| 英文缩略词对表 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 第一部分 SHP2~(E76K)和SHP2WT促进结肠癌细胞的恶性生物学行为及SHP2在病理标本中高表达 | 第17-54页 |
| 1 前言 | 第17-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| 2.1 研究对象 | 第23-24页 |
| 2.2 抗体和试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 部分试剂的配制 | 第25-28页 |
| 2.4 主要仪器和来源 | 第28-29页 |
| 2.5 实验方法 | 第29-39页 |
| 2.5.1 细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.5.2 载体构建 | 第30-35页 |
| 2.5.3 慢病毒的包装、收集、滴度检测 | 第35-36页 |
| 2.5.4 稳转细胞系的建立 | 第36-37页 |
| 2.5.5 细胞增殖相关实验 | 第37页 |
| 2.5.6 Transwell细胞迁移实验 | 第37-38页 |
| 2.5.7 裸鼠成瘤实验 | 第38页 |
| 2.5.8 免疫组化 | 第38-39页 |
| 2.5.9 统计分析 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-49页 |
| 3.1 SHP2WT和SHP2~(E76K)质粒构建成功 | 第39-42页 |
| 3.2 SHP2WT和SHP2~(E76K)结肠癌稳转细胞株的建立 | 第42-43页 |
| 3.3 MTT法检测SHP2WT过表达及SHP2~(E76K)激活突变对结肠癌细胞增殖的影响. | 第43页 |
| 3.4 平板克隆检测SHP2WT过表达及SHP2~(E76K)激活突变对结肠癌细胞增殖的影响 | 第43-45页 |
| 3.5 软琼脂检测SHP2WT过表达及SHP2~(E76K)激活突变结肠癌细胞的非锚定生长能力 | 第45-46页 |
| 3.6 SHP2WT过表达及SHP2~(E76K)激活突变可以促进结肠癌细胞的迁移能力 | 第46-47页 |
| 3.7 SHP2WT过表达及SHP2~(E76K)激活突变可以促进结肠癌细胞在裸鼠体内的成瘤能力 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第二部分 SHP2~(E76K)和SHP2WT促进结肠癌细胞恶性生物学行为的机制研究 | 第54-78页 |
| 1 前言 | 第54-58页 |
| 2 材料与方法 | 第58-63页 |
| 2.1 研究对象 | 第58页 |
| 2.2 抗体和试剂 | 第58-59页 |
| 2.3 部分试剂的配制 | 第59页 |
| 2.4 主要仪器和来源 | 第59页 |
| 2.5 实验方法 | 第59-63页 |
| 2.5.1 免疫荧光实验 | 第59页 |
| 2.5.2 核浆分离 | 第59-60页 |
| 2.5.3 免疫共沉淀(CO-IP) | 第60-61页 |
| 2.5.4 核浆分离 | 第61-63页 |
| 3 结果 | 第63-71页 |
| 3.1 细胞形态学显微镜下观察发现SHP2过表达及~(E76K)激活突变组细胞表现有间质样改变 | 第63-64页 |
| 3.2 Westernblot检测EMT相关标志物 | 第64-65页 |
| 3.3 免疫荧光检测EMT典型标志物 | 第65页 |
| 3.4 Wnt/β-catenin信号通路参与了SHP2过表达及~(E76K)激活突变诱导的EMT的发生 | 第65-66页 |
| 3.5 SHP2过表达及~(E76K)激活突变可以促进结肠癌细胞在裸鼠体内的肝转移 | 第66-71页 |
| 4 讨论 | 第71-74页 |
| 5 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 第三部分 SHP2~(E76K)激活突变对结肠炎相关性结直肠癌发生的影响 | 第78-101页 |
| 1 前言 | 第78-82页 |
| 2 材料与方法 | 第82-89页 |
| 2.1 实验材料 | 第82页 |
| 2.2 Ptpn11~(E76K)基因敲入小鼠模型的建立 | 第82-83页 |
| 2.3 Ptpn11~(E76K)基因敲入小鼠与pVillin-Cre工具鼠的配繁及基因型鉴定 | 第83-87页 |
| 2.4 AOM/DSS诱导结肠炎相关性结直肠癌模型 | 第87-88页 |
| 2.5 统计分析 | 第88-89页 |
| 3 结果 | 第89-95页 |
| 3.1 Ptpn11~(E76K)小鼠与pVillin-Cre工具鼠配繁的子代基因型鉴定结果 | 第89-91页 |
| 3.2 Ptpn11~(E76K)小鼠对AOM/DSS结直肠癌诱导模型炎症反应的影响 | 第91-93页 |
| 3.3 Ptpn11~(E76K)小鼠AOM/DSS结直肠癌诱导模型肿瘤发生情况 | 第93-95页 |
| 4 讨论 | 第95-97页 |
| 5 结论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-101页 |
| 附一 个人简历 | 第101-102页 |
| 附二 致谢 | 第102-103页 |
| 综述 | 第103-119页 |
| 参考文献 | 第111-119页 |
| 附件 | 第119-120页 |
