| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 本论文主要专用术语注释表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-35页 |
| 1.1 引言 | 第15-16页 |
| 1.2 干细胞与再生医学 | 第16-21页 |
| 1.2.1 干细胞的定义和分类 | 第16-17页 |
| 1.2.2 间充质干细胞 | 第17-19页 |
| 1.2.3 MSCs与细胞外基质的相互作用 | 第19-20页 |
| 1.2.4 应用MSCs治疗的临床试验现状 | 第20-21页 |
| 1.3 纳米技术在干细胞生物学研究中的应用 | 第21-27页 |
| 1.3.1 纳米技术用于干细胞的标记与示踪 | 第22-23页 |
| 1.3.2 纳米图案化基底用于调控干细胞命运 | 第23-25页 |
| 1.3.3 纳米图案化基底调控干细胞命运的机制 | 第25-27页 |
| 1.4 纳米材料的干细胞生物效应及研究方法 | 第27-32页 |
| 1.4.1 纳米材料对干细胞的生物效应 | 第27-30页 |
| 1.4.2 研究纳米材料的干细胞生物效应常用方法 | 第30-31页 |
| 1.4.3 组学应用于纳米材料生物效应研究进展 | 第31-32页 |
| 1.5 本论文的选题背景及研究内容 | 第32-35页 |
| 第二章 氧化铁纳米颗粒对间充质干细胞作用的初步研究 | 第35-49页 |
| 2.1 引言 | 第35-36页 |
| 2.2 实验部分 | 第36-41页 |
| 2.2.1 主要实验试剂与仪器 | 第36-38页 |
| 2.2.2 共沉淀法合成氧化铁纳米颗粒与表征 | 第38-39页 |
| 2.2.3 间充质干细胞的培养 | 第39页 |
| 2.2.4 间充质干细胞摄取氧化铁纳米颗粒含量的测定 | 第39-40页 |
| 2.2.5 细胞内氧化铁颗粒的定位检测 | 第40页 |
| 2.2.6 细胞活力测定 | 第40-41页 |
| 2.2.7 乳酸脱氢酶释放测定 | 第41页 |
| 2.2.8 细胞凋亡测定 | 第41页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第41页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第41-48页 |
| 2.3.1 共沉淀法制备氧化铁纳米颗粒及其表征 | 第41-43页 |
| 2.3.2 MSCs对氧化铁纳米颗粒的摄入 | 第43-44页 |
| 2.3.3 氧化铁纳米颗粒在MSCs内的定位 | 第44-46页 |
| 2.3.4 氧化铁纳米颗粒对MSCs活性的影响 | 第46页 |
| 2.3.5 氧化铁纳米颗粒对MSCs的长时毒性评价 | 第46-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第三章 氧化铁纳米颗粒激活MAPK信号通路协助促进间充质干细胞成骨分化 | 第49-71页 |
| 3.1 引言 | 第49-50页 |
| 3.2 实验部分 | 第50-59页 |
| 3.2.1 主要实验试剂、仪器与软件数据库 | 第50-53页 |
| 3.2.2 总RNA提取 | 第53页 |
| 3.2.3 线性扩增技术制备芯片样品 | 第53-55页 |
| 3.2.4 基因芯片与数据提取 | 第55-56页 |
| 3.2.5 DAVID分析 | 第56页 |
| 3.2.6 碱性磷酸酶活性测定 | 第56页 |
| 3.2.7 细胞外骨基质染色 | 第56页 |
| 3.2.8 扫描电子显微镜观测细胞形貌 | 第56-57页 |
| 3.2.9 荧光定量PCR | 第57页 |
| 3.2.10 免疫印迹实验 | 第57-59页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第59页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第59-69页 |
| 3.3.1 氧化铁纳米颗粒作用细胞后mRNA表达谱差异分析 | 第59-60页 |
| 3.3.2 mRNA表达谱差异的基因功能注释 | 第60-62页 |
| 3.3.3 氧化铁纳米颗粒促进MSCs成骨分化检测 | 第62-65页 |
| 3.3.4 氧化铁纳米颗粒激活MAPK信号通路协助促进MSCs成骨分化 | 第65-69页 |
| 3.4 本章小结 | 第69-71页 |
| 第四章 LncRNAs调控氧化铁纳米颗粒协助促进的成骨分化机制研究 | 第71-91页 |
| 4.1 引言 | 第71-72页 |
| 4.2 实验部分 | 第72-76页 |
| 4.2.1 主要实验试剂、仪器与软件数据库 | 第72-74页 |
| 4.2.2 LncRNA芯片与数据分析 | 第74页 |
| 4.2.3 细胞核与胞浆RNA的分离与提取 | 第74页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR | 第74-75页 |
| 4.2.5 RNA干扰实验 | 第75页 |
| 4.2.6 免疫印迹 | 第75页 |
| 4.2.7 间充质干细胞成骨分化检测 | 第75页 |
| 4.2.8 反转录PCR | 第75-76页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第76页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第76-90页 |
| 4.3.1 氧化铁纳米颗粒协助促进MSCs成骨分化过程中LncRNA表达谱的变化 | 第76-79页 |
| 4.3.2 LncRNAs参与调控氧化铁纳米颗粒协助促进MSCs成骨分化的可能途径 | 第79-82页 |
| 4.3.3 LncRNAINZEB2的序列比对与表达检测 | 第82-84页 |
| 4.3.4 INZEB2对氧化铁纳米颗粒协助促进的成骨分化至关重要 | 第84-85页 |
| 4.3.5 ZEB2参与INZEB2对氧化铁纳米颗粒促成骨分化效应的调控 | 第85-86页 |
| 4.3.6 INZEB2影响ZEB2pre-mRNA的可变剪切 | 第86-90页 |
| 4.4 本章小结 | 第90-91页 |
| 第五章 磁刺激在氧化铁纳米颗粒协助促进的成骨分化中的作用研究 | 第91-111页 |
| 5.1 引言 | 第91-92页 |
| 5.2 实验部分 | 第92-98页 |
| 5.2.1 主要实验试剂、仪器与软件数据库 | 第92-94页 |
| 5.2.2 细胞培养静磁场加载装置的设计与磁感应强度模拟 | 第94-95页 |
| 5.2.3 间充质干细胞摄取氧化铁纳米颗粒含量的测定 | 第95页 |
| 5.2.4 氧化铁纳米颗粒细胞毒性的测定 | 第95页 |
| 5.2.5 间充质干细胞成骨分化检测 | 第95页 |
| 5.2.6 氧化铁纳米颗粒的制备与表征 | 第95-96页 |
| 5.2.7 RNA干扰实验 | 第96页 |
| 5.2.8 免疫印迹 | 第96页 |
| 5.2.9 蛋白质组学 | 第96-97页 |
| 5.2.10 原子力显微镜测量细胞弹性模量 | 第97页 |
| 5.2.11 免疫荧光染色 | 第97页 |
| 5.2.12 统计学分析 | 第97-98页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第98-109页 |
| 5.3.1 细胞培养静磁场加载装置磁场模拟与测量 | 第98-99页 |
| 5.3.2 静磁场加载可增强氧化铁纳米颗粒协助促进的MSCs成骨分化 | 第99-101页 |
| 5.3.3 氧化铁纳米颗粒协助促进的MSCs成骨分化与其自身磁性相关 | 第101-103页 |
| 5.3.4 磁受体蛋白复合物对于磁刺激促进的MSCs成骨分化不可或缺 | 第103-104页 |
| 5.3.5 蛋白质组学定量分析磁刺激对MSCs蛋白质组的影响 | 第104-107页 |
| 5.3.6 磁刺激对MSCs细胞力学的影响 | 第107-109页 |
| 5.4 本章小结 | 第109-111页 |
| 第六章 总结与展望 | 第111-115页 |
| 6.1 总结 | 第111-113页 |
| 6.2 展望 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-131页 |
| 附表 | 第131-147页 |
| 攻读博士期间的学术成果 | 第147-149页 |
| 致谢 | 第149页 |
