摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-22页 |
1. 梅毒的概述 | 第14-17页 |
1.1 梅毒的流行现状 | 第14页 |
1.2 梅毒螺旋体的生物学特点 | 第14-16页 |
1.3 梅毒螺旋体的侵袭性和感染机制 | 第16页 |
1.4 梅毒的临床分期 | 第16-17页 |
2. P2X7受体和NLRP3炎症复合体的概述 | 第17-22页 |
2.1 NLRP3炎症复合体 | 第17-18页 |
2.2 P2X7受体 | 第18-19页 |
2.3 P2X7受体与NLRP3炎症复合体的抗感染免疫 | 第19-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-40页 |
1. 实验材料 | 第22-26页 |
1.1 研究对象 | 第22页 |
1.2 主要试剂 | 第22-24页 |
1.3 实验主要仪器 | 第24页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第24-26页 |
2. 实验方法 | 第26-40页 |
2.1 细胞培养与传代 | 第26-27页 |
2.2 Tp感染THP-1来源巨噬细胞模型的建立 | 第27-30页 |
2.3 荧光定量PCR方法检测细胞因子mRNA水平表达量 | 第30-34页 |
2.4 Western blot检测蛋白分子的表达量 | 第34-37页 |
2.5 ELISA检测细胞上清液中细胞因子的表达量 | 第37-38页 |
2.6 免疫荧光观察巨噬细胞表面P2X7R的表达情况 | 第38页 |
2.7 细胞转染 | 第38-39页 |
2.8 统计学处理 | 第39-40页 |
第三章 实验结果 | 第40-64页 |
1. Tp的传代及观察 | 第40-41页 |
1.1 兔睾丸组织接种Tp后的炎症情况 | 第40页 |
1.2 暗视野显微镜观察Tp | 第40-41页 |
2. Tp诱导IL-1β分泌与表达 | 第41-45页 |
2.1 不同浓度Tp刺激THP-1来源的巨噬细胞产生IL-1β | 第41-43页 |
2.2 检测不同时间段Tp刺激THP-1来源的巨噬细胞产生IL-1β | 第43-45页 |
3. Tp诱导成熟IL-1β的分泌过程中NLRP3炎症复合体的活化 | 第45-50页 |
3.1 Tp刺激巨噬细胞后能活化NLRP3炎症复合体 | 第45-47页 |
3.2 siRNA对NLRP3炎症复合体的活化及IL-1β的分泌的影响 | 第47-50页 |
4. Tp经P2X7受体诱导NLRP3复合体的活化并分泌成熟IL-1β | 第50-57页 |
4.1 免疫荧光观察Tp刺激THP-1来源的巨噬细胞活化P2X7受体的表达情况 | 第50-51页 |
4.2 RT-PCR检测Tp刺激THP-1来源的巨噬细胞活化P2X7受体的表达情况 | 第51页 |
4.3 P2X7受体激动剂ATP对NLRP3炎症复合体的活化的影响 | 第51-54页 |
4.4 P2X7受体抑制剂A438079对NLRP3炎症复合体的活化的影响 | 第54-57页 |
5. 干扰RNA对Tp经由P2X7受体诱导NLRP3复合体的活化的影响 | 第57-60页 |
5.1 P2X7R-siRNA对THP-1来源的巨噬细胞P2X7R,NLRP3,caspase-1和IL-1β mRNA表达的影响 | 第57-58页 |
5.2 ELISA检测P2X7R-siRNA处理后对Tp诱导THP-1细胞产生IL-1β的影响 | 第58-59页 |
5.3 Western blot检测P2X7R-siRNA处理后对Tp诱导THP-1细胞表达P2X7R,NLRP3,caspase-1和IL-1β蛋白的影响 | 第59-60页 |
6. K离子外流途径对Tp经P2X7受体诱导NLRP3复合体的活化的影响 | 第60-64页 |
6.1 K离子对THP-1来源的巨噬细胞P2X7R,NLRP3,caspase-1和IL-1βmRNA表达的影响 | 第60-61页 |
6.2 ELISA检测K离子预处理对Tp诱导THP-1细胞产生IL-1β的影响 | 第61-62页 |
6.3 Western blot检测K离子预处理对Tp诱导THP-1细胞表达P2X7R,NLRP3,caspase-1和IL-1β蛋白的影响 | 第62-64页 |
第四章 讨论 | 第64-70页 |
1. IL-1β在机体免疫中的作用 | 第64页 |
2. Tp诱导IL-1β的分泌依赖NLRP3炎症复合体的活化 | 第64-65页 |
3. Tp经P2X7受体激活NLRP3炎症复合体 | 第65-66页 |
4. P2X7受体在梅毒感染中的作用 | 第66-67页 |
5. 总结与展望 | 第67-70页 |
第五章 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第78页 |