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肌醇六磷酸通过PI3K/Akt信号通路对结肠癌HT-29细胞生长的影响

摘要第2-3页
Abstract第3页
引言第6-8页
第1章 材料与方法第8-20页
    1.1 细胞及主要试剂第8页
    1.2 主要仪器第8-9页
    1.3 溶液配制第9-10页
    1.4 实验方法第10-20页
        1.4.1 细胞培养、传代、冻存和复苏第10-11页
        1.4.2 药物干预第11页
        1.4.3 实验分组第11页
        1.4.4 MTT实验第11页
        1.4.5 流式细胞仪检测细胞凋亡(AnnexinV-FITC/PI双染法)第11-12页
        1.4.6 蛋白样品制备第12-13页
        1.4.7 BCA法测蛋白浓度第13页
        1.4.8 western blot第13-16页
        1.4.9 实时定量PCR(Real-time PCR)方法检细胞中mRNA的表达第16-19页
            1.4.9.1 Trizol法RNA提取步骤第16页
            1.4.9.2RNA浓度的测定第16-17页
            1.4.9.3 引物的设计及合成第17页
            1.4.9.4 反转录第17-18页
            1.4.9.5 PCR扩增第18-19页
        1.4.10 统计学处理第19-20页
第2章 结果第20-29页
    2.1 MTT比色法测定IP_6对HT-29细胞凋亡的诱导作用效果第20-21页
    2.2 Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡第21-22页
    2.3 IP_6对PI3K、Akt、pAkt、caspase-9 蛋白表达的影响第22-23页
    2.4 IP_6抑制HT-29细胞PI3K、Akt、caspase-9 及mTOR mRNA的表达,上调caspase-9 及NF-κ B mRNA的表达第23-29页
        2.4.1 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞PI3K、Akt的mRNA表达的影响第23-25页
        2.4.2 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞caspase-9mRNA表达的影响第25-26页
        2.4.3 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞mTOR mRNA表达的影响第26-27页
        2.4.4 IP_6作用后对HT-29结肠癌细胞NF-κ B mRNA表达的影响第27-29页
第3章 讨论第29-32页
结论第32-33页
参考文献第33-36页
综述第36-46页
    参考文献第42-46页
缩略词表第46-47页
攻读学位期间的研究成果第47-48页
致谢第48-49页

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