| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 小麦条锈病及小麦条锈菌 | 第11-12页 |
| 1.1.1 小麦条锈病的危害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 引起小麦条锈病病原真菌的研究 | 第12页 |
| 1.1.3 小麦条锈病的研究现状 | 第12页 |
| 1.2 参与病原菌侵染过程中的信号转导途径 | 第12-15页 |
| 1.2.1 真菌中与钙信号相关的CaMK及NCS国内外研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 实时定量RT-PCR技术与基因沉默技术 | 第15-16页 |
| 1.3.1 实时定量RT-PCR技术 | 第15页 |
| 1.3.2 基因沉默技术 | 第15-16页 |
| 1.4 本研究的目的意义及技术路线 | 第16-18页 |
| 1.4.1 目的意义 | 第16-17页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第17页 |
| 1.4.3 技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 小麦条锈菌基因PsCaMK的克隆与功能分析 | 第18-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-27页 |
| 2.2.1 实验材料准备 | 第18-19页 |
| 2.2.2 总RNA提取及纯化 | 第19页 |
| 2.2.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第19-20页 |
| 2.2.4 大肠杆菌JM109超级感受态细胞制备 | 第20-21页 |
| 2.2.5 小麦条锈菌钙调素依赖蛋白激酶基因PsCaMK基因的克隆 | 第21-23页 |
| 2.2.6 PsCaMK序列的生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.7 Real-time PCR检测表达趋势 | 第23-24页 |
| 2.2.8 KN-93处理小麦条锈菌夏孢子 | 第24页 |
| 2.2.9 BSMV-HIGS介导的条锈菌PsCaMK基因沉默 | 第24-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 2.3.1 小麦条锈菌总RNA的提取 | 第27页 |
| 2.3.2 PsCaMK基因的克隆 | 第27页 |
| 2.3.3 小麦条锈菌PsCaMK基因的序列分析 | 第27-28页 |
| 2.3.4 PsCaMK序列系统发育树构建 | 第28-29页 |
| 2.3.5 PsCaMK基因的实时定量RT-PCR分析 | 第29-30页 |
| 2.3.6 KN-93对小麦条锈菌夏孢子萌发的影响 | 第30-32页 |
| 2.3.7 PsCaMK的基因沉默分析 | 第32-34页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 小麦条锈菌基因PsNCS1及PsPiK1的功能分析 | 第36-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 实验材料的准备、取样 | 第36页 |
| 3.2.2 总RNA提取及第一链cDNA合成 | 第36页 |
| 3.2.3 EGTA处理小麦条锈菌夏孢子 | 第36页 |
| 3.2.4 PsNCS1开放阅读框的扩增验证 | 第36-37页 |
| 3.2.5 BSMV-HIGS介导PsNCS1与PsPiK1的基因沉默 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-44页 |
| 3.3.1 EGTA对小麦条锈菌夏孢子萌发的影响 | 第38页 |
| 3.3.2 小麦条锈菌基因PsNCS1与PsPiK1基因的克隆及序列分析 | 第38-40页 |
| 3.3.3 小麦条锈菌基因PsNCS1与PsPiK1的表达特征分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 条锈菌PsNCS1与PsPiK1的基因沉默分析 | 第41-44页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
