路第51-53页
        2.4.3 差异microRNA的验证第53页
    2.5 小结第53-55页
三、mir-7977通过SIRT3/SOD2/ROS信号通路参与“IGT肾病”机制探讨第55-81页
    3.1 对象和材料第55-58页
        3.1.1 研究对象第55页
        3.1.2 主要器材第55-56页
        3.1.3 主要试剂第56-57页
        3.1.4 溶液配制第57-58页
    3.2 实验方法第58-68页
        3.2.1 细胞培养第58-59页
        3.2.2 T-PCR法检测mir-7977、SIRT3和Cubilin mRNA水平第59-61页
        3.2.3 Western Blot法检测SIRT3、Ac-SOD2、SOD2、Cubilin的蛋白表达第61-66页
        3.2.4 免疫荧光法检测蛋白表达第66-67页
        3.2.5 HK-2细胞对TRITC-albumin的摄取第67页
        3.2.6 活性氧的测定第67页
        3.2.7 细胞转染(以六孔板中的一个孔为例)第67-68页
        3.2.8 双荧光素酶报告实验第68页
    3.3 实验结果第68-78页
        3.3.1 高胰岛素通过mir-7977/SIRT3对细胞氧化应激水平的影响第68-70页
        3.3.2 高胰岛素对细胞Cubilin的表达及白蛋白内吞作用的影响第70-72页
        3.3.3 过表达和抑制mir-7977对SIRT3及氧化应激的影响第72-75页
        3.3.4 双荧光素酶报告验证mir-7977对SIRT3的直接调控作用第75-76页
        3.3.5 SIRT3对Cubilin的表达及白蛋白内吞的影响第76-78页
    3.4 讨论第78-80页
        3.4.1 SIRT3与氧化应激第78-79页
        3.4.2 氧化应激与高胰岛素血症第79-80页
        3.4.3 Cubilin与白蛋白重吸收第80页
    3.5 小结第80-81页
结论第81-82页
参考文献第82-90页
发表论文和参加科研情况说明第90-91页
综述第91-103页
    综述参考文献第97-103页
致谢第103-104页
个人简历第104页

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