致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略语表 | 第10-13页 |
第一章 引言 | 第13-16页 |
第二章 材料和方法 | 第16-23页 |
2.1 主要试剂与仪器 | 第16页 |
2.1.1 主要试剂 | 第16页 |
2.1.2 主要仪器 | 第16页 |
2.2 THP-1巨噬细胞的诱导、培养和实验分组 | 第16-17页 |
2.3 CCK8法检测砷暴露半数抑制浓度 | 第17页 |
2.4 流式细胞术检测巨噬细胞内ROS生成 | 第17页 |
2.5 激光共聚焦显微镜检测p47phox在巨噬细胞内的定位 | 第17页 |
2.6 qRT-PCR检测巨噬细胞内ABCA1基因的表达 | 第17-19页 |
2.6.1 引物稀释 | 第18页 |
2.6.2 RNA的抽提 | 第18页 |
2.6.3 RNA纯度鉴定 | 第18页 |
2.6.4 RNA逆转录为cDNA | 第18-19页 |
2.6.5 实时定量PCR | 第19页 |
2.7 Western-blot法检测ABCA1蛋白的表达 | 第19-20页 |
2.7.1 蛋白的样本制备 | 第19页 |
2.7.2 SDS-PAGE电泳 | 第19页 |
2.7.3 转膜 | 第19-20页 |
2.7.4 封闭孵育抗体 | 第20页 |
2.7.5 化学发光,凝胶图像分析 | 第20页 |
2.8 焦磷酸测序检测ABCA1基因启动子区DNA甲基化情况 | 第20-21页 |
2.9 油红O染色检测巨噬细胞内脂质富集情况 | 第21-22页 |
2.10 Hoechst染色检测细胞凋亡 | 第22页 |
2.11 流式细胞术检测巨噬细胞凋亡率 | 第22页 |
2.12 数据处理 | 第22-23页 |
第三章 结果 | 第23-31页 |
3.1 CCK8法检测砷暴露半数抑制浓度 | 第23页 |
3.2 砷暴露增强THP-1巨噬细胞中ROS产生 | 第23-24页 |
3.3 砷暴露增强THP-1巨噬细胞中NADPH氧化酶装配 | 第24-25页 |
3.4 砷暴露促进THP-1巨噬细胞ABCA1基因启动子区DNA甲基化 | 第25-26页 |
3.5 砷暴露抑制THP-1巨噬细胞ABCA1基因的表达 | 第26-27页 |
3.6 砷暴露抑制THP-1巨噬细胞ABCA1蛋白的表达 | 第27-28页 |
3.7 砷暴露促进THP-1巨噬细胞脂质富集抑制胆固醇流出 | 第28-29页 |
3.8 砷暴露促进THP-1巨噬细胞凋亡 | 第29-31页 |
第四章 讨论 | 第31-34页 |
第五章 结论 | 第34-35页 |
第六章 综述 | 第35-41页 |
2.1 砷与活性氧 | 第36页 |
2.2 砷与内皮功能紊乱 | 第36-38页 |
2.3 砷与NADPH氧化酶(NOX) | 第38页 |
2.4 砷与脂质分布及炎症标志物 | 第38-39页 |
2.5 小结和展望 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |