| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第16-41页 |
| 1.1 分子文库展示技术 | 第16-19页 |
| 1.1.1 分子文库展示技术的意义 | 第16-17页 |
| 1.1.2 分子文库展示技术 | 第17-19页 |
| 1.2 噬菌体展示系统及其应用 | 第19-31页 |
| 1.2.1 噬菌体展示简介 | 第19页 |
| 1.2.2 噬菌体展示系统 | 第19-23页 |
| 1.2.3 噬菌体展示技术在生物医学中的应用 | 第23-31页 |
| 1.3 基于微流控的噬菌体展示技术 | 第31-40页 |
| 1.3.1 微流控简介 | 第31-35页 |
| 1.3.2 微流控在噬菌体展示中的意义 | 第35-36页 |
| 1.3.3 微流控在噬菌体展示中的应用 | 第36-40页 |
| 1.4 论文的研究目的及主要设想 | 第40-41页 |
| 第二章 CD71特异性多肽的筛选 | 第41-57页 |
| 2.1 引言 | 第41-42页 |
| 2.2 实验部分 | 第42-48页 |
| 2.2.1 仪器、材料和试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.2 噬菌体筛选流程 | 第43-46页 |
| 2.2.3 噬菌体滴度的测定 | 第46页 |
| 2.2.4 噬菌体文库的富集 | 第46-47页 |
| 2.2.5 噬菌体单克隆的挑取和结合力验证 | 第47页 |
| 2.2.6 噬菌体克隆的DNA提取及序列分析 | 第47页 |
| 2.2.7 多肽的表征 | 第47-48页 |
| 2.2.8 siRNA沉默肿瘤细胞CD71的表达 | 第48页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第48-56页 |
| 2.3.1 噬菌体文库的富集情况 | 第48页 |
| 2.3.2 噬菌体单克隆的结合力表征 | 第48-49页 |
| 2.3.3 测序结果及分析 | 第49-50页 |
| 2.3.4 多肽与CD71的亲和能力分析 | 第50-51页 |
| 2.3.5 多肽与肿瘤细胞的结合能力分析 | 第51-53页 |
| 2.3.6 肿瘤细胞对多肽的内吞情况考察 | 第53-54页 |
| 2.3.7 多肽的特异性考察 | 第54-55页 |
| 2.3.8 多肽Y1的竞争实验 | 第55-56页 |
| 2.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第三章 c-Met亲和多肽的筛选 | 第57-69页 |
| 3.1 引言 | 第57-58页 |
| 3.2 实验部分 | 第58-62页 |
| 3.2.1 仪器、材料和试剂 | 第58-60页 |
| 3.2.2 噬菌体筛选流程 | 第60页 |
| 3.2.3 噬菌体滴度的测定 | 第60-61页 |
| 3.2.4 噬菌体单克隆的挑取和结合力验证 | 第61页 |
| 3.2.5 噬菌体克隆的DNA提取及序列分析 | 第61-62页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第62-68页 |
| 3.3.1 噬菌体文库的富集情况 | 第62页 |
| 3.3.2 噬菌体单克隆的结合力表征 | 第62-63页 |
| 3.3.3 基因测序及翻译 | 第63-64页 |
| 3.3.4 多肽与c-Met的结合能力考察 | 第64-65页 |
| 3.3.5 多肽对c-Met蛋白亲和能力的考察 | 第65-66页 |
| 3.3.6 温度和时间对多肽L28结合能力的影响 | 第66页 |
| 3.3.7 多肽与肿瘤细胞的结合能力分析 | 第66-68页 |
| 3.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第四章 基于液滴微流控的噬菌体展示技术 | 第69-85页 |
| 4.1 引言 | 第69-71页 |
| 4.2 实验部分 | 第71-76页 |
| 4.2.1 仪器、材料和试剂 | 第71-72页 |
| 4.2.2 微流控芯片的制作流程 | 第72-74页 |
| 4.2.3 液滴生成芯片的结构 | 第74-75页 |
| 4.2.4 液滴中大肠杆菌ER2738的生长情况考察 | 第75页 |
| 4.2.5 噬菌体滴度测定 | 第75-76页 |
| 4.2.6 基于液滴微流控的噬菌体展示筛选过程 | 第76页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第76-83页 |
| 4.3.1 液滴微流控芯片的设计 | 第76-77页 |
| 4.3.2 可行性验证 | 第77-79页 |
| 4.3.3 阳性噬菌体单克隆的挑取 | 第79-80页 |
| 4.3.4 单克隆测序及其序列分析 | 第80-81页 |
| 4.3.5 多肽对CD71结合能力的考察 | 第81-83页 |
| 4.3.6 多肽与肿瘤细胞的结合能力分析 | 第83页 |
| 4.4 本章小结 | 第83-85页 |
| 第五章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 5.1 结论 | 第85页 |
| 5.2 展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-94页 |
| 作者攻读硕士期间发表论文 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |