摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文缩略词表(ABBREVIATION) | 第14-16页 |
引言 | 第16-18页 |
1. 实验动物来源及分组 | 第18-20页 |
1.1 实验动物来源 | 第18页 |
1.2 实验动物分组 | 第18-20页 |
2. 主要实验仪器、试剂以及部分试剂配制方法 | 第20-26页 |
2.1 主要仪器及设备 | 第20-21页 |
2.2 主要试剂 | 第21-23页 |
2.3 部分试剂配制 | 第23-26页 |
3. 实验方法与步骤 | 第26-42页 |
3.1 视网膜缺血再灌注模型的建立 | 第26页 |
3.2 视网膜组织病理学检查 | 第26-28页 |
3.2.1 石蜡组织切片HE染色制作 | 第26-27页 |
3.2.2 免疫组织化学染色 | 第27-28页 |
3.2.3 免疫荧光染色 | 第28页 |
3.3 TUNNEL染色 | 第28-29页 |
3.4 视网膜组织中各种因子m RNA转录水平的测定 | 第29-33页 |
3.4.1 分离视网膜 | 第29页 |
3.4.2 RNA的提取 | 第29-30页 |
3.4.3 DNaseⅠ(RNaseFree)去除基因组DNA污染 | 第30页 |
3.4.4 RNA的纯化 | 第30-31页 |
3.4.5 总RNA纯度及浓度检测 | 第31页 |
3.4.6 m RNA逆转录为c DNA | 第31页 |
3.4.7 半定量PCR | 第31-32页 |
3.4.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第32-33页 |
3.5 ELISA法测定视网膜内的IL-6、IL-10、TNF-α、MCP-1 | 第33-35页 |
3.5.1 准备工作 | 第33页 |
3.5.2 实验步骤 | 第33-35页 |
3.5.3 结果的计算与判断 | 第35页 |
3.6 蛋白免疫印记法检测视网膜P65、VEGF等蛋白的表达 | 第35-38页 |
3.6.1 蛋白质的提取与定量 | 第35页 |
3.6.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第35-36页 |
3.6.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-38页 |
3.7 白细胞粘附功能测定 | 第38-39页 |
3.8 视网膜铺片制备检测GFAP表达 | 第39页 |
3.9 ROS荧光探针-DHE。 | 第39-40页 |
3.10 视网膜MDA检测 | 第40页 |
3.11 统计学分析 | 第40-42页 |
4. 结果 | 第42-56页 |
4.1 成功应用眼高压法诱导了小鼠视网膜缺血再灌注模型 | 第42页 |
4.2 奥曲肽减轻视网膜缺血再灌注病理学变化 | 第42-45页 |
4.3 奥曲肽可以减少视网膜凋亡细胞的数量 | 第45-47页 |
4.4 奥曲肽减少视网膜细胞MDA水平及ROS含量 | 第47-48页 |
4.5 奥曲肽对视网膜I/R损伤TNF-α、IL-6、MCP-1、IL-10炎症因子表达的影响 | 第48-50页 |
4.6 奥曲肽减少视网膜I/R模型中黏附因子ICAM-1、VEGF的表达 | 第50-53页 |
4.7 奥曲肽对视网膜缺血再灌注模型中p65、p-p65的影响 | 第53页 |
4.8 奥曲肽对视网膜缺血再灌注模型中GFAP的影响 | 第53-54页 |
4.9 奥曲肽减轻视网膜I/R模型中白细胞粘附于血管壁的程度 | 第54-56页 |
5. 讨论 | 第56-64页 |
结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
综述 | 第74-88页 |
参考文献 | 第82-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
在读期间参加的学术会议及研究成果 | 第90-91页 |