摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第12-18页 |
1.1 种质资源保存 | 第12页 |
1.2 种质资源保存的方法 | 第12-14页 |
1.3 冷冻保存中细胞器损伤 | 第14-15页 |
1.3.1 细胞膜损伤 | 第14页 |
1.3.2 细胞质损伤 | 第14-15页 |
1.3.3 细胞核损伤 | 第15页 |
1.3.4 线粒体损伤 | 第15页 |
1.4 冷冻对细胞氧化应激和凋亡的影响 | 第15-16页 |
1.5 线粒体靶向抗氧化剂MitoQ | 第16-18页 |
第二章 线粒体靶向抗氧化剂MitoQ对猪卵母细胞成熟发育的影响 | 第18-30页 |
2.1 材料 | 第18-21页 |
2.1.1 试剂和仪器 | 第18-21页 |
2.2 方法 | 第21-23页 |
2.2.1 猪卵母细胞采集和体外成熟培养 | 第21页 |
2.2.2 线粒体膜电位检测 | 第21页 |
2.2.3 凋亡早期检测 | 第21-22页 |
2.2.4 活性氧检测(ROS) | 第22页 |
2.2.5 脂质氧化检测(MDA) | 第22页 |
2.2.6 Pan-Caspase染色 | 第22页 |
2.2.7 凋亡相关基因表达检测 | 第22-23页 |
2.2.8 数据分析 | 第23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-27页 |
2.3.1 MitoQ对猪卵母细胞线粒体功能和凋亡水平的影响 | 第23-25页 |
2.3.2 MitoQ对猪卵母细胞体外成熟发育抗氧化能力的影响 | 第25-26页 |
2.3.3 MitoQ对猪卵母细胞成熟培养后发育能力的影响 | 第26-27页 |
2.3.4 线粒体功能和凋亡相关基因表达 | 第27页 |
2.4 讨论 | 第27-30页 |
第三章 线粒体靶向抗氧化剂MitoQ在猪卵母细胞冷冻保存中的应用 | 第30-39页 |
3.1 材料 | 第30页 |
3.1.1 试剂和仪器 | 第30页 |
3.2 .方法 | 第30-32页 |
3.2.1 卵母细胞的采集和体外成熟 | 第30-31页 |
3.2.2 玻璃化冷冻和解冻 | 第31页 |
3.2.3 卵母细胞冻后存活率和孤雌发育能力测定 | 第31页 |
3.2.4 线粒体膜电位检测 | 第31页 |
3.2.5 早期凋亡检测 | 第31页 |
3.2.6 活性氧检测 | 第31页 |
3.2.7 脂质氧化检测 | 第31-32页 |
3.2.8 总Caspase色 | 第32页 |
3.2.9 凋亡相关基因表达检测 | 第32页 |
3.2.10 数据分析 | 第32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-37页 |
3.3.1 冻后MitoQ处理对猪卵母细胞线粒体膜电位和凋亡水平的影响 | 第32-35页 |
3.3.2 冻后MitoQ处理对猪卵母细胞氧化应激水平的影响 | 第35-36页 |
3.3.3 冻后MitoQ处理对猪卵母细胞存活和体外发育的影响 | 第36页 |
3.3.4 线粒体功能和凋亡相关基因表达 | 第36-37页 |
3.4 讨论 | 第37-39页 |
全文总结 | 第39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
附录 | 第45-47页 |
硕士期间主要科研成果 | 第47-48页 |
致谢 | 第48页 |