| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第15-23页 |
| 1.1 肝细胞癌 | 第15页 |
| 1.2 MSCs | 第15-17页 |
| 1.2.1 MSCs概述 | 第15-16页 |
| 1.2.2 MSCs对肿瘤细胞的抑制作用 | 第16-17页 |
| 1.3 三维细胞培养技术 | 第17-22页 |
| 1.3.1 三维细胞培养技术概述 | 第17-18页 |
| 1.3.2 三维细胞培养技术的优点 | 第18-19页 |
| 1.3.3 三维细胞培养技术的支架材料 | 第19-21页 |
| 1.3.4 三维细胞培养技术在MSCs中的应用 | 第21-22页 |
| 1.4 技术路线 | 第22-23页 |
| 2 实验材料 | 第23-28页 |
| 2.1 细胞株及细胞培养所用培养基 | 第23页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第23页 |
| 2.1.2 细胞培养所用培养基 | 第23页 |
| 2.2 主要试剂和试剂盒 | 第23-25页 |
| 2.3 实验动物 | 第25页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.5 实验耗材 | 第26-28页 |
| 3 实验方法 | 第28-42页 |
| 3.1 MSCs的三维和二维培养 | 第28-29页 |
| 3.1.1 MSCs的二维培养 | 第28-29页 |
| 3.1.2 MSCs的三维培养 | 第29页 |
| 3.2 三维和二维培养MSCs的活力检测 | 第29-30页 |
| 3.2.1 AO/PI染色 | 第29-30页 |
| 3.2.2 三维和二维培养MSCs的增殖情况 | 第30页 |
| 3.3 透射电镜检测三维和二维培养MSCs的亚细胞结构 | 第30页 |
| 3.4 HepG2和HEK293细胞的培养 | 第30-32页 |
| 3.4.1 HepG2和HEK293的复苏 | 第30-31页 |
| 3.4.2 HepG2和HEK293的传代 | 第31页 |
| 3.4.3 HepG2和HEK293的冻存 | 第31-32页 |
| 3.5 MSCs对HepG2细胞增殖能力的影响 | 第32-34页 |
| 3.5.1 MSCs对HepG2细胞体外抑制效应分析 | 第32-33页 |
| 3.5.2 MSCs对HepG2细胞体内抑制效应分析 | 第33-34页 |
| 3.6 MSCs对HepG2细胞抑制作用的机制研究 | 第34-39页 |
| 3.6.1 基因表达芯片检测三维和二维培养的MSCs的基因表达情况 | 第34-35页 |
| 3.6.2 RT-PCR检测三维和二维培养的MSCs表达IL-24基因情况 | 第35-37页 |
| 3.6.3 qRT-PCR检测三维和二维培养的MSCs表达IL-24基因情况 | 第37-38页 |
| 3.6.4 ELISA检测三维和二维培养的MSCs分泌IL-24因子情况 | 第38-39页 |
| 3.7 JAK1-STAT3通路研究 | 第39-41页 |
| 3.7.1 RT-PCR检测HepG2细胞表达IL-24蛋白受体情况 | 第39页 |
| 3.7.2 Western blot检测与JAK1-STAT3信号通路有关的因子的表达 | 第39-41页 |
| 3.8 统计学分析 | 第41-42页 |
| 4 结果 | 第42-57页 |
| 4.1 三维MSCs培养体系的建立及功能检测 | 第42-45页 |
| 4.1.1 AO/PI染色法检测三维培养MSCs的活力情况 | 第42-43页 |
| 4.1.2 CCK-8法检测三维培养MSCs的增殖情况 | 第43页 |
| 4.1.3 透射电镜观察三维培养MSCs的亚细胞结构 | 第43-45页 |
| 4.2 MSCs对HepG2细胞增殖能力的影响 | 第45-48页 |
| 4.2.1 MSCs CM对HepG2细胞的体外抑制效应分析 | 第45-46页 |
| 4.2.2 MSCs CM对HepG2细胞的体内抑制效应分析 | 第46-48页 |
| 4.3 MSCs对HepG2细胞抑制作用机制的研究 | 第48-57页 |
| 4.3.1 芯片技术检测三维和二维培养的MSCs的基因表达情况 | 第48-51页 |
| 4.3.2 三维培养的MSCs中IL-24表达情况的检测 | 第51-52页 |
| 4.3.3 三维培养的MSCs分泌IL-24因子的检测 | 第52-53页 |
| 4.3.4 RT-PCR检测HepG2细胞中IL-24因子的受体表达情况 | 第53-54页 |
| 4.3.5 Western blot检测JAK-STAT信号通路相关因子的表达 | 第54-57页 |
| 5 讨论 | 第57-61页 |
| 6 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录A 主要溶液配制 | 第67-69页 |
| 1 核酸电泳缓冲液的配制 | 第67页 |
| 2 蛋白质电泳所用试剂及缓冲液的配制 | 第67页 |
| 3 细胞实验主要溶液配制 | 第67-68页 |
| 4 其它实验溶液配制 | 第68-69页 |
| 附录B 英文缩略词表 | 第69-71页 |
| 作者简历及攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第71-73页 |
| 学位论文数据集 | 第73页 |
