| 缩略词表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 引 言 | 第11-12页 |
| 第一部分 DNA甲基化修饰在卵巢功能不全中的研究 | 第12-52页 |
| 1.1 前言 | 第13-15页 |
| 1.2 材料 | 第15-18页 |
| 1.2.1 研究对象 | 第15-17页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第17页 |
| 1.2.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.2.4 生物信息数据库及辅助分析软件 | 第18页 |
| 1.3 方法 | 第18-25页 |
| 1.3.1 卵泡液中颗粒细胞的分离及颗粒细胞的分选 | 第18-19页 |
| 1.3.2 分选后的颗粒细胞DNA和RNA的提取 | 第19-20页 |
| 1.3.3 甲基化WGBS文库制备及质控 | 第20-21页 |
| 1.3.4 测序及结果分析 | 第21-23页 |
| 1.3.5 差异甲基化基因的基因表达验证 | 第23-25页 |
| 1.4 结果 | 第25-43页 |
| 1.4.1 流式分选人颗粒细胞提取DNA/RNA质量评估 | 第25-26页 |
| 1.4.2 测序原始数据分析 | 第26-28页 |
| 1.4.3 数据质量值分布 | 第28页 |
| 1.4.4 测序深度和覆盖度 | 第28-30页 |
| 1.4.5 甲基化分布趋势 | 第30-32页 |
| 1.4.6 碱基偏好性 | 第32-33页 |
| 1.4.7 样品甲基化水平分布 | 第33-34页 |
| 1.4.8 差异甲基化分析 | 第34-35页 |
| 1.4.9 GO相KEGG分析 | 第35-41页 |
| 1.4.10 差异甲基化基因的表达差异分析 | 第41-43页 |
| 1.5 小结 | 第43-44页 |
| 1.6 讨论 | 第44-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 第二部分 脂肪酸结合蛋白3在卵巢功能不全中的功能研究 | 第52-99页 |
| 2.1 前言 | 第53-55页 |
| 2.2 材料 | 第55-57页 |
| 2.2.1 研究对象 | 第55页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第55-56页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第56-57页 |
| 2.3 方法 | 第57-78页 |
| 2.3.1 KGN细胞的培养 | 第57-58页 |
| 2.3.2 FABPs基因在KGN细胞上的表达分析 | 第58-60页 |
| 2.3.3 KGN细胞中FABP3免疫荧光分析 | 第60页 |
| 2.3.4 人卵巢组织中FABP3免疫组化分析 | 第60-61页 |
| 2.3.5 Crispr-cas9敲除FABP3基因及其鉴定 | 第61-66页 |
| 2.3.6 FABP3基因敲除细胞系的鉴定 | 第66-67页 |
| 2.3.7 实时无标记细胞检测(RTCA) | 第67-68页 |
| 2.3.8 促卵泡刺激素刺激实验 | 第68-69页 |
| 2.3.9 FABP3基因敲除KGN细胞系CYP19A1检测 | 第69-70页 |
| 2.3.10 DNA pull down实验和质谱检测 | 第70-74页 |
| 2.3.11 NF-κB信号通路调控CYP19A1表达的相关蛋白的检测 | 第74页 |
| 2.3.12 基因敲除KGN细胞系游离脂肪酸测定 | 第74-75页 |
| 2.3.13 过表达过氧化物酶增殖受体α(PPARα)KGN细胞系的构建、鉴定和检测 | 第75-78页 |
| 2.4 结果 | 第78-90页 |
| 2.4.1 FABPs家族基因在KGN细胞上的表达 | 第78-79页 |
| 2.4.2 FABP3广泛分布在KGN细胞的胞质中 | 第79页 |
| 2.4.3 FABP3存在与不同时期的卵泡颗粒细胞中 | 第79-80页 |
| 2.4.4 FABP3基因敲除KGN细胞的鉴定结果 | 第80页 |
| 2.4.5 FABP3基因敲除KGN细胞增殖能力降低 | 第80-81页 |
| 2.4.6 FSH刺激试验作用条件的选择 | 第81-82页 |
| 2.4.7 FSH刺激实验中雌二醇的变化 | 第82-83页 |
| 2.4.8 芳香化酶基因(CYP19A1)表达情况分析结果 | 第83页 |
| 2.4.9 CYP19A1 PII启动子与NF-κB蛋白相结合 | 第83-86页 |
| 2.4.10 NF-κB信号通路调控CYP19A1基因的表达 | 第86页 |
| 2.4.11 FABP3基因敲除KGN细胞中游离脂肪酸上调 | 第86-87页 |
| 2.4.12 过表达PPAR α基因KGN细胞表型模拟FABP3基因敲除KGN细胞 | 第87-90页 |
| 2.5 小结 | 第90-91页 |
| 2.6 讨论 | 第91-95页 |
| 参考文献 | 第95-99页 |
| 综述 | 第99-114页 |
| 参考文献 | 第107-114页 |
| 附录1 | 第114-115页 |
| 附录2 | 第115-116页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
