中文摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
缩略语/符号说明 | 第16-18页 |
技术路线 1 | 第18-19页 |
技术路线 2 | 第19-20页 |
技术路线 3 | 第20-21页 |
前言 | 第21-24页 |
研究现状、成果 | 第21-22页 |
研究目的、方法 | 第22-24页 |
一、“IGT 肾病”的临床验证 | 第24-44页 |
1.1 对象和材料 | 第24-25页 |
1.1.1 研究对象 | 第24-25页 |
1.1.2 主要试剂 | 第25页 |
1.1.3 主要仪器 | 第25页 |
1.2 实验方法 | 第25-27页 |
1.2.1 实验分组 | 第25-26页 |
1.2.2 标本留取 | 第26页 |
1.2.3 生化指标检测 | 第26页 |
1.2.4 ELISA法测定血清生物学标志物 | 第26-27页 |
1.2.5 统计学分析 | 第27页 |
1.3 结果 | 第27-38页 |
1.3.1 一般资料比较 | 第27-28页 |
1.3.2 血糖和胰岛素 | 第28-29页 |
1.3.3 肾小球损伤指标比较 | 第29-30页 |
1.3.4 肾小管结构和重吸收功能损伤指标比较 | 第30-31页 |
1.3.5 血清分子生物学标志物比较 | 第31-37页 |
1.3.6 血清生物标志物与胰岛素的相关性 | 第37-38页 |
1.4 讨论 | 第38-43页 |
1.4.1 “IGT肾病”与胰岛素抵抗及高胰岛素血症 | 第39页 |
1.4.2 “IGT肾病”与分子标志物 | 第39-43页 |
1.5 小结 | 第43-44页 |
二、尿液microRNA在“IGT肾病”中的变化 | 第44-55页 |
2.1 对象和材料 | 第44-45页 |
2.1.1 研究对象 | 第44页 |
2.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
2.1.3 主要仪器 | 第45页 |
2.2 实验方法 | 第45-46页 |
2.2.1 尿液RNA提取 | 第45-46页 |
2.2.2 芯片检测 | 第46页 |
2.2.3 差异microRNA验证 | 第46页 |
2.3 实验结果 | 第46-50页 |
2.3.1 差异microRNA | 第46-48页 |
2.3.2 差异microRNA相关信号通路 | 第48-49页 |
2.3.3 mir-7977、mir-5100的验证 | 第49-50页 |
2.4 讨论 | 第50-53页 |
2.4.1 差异microRNA的可能作用机制 | 第50-51页 |
2.4.2 差异microRNA可能参与的信号通路 | 第51-53页 |
2.4.3 差异microRNA的验证 | 第53页 |
2.5 小结 | 第53-55页 |
三、mir-7977通过SIRT3/SOD2/ROS信号通路参与“IGT肾病”机制探讨 | 第55-81页 |
3.1 对象和材料 | 第55-58页 |
3.1.1 研究对象 | 第55页 |
3.1.2 主要器材 | 第55-56页 |
3.1.3 主要试剂 | 第56-57页 |
3.1.4 溶液配制 | 第57-58页 |
3.2 实验方法 | 第58-68页 |
3.2.1 细胞培养 | 第58-59页 |
3.2.2 T-PCR法检测mir-7977、SIRT3和Cubilin mRNA水平 | 第59-61页 |
3.2.3 Western Blot法检测SIRT3、Ac-SOD2、SOD2、Cubilin的蛋白表达 | 第61-66页 |
3.2.4 免疫荧光法检测蛋白表达 | 第66-67页 |
3.2.5 HK-2细胞对TRITC-albumin的摄取 | 第67页 |
3.2.6 活性氧的测定 | 第67页 |
3.2.7 细胞转染(以六孔板中的一个孔为例) | 第67-68页 |
3.2.8 双荧光素酶报告实验 | 第68页 |
3.3 实验结果 | 第68-78页 |
3.3.1 高胰岛素通过mir-7977/SIRT3对细胞氧化应激水平的影响 | 第68-70页 |
3.3.2 高胰岛素对细胞Cubilin的表达及白蛋白内吞作用的影响 | 第70-72页 |
3.3.3 过表达和抑制mir-7977对SIRT3及氧化应激的影响 | 第72-75页 |
3.3.4 双荧光素酶报告验证mir-7977对SIRT3的直接调控作用 | 第75-76页 |
3.3.5 SIRT3对Cubilin的表达及白蛋白内吞的影响 | 第76-78页 |
3.4 讨论 | 第78-80页 |
3.4.1 SIRT3与氧化应激 | 第78-79页 |
3.4.2 氧化应激与高胰岛素血症 | 第79-80页 |
3.4.3 Cubilin与白蛋白重吸收 | 第80页 |
3.5 小结 | 第80-81页 |
结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-90页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第90-91页 |
综述 | 第91-103页 |
综述参考文献 | 第97-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
个人简历 | 第104页 |