摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
引言 | 第6-8页 |
第1章 材料与方法 | 第8-20页 |
1.1 细胞及主要试剂 | 第8页 |
1.2 主要仪器 | 第8-9页 |
1.3 溶液配制 | 第9-10页 |
1.4 实验方法 | 第10-20页 |
1.4.1 细胞培养、传代、冻存和复苏 | 第10-11页 |
1.4.2 药物干预 | 第11页 |
1.4.3 实验分组 | 第11页 |
1.4.4 MTT实验 | 第11页 |
1.4.5 流式细胞仪检测细胞凋亡(AnnexinV-FITC/PI双染法) | 第11-12页 |
1.4.6 蛋白样品制备 | 第12-13页 |
1.4.7 BCA法测蛋白浓度 | 第13页 |
1.4.8 western blot | 第13-16页 |
1.4.9 实时定量PCR(Real-time PCR)方法检细胞中mRNA的表达 | 第16-19页 |
1.4.9.1 Trizol法RNA提取步骤 | 第16页 |
1.4.9.2RNA浓度的测定 | 第16-17页 |
1.4.9.3 引物的设计及合成 | 第17页 |
1.4.9.4 反转录 | 第17-18页 |
1.4.9.5 PCR扩增 | 第18-19页 |
1.4.10 统计学处理 | 第19-20页 |
第2章 结果 | 第20-29页 |
2.1 MTT比色法测定IP_6对HT-29细胞凋亡的诱导作用效果 | 第20-21页 |
2.2 Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡 | 第21-22页 |
2.3 IP_6对PI3K、Akt、pAkt、caspase-9 蛋白表达的影响 | 第22-23页 |
2.4 IP_6抑制HT-29细胞PI3K、Akt、caspase-9 及mTOR mRNA的表达,上调caspase-9 及NF-κ B mRNA的表达 | 第23-29页 |
2.4.1 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞PI3K、Akt的mRNA表达的影响 | 第23-25页 |
2.4.2 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞caspase-9mRNA表达的影响 | 第25-26页 |
2.4.3 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞mTOR mRNA表达的影响 | 第26-27页 |
2.4.4 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞NF-κ B mRNA表达的影响 | 第27-29页 |
第3章 讨论 | 第29-32页 |
结论 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
综述 | 第36-46页 |
参考文献 | 第42-46页 |
缩略词表 | 第46-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |