| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 乳腺癌 | 第12-13页 |
| 1.1.1 乳腺癌简介 | 第12页 |
| 1.1.2 乳腺癌的流行现状和趋势 | 第12-13页 |
| 1.2 MERIT40与乳腺癌 | 第13-17页 |
| 1.2.1 MERIT40的简介 | 第13页 |
| 1.2.2 MERIT40的结构 | 第13-15页 |
| 1.2.3 MERIT40的功能 | 第15-17页 |
| 1.2.4 MERIT40与乳腺癌的关系 | 第17页 |
| 1.3 磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH) | 第17-25页 |
| 1.3.1 PHGDH简介 | 第17-18页 |
| 1.3.2 PHGDH的结构 | 第18-21页 |
| 1.3.3 PHGDH的调控 | 第21-24页 |
| 1.3.4 PHGDH与肿瘤的关系 | 第24-25页 |
| 1.4 立题背景 | 第25-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-45页 |
| 2.1 DNA相关实验 | 第26-33页 |
| 2.1.1 表达质粒的构建 | 第26-27页 |
| 2.1.2 干扰RNA表达质粒的构建 | 第27-28页 |
| 2.1.3 DNA片段的纯化 | 第28-29页 |
| 2.1.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| 2.1.5 质粒DNA的提取 | 第30-33页 |
| 2.2 细胞相关实验 | 第33-37页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第33-34页 |
| 2.2.2 瞬时转染 | 第34页 |
| 2.2.3 慢病毒包装 | 第34页 |
| 2.2.4 慢病毒转染 | 第34-35页 |
| 2.2.5 细胞存活曲线测定 | 第35页 |
| 2.2.6 基质胶侵袭实验 | 第35-36页 |
| 2.2.7 细胞死亡检测 | 第36-37页 |
| 2.3 蛋白质相关实验方法 | 第37-42页 |
| 2.3.1 蛋白质的表达和纯化 | 第37-38页 |
| 2.3.2 免疫共沉淀 | 第38-40页 |
| 2.3.3 蛋白酶活的测定 | 第40页 |
| 2.3.4 蛋白质的SDS-PAGE电泳与western blot | 第40-41页 |
| 2.3.5 考马斯亮蓝染色 | 第41-42页 |
| 2.4 抗体和试剂 | 第42-43页 |
| 2.5 实验仪器 | 第43页 |
| 2.6 免疫缺陷鼠肿瘤移植实验 | 第43-44页 |
| 2.7 统计分析 | 第44-45页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第45-64页 |
| 3.1 结果 | 第45-62页 |
| 3.1.1 酶活测量体系的构建 | 第45-50页 |
| 3.1.2 MERIT40增强PHGDH的酶活 | 第50-57页 |
| 3.1.3 MERIT40增强了肿瘤细胞抵抗葡萄糖饥饿环境的能力 | 第57-60页 |
| 3.1.4 敲低MERIT40抑制小鼠乳腺原位移植瘤的生长 | 第60-62页 |
| 3.2 讨论 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 图表索引 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
