| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 主要符号对照表 | 第15-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-28页 |
| 1.1 叶绿体内油脂活动 | 第16-21页 |
| 1.1.1 酰基-ACP合成过程 | 第16-17页 |
| 1.1.2 游离脂肪酸的合成及转运 | 第17-18页 |
| 1.1.3 类囊体膜脂的合成和降解 | 第18-21页 |
| 1.2 内质网内油脂活动 | 第21-22页 |
| 1.2.1 脂酰-CoA进入内质网过程 | 第21页 |
| 1.2.2 TAG合成过程 | 第21-22页 |
| 1.3 过氧化物酶体中油脂活动 | 第22-26页 |
| 1.3.1 TAG分解过程 | 第23页 |
| 1.3.2 脂肪酸进入过氧化物酶体过程 | 第23-24页 |
| 1.3.3 β-氧化过程 | 第24-26页 |
| 1.4 研究内容与意义 | 第26-28页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第26页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第26-28页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第28-42页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.1 藻种来源及培养条件 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 实验使用的仪器 | 第28页 |
| 2.1.4 培养基及相关试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-42页 |
| 2.2.1 提取莱茵衣藻UVM4的RNA | 第29页 |
| 2.2.2 RNA反转为cDNA | 第29-30页 |
| 2.2.3 过表达载体的构建 | 第30-33页 |
| 2.2.4 过表达载体转化莱茵衣藻及转化子筛选 | 第33-34页 |
| 2.2.5 采用PCR扩增方法对突变体进行筛选 | 第34-35页 |
| 2.2.6 莱茵衣藻转化子的生长状况 | 第35-36页 |
| 2.2.7 莱茵衣藻转化子荧光定量检测 | 第36页 |
| 2.2.8 莱茵衣藻转化子经尼罗红染色后荧光强度的测定 | 第36-37页 |
| 2.2.9 莱茵衣藻转化子叶绿素-a含量的测定 | 第37-38页 |
| 2.2.10 莱茵衣藻转化子总脂的提取 | 第38页 |
| 2.2.11 莱茵衣藻转化子脂肪酸甲酯化与气相色谱分析 | 第38-39页 |
| 2.2.12 对CrFAX基因进行酵母功能验证 | 第39页 |
| 2.2.13 转录组分析差异表达基因,并进行荧光定量PCR验证 | 第39-42页 |
| 第3章 研究结果与分析 | 第42-72页 |
| 3.1 莱茵衣藻FAX基因的生物信息学分析 | 第42-49页 |
| 3.1.1 对多物种的FAX基因进行序列分析 | 第42-46页 |
| 3.1.2 CrFAX基因外显子分析 | 第46-47页 |
| 3.1.3 CrFAX蛋白序列分析 | 第47页 |
| 3.1.4 CrFAX空间结构分析 | 第47-48页 |
| 3.1.5 CrFAX亚细胞定位分析 | 第48-49页 |
| 3.2 莱茵衣藻FAX过表达载体构建 | 第49-50页 |
| 3.2.1 莱茵衣藻FAX基因扩增结果 | 第49页 |
| 3.2.2 测序结果分析 | 第49-50页 |
| 3.2.3 构建莱茵衣藻过表达载体 | 第50页 |
| 3.3 获得CrFAX过量表达莱茵衣藻 | 第50-51页 |
| 3.3.1 过表达载体转化莱茵衣藻 | 第50页 |
| 3.3.2 莱茵衣藻转化子筛选 | 第50-51页 |
| 3.3.3 转录水平(Realtime PCR)检测 | 第51页 |
| 3.4 莱茵衣藻转化子生长状况分析 | 第51-54页 |
| 3.4.1 细胞数与OD_(680)的线性关系 | 第52页 |
| 3.4.2 生长曲线绘制 | 第52-53页 |
| 3.4.3 FAX基因过表达莱茵衣藻的叶绿素-a含量分析 | 第53-54页 |
| 3.5 FAX基因过表达莱茵衣藻的脂质累积情况分析 | 第54-59页 |
| 3.5.1 尼罗红荧光染色法快速测定细胞内中性脂含量 | 第54-56页 |
| 3.5.2 FAX基因过表达莱茵衣藻的总脂含量 | 第56-57页 |
| 3.5.3 FAX基因过表达莱茵衣藻的脂肪酸组成分析 | 第57-59页 |
| 3.6 FAX过表达莱茵衣藻的转录组学分析及验证 | 第59-66页 |
| 3.6.1 样品RNA质量检测结果 | 第59页 |
| 3.6.2 测序数据量统计 | 第59-60页 |
| 3.6.3 数据比对与质控 | 第60页 |
| 3.6.4 差异基因分析(Noiseq方法) | 第60-61页 |
| 3.6.5 差异表达基因的GO功能显著性富集分析 | 第61-63页 |
| 3.6.6 差异基因Pathway显著性分析 | 第63-65页 |
| 3.6.7 差异表达基因CrACS1和CrACS2的荧光定量PCR验证 | 第65-66页 |
| 3.7 酵母中验证莱茵衣藻FAX功能 | 第66页 |
| 3.8 在外加碳源条件下,FAX基因过表达莱茵衣藻脂质累积情况分析 | 第66-72页 |
| 3.8.1 在外加3gL~(-1)CH_3COONa时,莱茵衣藻转化子的脂质累积情况分析 | 第66-68页 |
| 3.8.2 在外加6gL~(-1)Glucose时,莱茵衣藻转化子的脂质累积情况分析 | 第68-72页 |
| 第4章 结论与展望 | 第72-75页 |
| 4.1 讨论与结论 | 第72-74页 |
| 4.1.1 讨论 | 第72-74页 |
| 4.1.2 结论 | 第74页 |
| 4.2 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 在学期间所发表的论文 | 第86页 |
