摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-21页 |
1.1 选择性剪接研究进展 | 第9-14页 |
1.1.1 选择性剪接的重要性和普遍性 | 第9-11页 |
1.1.2 选择性剪接的分子机制 | 第11-13页 |
1.1.3 选择性剪接的调控机理 | 第13-14页 |
1.1.4 选择性剪接与植物抗逆 | 第14页 |
1.2 剪接因子SR蛋白家族研究进展 | 第14-17页 |
1.3 本研究使用的主要技术 | 第17-20页 |
1.3.1 RT-PCR技术 | 第17页 |
1.3.2 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术 | 第17-18页 |
1.3.3 Gateway技术 | 第18-20页 |
1.4 本研究目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株 | 第21页 |
2.1.3 载体 | 第21页 |
2.1.4 酶和试剂 | 第21页 |
2.1.5 实验仪器 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-31页 |
2.2.1 木薯快繁 | 第22页 |
2.2.2 胁迫和植物激素处理 | 第22页 |
2.2.3 木薯总RNA提取(Trizol法) | 第22页 |
2.2.4 CTAB法提取木薯基因组DNA | 第22-23页 |
2.2.5 RNA反转录成cDNA(Takara RR047A试剂盒) | 第23页 |
2.2.6 木薯SR蛋白家族基因表达模式分析 | 第23-26页 |
2.2.7 目的片段的克隆及Gateway载体构建 | 第26-29页 |
2.2.8 载体转化农杆菌 | 第29-30页 |
2.2.9 烟草注射与亚细胞定位 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-50页 |
3.1 木薯SR蛋白基因的生物信息学分析 | 第31-39页 |
3.1.1 进化树分析 | 第31-32页 |
3.1.2 氨基酸序列多重比对分析 | 第32-34页 |
3.1.3 蛋白结构域分析 | 第34-35页 |
3.1.4 蛋白理化性质分析 | 第35页 |
3.1.5 木薯SR基因结构及进化分析 | 第35-36页 |
3.1.6 启动子顺式作用元件预测分析 | 第36-39页 |
3.2 木薯总RNA的提取及反转录成cDNA | 第39-40页 |
3.3 木薯SR蛋白基因的组织特异性表达和选择性剪接 | 第40-41页 |
3.4 非生物胁迫对木薯SR基因表达和选择性剪接的影响 | 第41-44页 |
3.5 MeSR基因的克隆及Gateway载体构建 | 第44-45页 |
3.5.1 目的基因的克隆 | 第44页 |
3.5.2 Gateway入门载体构建 | 第44-45页 |
3.5.3 Gateway表达载体构建 | 第45页 |
3.6 重组质粒转化农杆菌 | 第45-46页 |
3.7 木薯SR蛋白亚细胞定位 | 第46-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
缩略词表 | 第58-60页 |
附录 | 第60-64页 |
1 培养基及溶液配方 | 第60-62页 |
2 载体图 | 第62-64页 |
作者简历 | 第64页 |
发表文章情况 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |