摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 骨关节炎概述 | 第12页 |
1.2 兽医临床骨关节炎常见病因 | 第12-13页 |
1.3 骨关节炎指标变化 | 第13-14页 |
1.4 骨关节炎病理变化 | 第14-16页 |
1.5 骨关节炎的治疗进展 | 第16-18页 |
1.5.1 西医治疗骨关节炎 | 第17页 |
1.5.2 中医治疗骨关节炎 | 第17-18页 |
1.6 大黄素对软骨的保护作用 | 第18-19页 |
1.7 研究目的与意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-32页 |
2.1 实验动物 | 第20页 |
2.2 实验仪器及设备 | 第20页 |
2.3 实验试剂与耗材 | 第20-22页 |
2.4 主要试剂配制 | 第22-23页 |
2.4.1 在体实验试剂配制 | 第22-23页 |
2.4.2 离体实验试剂配制 | 第23页 |
2.5 实验设计 | 第23-24页 |
2.5.1 在体实验设计 | 第23-24页 |
2.5.2 离体实验设计 | 第24页 |
2.6 在体实验方法 | 第24-27页 |
2.6.1 大鼠骨关节炎造模 | 第24页 |
2.6.2 石蜡组织切片的制作 | 第24-25页 |
2.6.3 苏木精-伊红(HE)染色 | 第25页 |
2.6.4 番红O固绿染色 | 第25-26页 |
2.6.5 免疫组化 | 第26页 |
2.6.6 大鼠血清与软骨组织的提取与测定 | 第26页 |
2.6.7 软骨组织中NO含量和iNOs活力的测定 | 第26-27页 |
2.6.8 血清中COX-2和PGE2含量的测定 | 第27页 |
2.7 离体实验方法 | 第27-31页 |
2.7.1 软骨细胞分离与培养 | 第27-28页 |
2.7.2 软骨细胞的鉴定 | 第28页 |
2.7.3 大黄素对软骨细胞活力的影响的检测 | 第28-29页 |
2.7.4 软骨细胞RNA的提取及反转录 | 第29页 |
2.7.5 实时荧光定量PCR比较软骨细胞MMP-3、MMP-13和ADAMTS-4表达的变化 | 第29-30页 |
2.7.6 软骨细胞蛋白提取 | 第30页 |
2.7.7 细胞总蛋白浓度测定 | 第30页 |
2.7.8 Western Blot法测定软骨细胞中MMP-3、MMP-13和ADAMTS-4含量的变化 | 第30-31页 |
2.7.9 软骨细胞分泌物中NO含量和iNOs活力的测定 | 第31页 |
2.7.10 软骨细胞分泌物中COX-2和PGE2含量的测定 | 第31页 |
2.8 临床实验 | 第31页 |
2.9 数据统计分析 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-51页 |
3.1 在体实验结果 | 第32-43页 |
3.1.1 动物模型 | 第32页 |
3.1.2 造模结果 | 第32-33页 |
3.1.3 HE染色结果 | 第33-35页 |
3.1.4 软骨番红O固绿染色 | 第35-37页 |
3.1.5 免疫组化 | 第37-40页 |
3.1.6 六组软骨组织中iNOs活力和NO含量的的变化 | 第40-42页 |
3.1.7 六组血清中COX-2和PGE2含量的变化 | 第42-43页 |
3.2 离体实验结果 | 第43-50页 |
3.2.1 软骨细胞分离培养 | 第43-44页 |
3.2.2 软骨细胞的鉴定 | 第44-45页 |
3.2.3 大黄素对软骨细胞活力的影响 | 第45-46页 |
3.2.4 大黄素对软骨细胞MMP-3、MMP-13和ADAMTS-4表达的影响 | 第46-47页 |
3.2.5 细胞分泌物中NO含量和iNOs活力的测定 | 第47-48页 |
3.2.6 细胞分泌物中COX-2和PGE2含量的测定 | 第48-50页 |
3.3 临床实验 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
4.1 大黄素对骨关节炎软骨病理变化的影响 | 第51-52页 |
4.2 大黄素对iNOs和NO的影响 | 第52-53页 |
4.3 大黄素对COX-2和PGE2的影响 | 第53页 |
4.4 大黄素对MMP-3、MMP-13等基质金属蛋白酶的影响 | 第53-54页 |
4.5 大黄素对ADAMTS-4等聚蛋白多糖酶的影响 | 第54页 |
4.6 大黄素对临床骨关节炎效果的评价 | 第54-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63页 |