摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-27页 |
1.1 兔球虫的研究进展 | 第15-25页 |
1.1.1 兔球虫分类与形态学特征 | 第15-16页 |
1.1.2 兔球虫的生活史 | 第16-17页 |
1.1.3 兔球虫的致病性研究 | 第17-19页 |
1.1.4 兔艾美耳球虫的免疫原性研究 | 第19-20页 |
1.1.5 兔艾美耳球虫激发宿主产生的免疫应答特点 | 第20-21页 |
1.1.6 兔球虫的分子鉴别诊断 | 第21-22页 |
1.1.7 兔球虫病的药物治疗 | 第22-23页 |
1.1.8 兔球虫病活卵囊疫苗的研究 | 第23-24页 |
1.1.9 兔球虫免疫优势抗原的寻找及profilin蛋白的相关研究进展 | 第24-25页 |
1.2 研究目的 | 第25-26页 |
1.3 研究内容 | 第26页 |
1.3.1 对多个兔球虫虫株进行生物学特性鉴定 | 第26页 |
1.3.2 进行兔球虫病疫苗的初步研究 | 第26页 |
1.3.3 兔球虫免疫保护性抗原的寻找和免疫原性研究 | 第26页 |
1.4 研究目标 | 第26-27页 |
第二章 兔球虫原始虫株和早熟虫株的生物学特性研究 | 第27-59页 |
2.1 引言 | 第27页 |
2.2 材料 | 第27-29页 |
2.2.1 试验虫株 | 第27页 |
2.2.2 实验动物及培育方法 | 第27页 |
2.2.3 主要试剂 | 第27-28页 |
2.2.4 实验用溶液 | 第28-29页 |
2.2.5 实验设备 | 第29页 |
2.3 方法 | 第29-33页 |
2.3.1 卵囊的接种、收集与纯化 | 第29-30页 |
2.3.2 单卵囊的分离及全基因组扩增 | 第30-31页 |
2.3.3 PCR鉴定引物及反应体系 | 第31-32页 |
2.3.4 PCR产物的回收、链接转化及测序 | 第32页 |
2.3.5 兔球虫的形态学鉴定 | 第32页 |
2.3.6 兔球虫致病性及免疫原性试验设计 | 第32-33页 |
2.3.7 各虫株耐药性检测试验设计 | 第33页 |
2.3.8 数据统计 | 第33页 |
2.4 结果 | 第33-56页 |
2.4.1 大型艾美耳球虫原始株的生物学鉴定 | 第33-37页 |
2.4.2 中型艾美耳球虫原始株和早熟株生物学特性研究 | 第37-44页 |
2.4.3 肠艾美耳球虫原始株和早熟株生物学特性研究 | 第44-50页 |
2.4.4 无残艾美耳球虫生物学特性研究 | 第50-54页 |
2.4.5 黄艾美耳球虫生物学特性研究 | 第54-56页 |
2.5 讨论 | 第56-59页 |
第三章 兔球虫病活卵囊疫苗的实验室研究 | 第59-78页 |
3.1 引言 | 第59页 |
3.2 材料 | 第59-60页 |
3.2.1 实验动物与虫株 | 第59页 |
3.2.2 主要试剂 | 第59-60页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第60页 |
3.2.4 试验条件 | 第60页 |
3.3 方法 | 第60-64页 |
3.3.1 各疫苗组分的制备和保存 | 第60页 |
3.3.2 不同配比的疫苗试制 | 第60-61页 |
3.3.3 兔球虫混种免疫可行性研究试验设计 | 第61页 |
3.3.4 兔球虫病疫苗组分最小免疫剂量研究试验设计 | 第61-62页 |
3.3.5 兔球虫病疫苗各组分免疫力建立的相互影响研究 | 第62页 |
3.3.6 家兔免疫保护建立日龄的研究 | 第62-63页 |
3.3.7 兔球虫病疫苗免疫持续期试验 | 第63-64页 |
3.3.8 兔球虫病疫苗模拟田间试验效力检测试验 | 第64页 |
3.3.9 数据统计 | 第64页 |
3.4 结果 | 第64-76页 |
3.4.1 兔球虫野生虫株共同免疫的可行性研究 | 第64-66页 |
3.4.2 疫苗用虫株最佳免疫剂量研究 | 第66-69页 |
3.4.3 疫苗用虫株共免疫对免疫保护建立影响的研究 | 第69-71页 |
3.4.4 断奶仔兔疫苗免疫最佳日龄的研究 | 第71-73页 |
3.4.5 疫苗免疫持续期的研究 | 第73页 |
3.4.6 兔球虫病三联活卵囊疫苗的模拟田间试验研究 | 第73-76页 |
3.5 讨论 | 第76-78页 |
第四章 大型艾美耳球虫Profilin蛋白的克隆表达与免疫原性研究 | 第78-93页 |
4.1 引言 | 第78页 |
4.2 材料 | 第78-79页 |
4.2.1 实验动物与虫株 | 第78页 |
4.2.2 主要试材料及试剂盒 | 第78-79页 |
4.3 方法 | 第79-86页 |
4.3.1 球虫RNA的提取 | 第79-80页 |
4.3.2 简并引物及PCR反应 | 第80-81页 |
4.3.3 PCR产物的回收连接转化测序 | 第81-82页 |
4.3.4 原核表达载体的构建 | 第82页 |
4.3.5 profilin蛋白的原核表达 | 第82-83页 |
4.3.6 多克隆抗体的制备 | 第83页 |
4.3.7 间接免疫荧光 | 第83页 |
4.3.8 Western-blot鉴定 | 第83-84页 |
4.3.9 Real-time PCR鉴定基因转录水平 | 第84页 |
4.3.10 Profilin蛋白的免疫原性鉴定 | 第84-85页 |
4.3.11 针对profilin蛋白的特异性细胞免疫应答检测研究 | 第85-86页 |
4.4 结果 | 第86-91页 |
4.4.1 大型艾美耳球虫profilin基因的克隆 | 第86-87页 |
4.4.2 大型艾美耳球虫profilin蛋白的原核表达及多抗制备 | 第87-88页 |
4.4.3 大型艾美耳球虫profilin蛋白的阶段性表达与定位 | 第88-90页 |
4.4.4 大型艾美耳球虫profilin蛋白的免疫原性研究 | 第90页 |
4.4.5 Profilin蛋白激发特异性细胞免疫应答的研究 | 第90-91页 |
4.5 讨论 | 第91-93页 |
第五章 结论 | 第93-94页 |
第六章 创新点 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-103页 |
附录 | 第103-109页 |
致谢 | 第109-111页 |
个人简介 | 第111-112页 |