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五个兔球虫虫种的生物学特性及兔球虫病疫苗的初步研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词表第13-15页
第一章 文献综述第15-27页
    1.1 兔球虫的研究进展第15-25页
        1.1.1 兔球虫分类与形态学特征第15-16页
        1.1.2 兔球虫的生活史第16-17页
        1.1.3 兔球虫的致病性研究第17-19页
        1.1.4 兔艾美耳球虫的免疫原性研究第19-20页
        1.1.5 兔艾美耳球虫激发宿主产生的免疫应答特点第20-21页
        1.1.6 兔球虫的分子鉴别诊断第21-22页
        1.1.7 兔球虫病的药物治疗第22-23页
        1.1.8 兔球虫病活卵囊疫苗的研究第23-24页
        1.1.9 兔球虫免疫优势抗原的寻找及profilin蛋白的相关研究进展第24-25页
    1.2 研究目的第25-26页
    1.3 研究内容第26页
        1.3.1 对多个兔球虫虫株进行生物学特性鉴定第26页
        1.3.2 进行兔球虫病疫苗的初步研究第26页
        1.3.3 兔球虫免疫保护性抗原的寻找和免疫原性研究第26页
    1.4 研究目标第26-27页
第二章 兔球虫原始虫株和早熟虫株的生物学特性研究第27-59页
    2.1 引言第27页
    2.2 材料第27-29页
        2.2.1 试验虫株第27页
        2.2.2 实验动物及培育方法第27页
        2.2.3 主要试剂第27-28页
        2.2.4 实验用溶液第28-29页
        2.2.5 实验设备第29页
    2.3 方法第29-33页
        2.3.1 卵囊的接种、收集与纯化第29-30页
        2.3.2 单卵囊的分离及全基因组扩增第30-31页
        2.3.3 PCR鉴定引物及反应体系第31-32页
        2.3.4 PCR产物的回收、链接转化及测序第32页
        2.3.5 兔球虫的形态学鉴定第32页
        2.3.6 兔球虫致病性及免疫原性试验设计第32-33页
        2.3.7 各虫株耐药性检测试验设计第33页
        2.3.8 数据统计第33页
    2.4 结果第33-56页
        2.4.1 大型艾美耳球虫原始株的生物学鉴定第33-37页
        2.4.2 中型艾美耳球虫原始株和早熟株生物学特性研究第37-44页
        2.4.3 肠艾美耳球虫原始株和早熟株生物学特性研究第44-50页
        2.4.4 无残艾美耳球虫生物学特性研究第50-54页
        2.4.5 黄艾美耳球虫生物学特性研究第54-56页
    2.5 讨论第56-59页
第三章 兔球虫病活卵囊疫苗的实验室研究第59-78页
    3.1 引言第59页
    3.2 材料第59-60页
        3.2.1 实验动物与虫株第59页
        3.2.2 主要试剂第59-60页
        3.2.3 主要仪器设备第60页
        3.2.4 试验条件第60页
    3.3 方法第60-64页
        3.3.1 各疫苗组分的制备和保存第60页
        3.3.2 不同配比的疫苗试制第60-61页
        3.3.3 兔球虫混种免疫可行性研究试验设计第61页
        3.3.4 兔球虫病疫苗组分最小免疫剂量研究试验设计第61-62页
        3.3.5 兔球虫病疫苗各组分免疫力建立的相互影响研究第62页
        3.3.6 家兔免疫保护建立日龄的研究第62-63页
        3.3.7 兔球虫病疫苗免疫持续期试验第63-64页
        3.3.8 兔球虫病疫苗模拟田间试验效力检测试验第64页
        3.3.9 数据统计第64页
    3.4 结果第64-76页
        3.4.1 兔球虫野生虫株共同免疫的可行性研究第64-66页
        3.4.2 疫苗用虫株最佳免疫剂量研究第66-69页
        3.4.3 疫苗用虫株共免疫对免疫保护建立影响的研究第69-71页
        3.4.4 断奶仔兔疫苗免疫最佳日龄的研究第71-73页
        3.4.5 疫苗免疫持续期的研究第73页
        3.4.6 兔球虫病三联活卵囊疫苗的模拟田间试验研究第73-76页
    3.5 讨论第76-78页
第四章 大型艾美耳球虫Profilin蛋白的克隆表达与免疫原性研究第78-93页
    4.1 引言第78页
    4.2 材料第78-79页
        4.2.1 实验动物与虫株第78页
        4.2.2 主要试材料及试剂盒第78-79页
    4.3 方法第79-86页
        4.3.1 球虫RNA的提取第79-80页
        4.3.2 简并引物及PCR反应第80-81页
        4.3.3 PCR产物的回收连接转化测序第81-82页
        4.3.4 原核表达载体的构建第82页
        4.3.5 profilin蛋白的原核表达第82-83页
        4.3.6 多克隆抗体的制备第83页
        4.3.7 间接免疫荧光第83页
        4.3.8 Western-blot鉴定第83-84页
        4.3.9 Real-time PCR鉴定基因转录水平第84页
        4.3.10 Profilin蛋白的免疫原性鉴定第84-85页
        4.3.11 针对profilin蛋白的特异性细胞免疫应答检测研究第85-86页
    4.4 结果第86-91页
        4.4.1 大型艾美耳球虫profilin基因的克隆第86-87页
        4.4.2 大型艾美耳球虫profilin蛋白的原核表达及多抗制备第87-88页
        4.4.3 大型艾美耳球虫profilin蛋白的阶段性表达与定位第88-90页
        4.4.4 大型艾美耳球虫profilin蛋白的免疫原性研究第90页
        4.4.5 Profilin蛋白激发特异性细胞免疫应答的研究第90-91页
    4.5 讨论第91-93页
第五章 结论第93-94页
第六章 创新点第94-95页
参考文献第95-103页
附录第103-109页
致谢第109-111页
个人简介第111-112页

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