| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 缩略词索引表 | 第11-18页 |
| 第1章 绪论 | 第18-42页 |
| 1.1 siRNA简介 | 第18-21页 |
| 1.1.1 siRNA的定义及其作用机制 | 第18-19页 |
| 1.1.2 siRNA的优势及存在的问题 | 第19-21页 |
| 1.2 siRNA纳米递送系统 | 第21-24页 |
| 1.3 生物响应性材料 | 第24-34页 |
| 1.3.1 生物响应性材料定义及作用机制 | 第24-25页 |
| 1.3.2 生物响应性材料分类及应用 | 第25-34页 |
| 1.4 微流控技术 | 第34-40页 |
| 1.4.1 微流控技术优势及分类 | 第34-35页 |
| 1.4.2 微流控技术在纳米递送系统中的应用 | 第35-40页 |
| 1.5 本课题研究内容设计 | 第40-42页 |
| 第2章 微流控技术制备基于pH响应的靶向siRNA脂质纳米粒及其抗肿瘤研究 | 第42-62页 |
| 2.1 引言 | 第42页 |
| 2.2 仪器与材料 | 第42-44页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第42-43页 |
| 2.2.2 材料与试剂 | 第43-44页 |
| 2.2.3 细胞株 | 第44页 |
| 2.2.4 动物饲养 | 第44页 |
| 2.3 实验方法 | 第44-49页 |
| 2.3.1 MF芯片的制备 | 第44-45页 |
| 2.3.2 Tf-PEG-Chol的合成 | 第45页 |
| 2.3.3 Tf-LNPs的制备 | 第45-46页 |
| 2.3.4 Tf-LNPs性质表征 | 第46页 |
| 2.3.5 Tf-LNPs细胞毒性检测 | 第46页 |
| 2.3.6 Tf-LNPs细胞摄取的研究 | 第46-47页 |
| 2.3.7 Tf-LNPs药代动力学研究 | 第47页 |
| 2.3.8 Tf-LNPs体内分布的研究 | 第47页 |
| 2.3.9 Tf-LNPs体内抗肿瘤的研究 | 第47-48页 |
| 2.3.10 Tf-LNPs体内基因沉默效果 | 第48页 |
| 2.3.11 Tf-LNPs初步安全性评价 | 第48页 |
| 2.3.12 统计学分析 | 第48-49页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第49-60页 |
| 2.4.1 Tf-LNPs理化性质表征 | 第49-51页 |
| 2.4.2 Tf-LNPs的细胞毒性检测 | 第51页 |
| 2.4.3 Tf-LNPs纳米粒细胞摄取的研究 | 第51-54页 |
| 2.4.4 Tf-LNPs药代动力学研究 | 第54-55页 |
| 2.4.5 Tf-LNPs的体内分布的研究 | 第55-56页 |
| 2.4.6 Tf-LNPs的体内抗肿瘤的研究 | 第56-58页 |
| 2.4.7 Tf-LNPs的体内基因沉默效果 | 第58-59页 |
| 2.4.8 Tf-LNPs的初步安全性评价 | 第59-60页 |
| 2.5 本章小结 | 第60-62页 |
| 第3章 乏氧响应的高分子材料的合成及治疗靶点的生物信息学分析 | 第62-74页 |
| 3.1 引言 | 第62页 |
| 3.2 仪器与材料 | 第62-63页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第62-63页 |
| 3.2.2 材料与试剂 | 第63页 |
| 3.3 实验方法 | 第63-66页 |
| 3.3.1 NIHA的合成 | 第63-64页 |
| 3.3.2 mPEG-b-PLG的合成 | 第64-65页 |
| 3.3.3 mPEG-b-P(LG-g-NI)的合成 | 第65页 |
| 3.3.4 CDC20生物信息学分析 | 第65-66页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第66-73页 |
| 3.4.1 NIHA的结构表征 | 第66-67页 |
| 3.4.2 mPEG-b-PLG的结构表征 | 第67-68页 |
| 3.4.3 mPEG-b-P(LG-g-NI)的结构表征 | 第68-70页 |
| 3.4.4 TCGABRCA数据库分析CDC20表达 | 第70-71页 |
| 3.4.5 CDC20在乳腺癌中的预后价值 | 第71-72页 |
| 3.4.6 GSEA分析CDC20在乳腺癌中的相关通路 | 第72-73页 |
| 3.5 本章小节 | 第73-74页 |
| 第4章 乏氧响应的siRNA纳米粒的制备及抗肿瘤的研究 | 第74-106页 |
| 4.1 引言 | 第74-75页 |
| 4.2 仪器与材料 | 第75-77页 |
| 4.2.1 主要仪器 | 第75-76页 |
| 4.2.2 材料与试剂 | 第76-77页 |
| 4.2.3 细胞株 | 第77页 |
| 4.2.4 动物饲养 | 第77页 |
| 4.3 实验方法 | 第77-82页 |
| 4.3.1 HRNP的制备 | 第77页 |
| 4.3.2 siRNA包封效率测定 | 第77-78页 |
| 4.3.3 HRNP的乏氧性质表征 | 第78页 |
| 4.3.4 HRNP/siLuc的体外荧光素酶沉默及细胞毒性检测 | 第78页 |
| 4.3.5 HRNP/Cy5-siRNA的细胞摄取 | 第78-79页 |
| 4.3.6 HRNP/Cy5-siRNA的细胞分布及溶酶体逃逸 | 第79页 |
| 4.3.7 HRNP/siCDC20体外细胞增殖抑制实验 | 第79页 |
| 4.3.8 WesternBlot测定CDC20的表达 | 第79-80页 |
| 4.3.9 免疫荧光法测定CDC20的表达 | 第80页 |
| 4.3.10 HRNP/siCDC20的细胞凋亡分析 | 第80页 |
| 4.3.11 HRNP/siCDC20的细胞周期分析 | 第80-81页 |
| 4.3.12 HRNP/DY677-siRNA体内药代动力学研究 | 第81页 |
| 4.3.13 HRNP/DY677-siRNA体内生物分布研究 | 第81页 |
| 4.3.14 HRNP/siCDC20体内肿瘤抑制实验 | 第81页 |
| 4.3.15 HRNP/siCDC20的初步安全性评价 | 第81-82页 |
| 4.3.16 统计学分析 | 第82页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第82-103页 |
| 4.4.1 HRNP/siRNA理化性质表征 | 第82-84页 |
| 4.4.2 HRNP/siLuc的体外荧光素酶沉默及细胞毒性检测 | 第84-85页 |
| 4.4.3 HRNP/Cy5-siRNA在细胞内的摄取及溶酶体逃逸 | 第85-86页 |
| 4.4.4 HRNP/siCDC20的体外细胞增殖抑制实验 | 第86-87页 |
| 4.4.5 WesternBlot检测CDC20蛋白表达水平 | 第87-89页 |
| 4.4.6 HRNP/siCDC20的细胞凋亡和细胞周期分析 | 第89-91页 |
| 4.4.7 HRNP/DY677-siRNA的药代动力学和体内组织分布研究 | 第91-94页 |
| 4.4.8 HRNP/siCDC20体内肿瘤抑制实验 | 第94-95页 |
| 4.4.9 HRNP/siCDC20对肿瘤组织中CDC20蛋白表达抑制作用 | 第95-97页 |
| 4.4.10 肿瘤组织切片中的CyclinB和Mcl-1表达 | 第97-99页 |
| 4.4.11 组织切片病理学分析 | 第99-101页 |
| 4.4.12 HRNP/siCDC20的初步安全性评价 | 第101-103页 |
| 4.5 本章小结 | 第103-106页 |
| 第5章 微流控制备乏氧与酸双响应的siRNA纳米粒及其抗肿瘤研究 | 第106-122页 |
| 5.1 引言 | 第106页 |
| 5.2 仪器与材料 | 第106-108页 |
| 5.2.1 主要仪器 | 第106-107页 |
| 5.2.2 材料与试剂 | 第107-108页 |
| 5.2.3 细胞株 | 第108页 |
| 5.2.4 动物饲养 | 第108页 |
| 5.3 实验方法 | 第108-111页 |
| 5.3.1 P((LG-g-NI)-co-(LL-g-mPEGMA))的合成 | 第108页 |
| 5.3.2 hpLNP/siRNA的制备 | 第108-109页 |
| 5.3.3 hpLNP/siRNA的理化性质表征 | 第109-110页 |
| 5.3.4 hpLNP/Cy5-siRNA细胞摄取实验 | 第110页 |
| 5.3.5 hpLNP/siLuc的体外荧光素酶沉默及细胞毒性检测 | 第110页 |
| 5.3.6 hpLNP/siCDC20体外细胞增殖抑制实验 | 第110页 |
| 5.3.7 hpLNP/siCDC20的细胞凋亡分析 | 第110-111页 |
| 5.3.8 hpLNP/siCDC20体内肿瘤抑制实验 | 第111页 |
| 5.3.9 统计学分析 | 第111页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第111-119页 |
| 5.4.1 P((LG-g-NI)-co-(LL-g-mPEGMA))的合成与表征 | 第111-112页 |
| 5.4.2 hpLNP/siRNA的制备及理化性质表征 | 第112-114页 |
| 5.4.3 hpLNP/Cy5-siRNA细胞摄取实验 | 第114-115页 |
| 5.4.4 hpLNP/siLuc的体外荧光素酶沉默及细胞毒性检测 | 第115-116页 |
| 5.4.5 hpLNP/siCDC20的体外细胞增殖抑制实验 | 第116-117页 |
| 5.4.6 hpLNP/siCDC20的细胞凋亡分析 | 第117-118页 |
| 5.4.7 hpLNP/siCDC20的体内肿瘤抑制实验 | 第118-119页 |
| 5.5 本章小结 | 第119-122页 |
| 第6章 结论与展望 | 第122-124页 |
| 在学期间所取得的科研成果 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
