| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 香菇概况 | 第12-13页 |
| 1.1.1 香菇的形态特征与营养价值 | 第12页 |
| 1.1.2 香菇对栽培基质的利用现状 | 第12-13页 |
| 1.2 真菌木质纤维素降解相关研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 真菌木质纤维素降解机制的研究概况 | 第13页 |
| 1.2.2 真菌木质纤维素降解酶基因的表达调控 | 第13-15页 |
| 1.2.3 香菇木质纤维素降解酶的相关研究 | 第15-16页 |
| 1.3 真菌HMG-box蛋白研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 真菌HMG-box蛋白结构特点 | 第16-17页 |
| 1.3.2 真菌HMG-box蛋白功能研究 | 第17-18页 |
| 1.4 RNAi在真菌基因功能研究中的应用 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-34页 |
| 2.2.1 LELCRP1蛋白结构与同源性分析 | 第22页 |
| 2.2.2 lelcrp1基因沉默载体构建 | 第22-28页 |
| 2.2.3 农杆菌介导的香菇菌丝转化 | 第28页 |
| 2.2.4 RNAi转化子筛选 | 第28-29页 |
| 2.2.5 Southern杂交 | 第29页 |
| 2.2.6 转化子木质纤维素降解相关酶基因表达水平分析 | 第29-30页 |
| 2.2.7 TAIL-PCR | 第30-31页 |
| 2.2.8 纤维素+SLS诱导下的胞外酶活性测定 | 第31-33页 |
| 2.2.9 转化子菌丝生长速度分析 | 第33页 |
| 2.2.10 不同碳源下的菌丝生长情况分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-48页 |
| 3.1 LELCRP1蛋白结构与同源性分析 | 第34-35页 |
| 3.2 重组质粒pCAMBIA1300-g-lelcrp1检测 | 第35-37页 |
| 3.2.1 菌落PCR验证 | 第35页 |
| 3.2.2 酶切验证 | 第35-36页 |
| 3.2.3 测序验证 | 第36-37页 |
| 3.3 RNAi转化子筛选 | 第37-39页 |
| 3.3.1 PCR检测 | 第37-38页 |
| 3.3.2 qRT-PCR分析 | 第38-39页 |
| 3.4 Southern杂交 | 第39-40页 |
| 3.5 木质纤维素降解相关酶基因表达水平分析 | 第40-43页 |
| 3.6 转化子T-DNA插入位点检测 | 第43-44页 |
| 3.7 香菇菌丝胞外酶活性分析 | 第44-46页 |
| 3.8 香菇菌丝生长速度测定 | 第46-47页 |
| 3.9 不同碳源下的香菇菌丝生长情况 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| 4.1 RNAi在lelcrp1基因功能研究中的效果评价 | 第48页 |
| 4.2 lelcrp1沉默对香菇木质纤维素降解相关酶基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 4.3 LELCRP1对香菇木质纤维素降解相关酶活力的影响 | 第49-50页 |
| 4.4 LELCRP1对香菇菌丝生长速率的影响 | 第50页 |
| 4.5 LELCRP1对不同碳源下香菇菌丝生长的影响 | 第50-51页 |
| 4.6 展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 Ⅰ 常用试剂的配制 | 第61-65页 |
| 附录 Ⅱ 试验方法 | 第65-70页 |
| 附录 Ⅲ LELCRP1同源蛋白进化树 | 第70-71页 |
| 附录 Ⅳ 文章发表情况 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
